Dorsal kök gangliyon (DRG) birincil kültürler sık fizyolojik fonksiyonları veya patoloji ile ilgili olayların duyusal sinir hücreleri incelemek için kullanılır. Burada, peptit FF reseptör yazdıktan sonra 2 stimülasyon ile seçici bir agonist nörotransmitter sürümü algılamak için bel DRG kültürler kullanımını göstermektedir.
Dorsal kök gangliyon (DRG) hücre organları duyusal sinir hücreleri içerir. Sözde tek kutuplu, çevre dokular, deri, kas ve viseral organlar yanı sıra merkezi sinir sistemi spinal dorsal boynuz gibi innervate iki aksonlar ile nöron bu türüdür. Duyusal sinir hücreleri dokunma, ağrı, termal ve amac duyumlar da dahil olmak üzere somatik duyu iletim. Bu nedenle, DRG birincil kültürler yaygın duyusuna hücresel mekanizmaları, duyusal sinir hücreleri ve sinirsel gelişim fizyolojik fonksiyonları incelemek için kullanılır. Kültürlü nöronlar Elektrofizyoloji, sinyal iletimi, nörotransmitter açıklaması, ya da kalsiyum görüntüleme ile ilgili çalışmalarda uygulanabilir. DRG birincil kültürlerle bilim adamları Disosiye DRG nöronlar tek biyokimyasal değişiklikler kültür veya birden çok hücre, birçok sınırlamaları aşmak içinde vivo deneyler ile ilişkili. Ticari olarak karşılaştırıldığında kullanılabilir DRG-Hibridoma hücre hatları veya ölümsüzleştirdi DRG nöronal hücre hatları, kompozisyon ve primer hücre özelliklerini çok daha doku duyusal nöronların benzer. Ancak, sınırlı sayıda tek bir hayvan izole olabilir kültürlü DRG primer hücre olması nedeniyle, yüksek üretilen iş ekranlar için çalışmalar hedefleme ilaç yapmak zordur. Geçerli makalede, DRG toplama ve kültür yordamları açıklanmıştır. Buna ek olarak, biz kültürlü DRG hücreleri peptid nörotransmiterler (kalsitonin gen ile ilgili peptid (CRGP) ve madde P (SP)) sürümü ikna etmek için (NPFFR2) ile bir peptit FF reseptör tip 2 agonist tedavisi göstermek.
Duyusal sinir hücreleri hücre organlarının DRG içinde yer alır. Bu nöronlar sözde tek kutuplu ve periferik doku ve merkezi sinir sistemi innervate. Periferik sinir uçlarının duyusal nöronların kas, cilt, viseral organlar ve diğer dokularda. arasında kemik bulunur Onlar sinir uçlarının spinal dorsal boynuz ve sinyalleri sonra somatik duyu1,2farklı artan yollar aracılığıyla beyne iletilir periferik hissi sinyalleri iletmek. Somatik duyu (yani, dokunmatik, ağrı ve ısı hissi) hissediyorum ve hareket ve mekansal oryantasyon (amac duyumları)1,3algıladıkları vücut sağlar. Dört birincil afferent aksonlar da dahil olmak üzere, alt sınıflarını Grup ben proprioception iskelet kas, deri mechanoreceptors için yanıt Grup II (Aβ) lifler yanıt ve Grup III (Aδ) (Aα) lifler ve acıya yanıt Grup V (C) lifler ve sıcaklık. Diğer farklı derece myelinated sadece C lifleri unmyelinated, iken.
Nociceptors doku hasarı için potansiyel taşıyan zararlı uyaranlara (mekanik, termal ve kimyasal uyarımı) tarafından etkinleştirilen birincil duyusal sinir hücreleri vardır. Bu nöronlar myelinated Aδ lifleri ile unmyelinated C lifleri1,4oluşur. Aδ lifleri sinir büyüme faktörü (NGF, trkA reseptör), CGRP ve SP. reseptörleri hızlı C lifleri peptidergic ve peptidergic C lifleri sınıflandırılır. Öte yandan, peptidergic C lifleri reseptörleri gliyal kaynaklı nörotrofik faktör (GDNF, RET ve GFR reseptörleri), isolectin IB4 ve ATP-gated iyon Kanal alt türü (P2X3)5,6,7için hızlı. Nociceptors iyon kanalları ifade tarafından seçkin ve nörotrofik faktör tarafından aktive,8sitokinler, nöropeptitler, ATP veya diğer kimyasal bileşikler. Stimülasyon, nörotransmiterler, CGRP, SP ve glutamat gibi spinal dorsal boynuz nosiseptif sinyalleri2iletimi için duyusal nöron terminallerinden serbest bırakmak. DRG sadece nöronlar oluşan değildir, aynı zamanda uydu Gliyal hücreler içerir. Uydu hücreleri duyusal sinir hücreleri çevreleyen ve mekanik ve metabolik destek9,10sağlar. İlginçtir, DRG uydu Gliyal hücreler ağrı hissi11düzenlenmesinde tutulabilir gösteren kanıt büyüyen bir gövdesi vardır.
Duyusal sinir hücreleri en sık kullanılan birincil nöronal hücre12 ve Elektrofizyoloji, sinyal iletimi ve nörotransmitter yayın çalışmaları için kullanılan rapor. Bunlar da yaygın nöronal gelişim, enflamatuar ağrı, nöropatik ağrı, cilt hissi (gibi kaşıntı) ve akson akıbet12,13,14,15hücresel mekanizmaları keşfetmek için kullanılır. DRG birincil kültürler deneysel bireylerde gerçekleştirilen çalışmalar gerçekleştirmek bilim adamları sağlayan biyokimyasal değişimler tek veya birden fazla hücre değerlendirmek için Disosiye nöronlar olarak kültürlü. Son zamanlarda, DRG başarıyla kültürlü insan organ bağış hangi büyük ölçüde translasyonel araştırma16yarar olabilir. DRG explants olarak Öte yandan, duyusal sinir hücreleri de kültürlü. DRG explants nöronlar Schwann hücreleri ve uydu gliyal hücrelerini de dahil olmak üzere, özgün doku mimarisini korumak ve nöronal ve nöronal olmayan hücreleri17arasındaki etkileşimler çalışma kullanışlıdır. DRG birincil kültürler içinde 2,5 h kolayca hazırlanabilir. Özellikleri ve hücre kompozisyon kaynağı DRG yüksek oranda yansıtıcı ve bu nedenle, belirli DRG (lomber veya torasik DRG) deneysel talepleri doğrultusunda toplanabilir. Embriyonik ve neonatal DRG nöronlar kültürleri NGF hayatta kalmak ve akson akıbet teşvik istemek, ama yetişkin nöronlar kültürleri medya12,17Nörotrofik faktörler eklenmesi gerekmez. Ayrıca gibi deneysel hayvan kullanımı gerektirmeyen ND7/23 ve F11, piyasada bulunan DRG-Hibridoma hücre hatları vardır. Ancak, geçici reseptör potansiyel katyon eksikliği kanal Alt familya V üye 1 (TRPV1) ifade (küçük duyusal nosiseptif nöronlar için önemli bir işaretleyici) ve uyumsuz gen ifade profilleri sınırlamak onların uygulamaları18. Son zamanlarda, are lâyık ölümsüzleştirdi DRG nöronal hücre satırlarını fare (50B11)19 elde edilmiş ve fare (MED)20, yüksek üretilen iş ekranları için çalışmalar hedefleme ilaç kullanın. Ancak, bu hücre satırları için profil oluşturma Gen ifadesinin henüz yapılması gerekiyor. Böylece, duyusal sinir hücreleri ölümsüzleştirdi bu hücrelere karşılaştırarak doğrulama deneyler devam etmektedir.
NPFFR2 DRG sentezlenmiş ve duyusal sinir terminallere spinal dorsal boynuz21translocated. Bu makalede, biz bel DRG hücre kültürü çalışmalarının ve onları nörotransmitter, CGRP ve SP. sürümü ikna etmek için NPFFR2 bir agonist ile tedavi için bir protokol sağlar NPFFR2 bağımlılığını daha fazla olan kültürlü DRG hücrelere transfected NPFFR2 küçük müdahale RNA (siRNA), kullanılarak test edilmiştir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Deneysel hayvan kullanan burada açıklanan tüm yöntemleri kurumsal hayvan bakım ve kullanmak Komitesi (IACUC) Chang Gung Üniversitesi (CGU ) tarafından kabul edildi.
1. toplamak bel DRG deneysel fareler
2. birincil kültür sıçan kereste DRG
Not: Aşağıdaki adımları bir laminar akış mahallede gerçekleştirilmesi gerekiyor.
3. transfection NPFFR2 siRNA DRG hücrelerdeki
4. serbest bırakmak-in nörotransmitter birincil DRG hücrelerden
5. CGRP ve SP ÇED
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Kültürlü bir şey tabak içinde sıçan bel DRG nöronlar gliyal hücre çoğalması etkisizleştirmek için ek Ara-C ve nöronal büyümeyi desteklemek üzere NGF kültür ortamında yetiştirilmiştir. Yaşam morfolojisi DRG hücreler görülmektedir. Şekil 3' te gösterildiği gibi tek bir nöron hücre gövdesi gün 1 bir tabak dibinde bağlı ve gözlem için seçili. Axon büyüme 1 – 3 gün takip. Gliyal hücreler çoğaltılamaz ve süreçleri duyusal nöron hücre gövdesi çevreleyen genişletilmiş. Başka bir kültür, CGRP protein nöronlar şeklinde ortaya çıkarmak için lekeli. Şekil 4' te, CGRP protein boyama sitoplazma ve akson duyusal nöronların görünür. Nükleer türleri morfoloji nöronlar ve Gliyal hücreler DAPI ile lekeli zaman farklıdır. Nöronlar Gliyal hücreler daha büyük ve daha yuvarlak çekirdeği var. Buna karşılık, glia çekirdekleri daha oval şekli (Şekil 4B) vardır.
Seçici NPFFR2 agonist, dNPA, CGRP ve SP. serbest bırakılması uyarmak için kullanılan Ayrıca, dNPA uyarılmış nörotransmitter yayın bağımlılığını NPFFR2 NPFFR2 siRNA ile transfecting hücreleri tarafından test edildi. NPFFR2 siRNA veya denetim siRNA birincil DRG hücreye agonist tedavisi önce 72 h transfected. DRG hücreleri için 1 h dNPA (5 nmol) ile tedavi edildi ve sürümü CGRP ve SP ayrı ÇED kitleri tarafından ölçüldü. DRG simülasyon dNPA ile CGRP ve SP düzeyi (Şekil 5A, B) medyada arttı. Ancak, yalnızca dNPA kaynaklı CGRP yayın NPFFR2 siRNA kültürlü DRG hücrelerdeki ifade tarafından inhibe. Şekil 5 ' te gösterilen sonuçları önceki bir yayından modifiye edildi ve burada izin22ile kullanılır.
Şekil 1: doku işleme diyagramları. Lomber DRG 3 haftalık sıçanlarından emir toplanır. (A)nerede Giyotin kullanılması gereken hayvan kesmek için pozisyonlar noktalı çizgilerle gösterilir. (B) ile cilt dorsal gövde kaldırılmış ve (C) (L1-L6) üzerinden bel DRG konumlar gösterilir. INSERT DRG ve (Bu oklarla belirtilmiştir) bağlayan lifler temsil eder. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 2: özel ekipman DRG birincil kültürler yalıtmak için gerekli.(A)cerrahi aletler DRG koleksiyonunda kullanılan. Soldan sağa: (bir) diseksiyon makası (büyük), (b) kemik kesme forseps, (c) diseksiyon makası (küçük), (d, e) noktası cımbız ve (f) mikro-makas. (B) A normal Pasteur pipet ve bir alev cilalı Pasteur pipet. "bir" iç gösterir düzenli Pasteur pipet ve "b" gösterir iç çapı alev cilalı Pasteur pipet. b / a ≒ 0,9. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3: yaşam morfolojisi DRG hücreleri. Canlı DRG hücreleri mikroskobu tarafından takip. Hücreleri(a)gösterilen bir gün tohum tohum sonra iki gün (B) ve (C) tohum sonra üç gün sonra. Oklar, nöron gösterir ve ok uçları glia gösterir. Ölçek çubuğu 20 µm. = Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 4: kültürlü DRG hücrelerinin Immunostaining. DRG hücrelerin nöronlar ve 4', 6-diamidinophenylindole (DAPI) nöronlar ve Gliyal hücreler çekirdekleri için göstermek için anti-CGRP antikor ile immunostained vardı. (A) CGRP protein ifade duyusal nöron hücre organları ve akson lifleri. (B) çekirdekleri neurons ve glia DAPI ile lekeli. (C) birleştirilmiş resim--dan A ve B. ok gösterir bir nöron ve ok ucu gliyal hücreye gösterir. Ölçek çubuğu 30 µm. = Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 5: kültürlü DRG hücreleri nörotransmitter sürümünden. Seçici NPFFR2 agonist, dNPA, CGRP ve SP sürümü DRG kültürlerden uyarmak için kullanıldı. Nörotransmitter yayın bağımlılığını NPFFR2 NPFFR2 siRNA ile transfecting hücreleri tarafından doğrulandı. (A ve B) sonra DRG hücreleri transfected NPFFR2 siRNA veya hedefleme-denetim siRNA (72 saat), dNPA (5 nmol) nin uygulanma CGRP sürümü ikna etmek 1 h ve SP. veri ortalama ± standart hata ortalamaya (SEM) ifade edilir ve t tarafından analiz edildi Wo-yönlü varyans analizi (ANOVA) Bonferroni özel mesaj ile sınar. p < 0,01, ***p < 0,; karşılık gelen araç kontrollere göre (N = 12 Grup başına). Paneller A ve B Lin ve ark. değiştirildi 22Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Mevcut makalede, biz toplanması, enzim-ayrılma ve sıçan lomber kültürünü göstermek DRG. NGF Nörotrofik destek ile akson DRG nöron hücre tohum sonra 3 gün içinde genişletilmiş. Hücre için hücre soma sentezlenmiş ve akson lifleri taşınan CGRP protein lekeli sonra genişletilmiş aksonlar açıkça gözlemlenebilir. Uydu da genişletilmiş, hücrelerin nöronlar gün içinde çevrelemek bölen bu Gliyal hücreler izin süreçleri. Bu iletişim kuralı tarafından yetiştirilen birincil DRG hücreleri duyusal sinir hücreleri düzenleyen hücresel mekanizmaları soruşturmalar için uygundur. Burada, biz nöropeptitler, CGRP ve SP, kültürlü DRG nöronlar tarafından seçici bir NPFFR2 agonist dNPA üzerinden yayın teşvik. NPFFR2 soydaş reseptör NPFF için ve ağrı hissi ve düzenleme yolları22,23' te katılmak için rapor. CGRP ve SP yayın NPFFR2 bağımlılığı daha da NPFFR2 siRNA kullanılarak doğrulandı.
DRG kültürler duyusal sinir hücreleri ve uydu Gliyal hücreler içerir. Uydu Gliyal hücreler nöronlar için metabolik destek sağlamak ve nöronal işlevleri9,10sürdürmek. İmmunostaining resimler, onların çekirdekleri farklı şekillenir beri nöronlar ve gliyal hücrelerini tanımlamak kolaydır ( Şekil 4B' göster). Kültür çanak uydu hücrelerinde varlığı nöronlar belirli işlevi ve glia birbirinden ayırmak için deneysel bir talep ise sorunlu hale gelebilir. Örneğin, uydu hücreleri geliştirme ve bakım ağrı11,24, söz konusu ve bazı çalışmalarda, sinir hücreleri ve Gliyal hücreler eylemleri DRG kültürler kullanarak ayırt etmek zor olacaktır inkar edilemez.
Bu protokol için ekstra dikkat gerektiren bir kaç kritik adımlar vardır. DRG toplanır bu yana laminer başlık dışında ilk olarak, ilave doku toplama işlemi sırasında hücre kirlenmesini önlemek için özen gösterilmelidir. Bir insan cerrahi odada gibi steril bir alan yaratmak gerek yok olması gerekiyordu ama enstrüman sterilizasyon ve temiz bir çalışma alanı gereklidir. Steril aletler sterilizasyon kese kullanılmadığı zaman tutmak ve herhangi bir gereksiz öğeleri dokunmaktan kaçınarak kirlenmesini önlemek için ipuçları içerir. Ayrıca, organizmalar kirletici sıçan vücut gövdede veya eldiven yapışabilir kürk üzerinde taşımış. Bu nedenle, kürk ve eldiven üzerinde kan izi % 75 etanol ile temizleyerek kaldırılmalıdır. Transfer organizmaların nefes veya tükürük önlemek için cerrahi maske takmak için operatör için de yararlıdır. Ayrıca, 35 mm çanak her zaman kapalı tutulması ve yerleştirme disseke DRG içinde yalnızca açılır gerekir. 35 mm çanak enzim sindirim önce yeni bir tabak değiştirmek önemlidir. Aşırı sindirim nöronlar hasar verebilir beri enzim sindirim sırasında kuluçka süresi uzatmak değil. Tripsin-EDTA 37 ° C için uygun sindirim verimliliği elde etmek için önceden ısıtmak emin olun. Verimliliği önemli ölçüde daha düşük sıcaklıklarda azalır ve DRG alev cilalı Pasteur pipet tarafından triturating zaman bir tek hücre süspansiyon elde etmek zor olacak. Pipet parlatma alev ağzının pürüzsüz ve keskin cam kenarına nöronlar yaralanmasına önlemek. Ancak, bir alev ile pipet aşırı ısınma iç yapar çapı çok küçük ve doku ya da hücre içeren çözüm geçmek zor olacak. Azaltılan bu çapı da büyük ölçüde DRG nöronlar collectable sayısını azaltarak toz aşamasında forma çok kabarcıklar neden olabilir. Son olarak, DRG kültürler işleneceğini hafifçe her zaman, özellikle orta veya performans gösteren ilaç tedavisi değiştirirken.
DRG nöronlar en sık kullanılan birincil kültürlü nöronal hücre12olduğu bildirilmiştir. Farklı çalışmalar, Elektrofizyoloji veya hücre biyoloji duyusal sinir hücreleri fizyolojik veya patolojik işlevlerini keşfetmek için arasında değişen çeşitli için yararlı olabilir. Büyük DRG birincil kültürler onlar yüksek üretilen iş tarama için uygun değildir kısıtlamasıdır. Tek bir fare DRG toplanan hücre sayısı sınırlı ve nöronlar kültüründe çoğaltmak mümkün değildir. Sınırlı hücre sayısı nedeniyle birden fazla DRG-Hibridoma hücre satır veya ölümsüzleştirdi DRG nöronal hücre hatları birincil kültürler18,19,20değiştirmek için geliştirilmiştir. Ancak, protein ifade profilleri DRG hücre satır özgün DRG aynı olmayabilir ve bu nedenle her modeli sistem dikkatle doğrulanması gerekiyor. Laboratuar hücrelerde izole bir yana, fare embriyonik veya neonatal DRG nöronlar ticari olarak mevcut yapılmıştır. Bu nedenle, satınalma ticari kaynaklardan taze hazırlanmış DRG kültürler için bir alternatif olabilir.
DRG birincil kültürler uzun yıllar ağrı ile ilgili çalışmalarda çoğunlukla kabul edilen değerli deneysel bir araç olarak kullanılmaktadır. Bu modeli sistemi yakın gelecekte değiştirilmesi mümkün değildir. Kaliteli DRG nöronlar ile bilim adamları birçok alanda nörolojik eğitim yararına istikrarlı ve tekrarlanabilir sonuçlar elde edebilirsiniz.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Yazarlar ifşa gerek yok.
Dr. M. Calkins İngilizce düzenleme için teşekkür ediyoruz. Bu eser Chang Gung Memorial Hastanesi (CMRPD1F), Chang Gung Üniversitesi, sağlıklı yaşlanma Araştırma Merkezi (EMRPD1G) ve Bakanlığı Bilim ve teknoloji (BMY2) tarafından desteklenmiştir.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Mixture of tiletamine and zolazepam (Zoletil) | Virbac | Zoletil 50 | anaesthetic |
Fetal bovine serum | Biological Industries | Culture Medium | |
sodium pyruvate | Sigma | S | Culture Medium |
penicillin/streptomycin | Biological Industries | Culture Medium | |
DMEM-F12 | Invitrogen | Culture Medium | |
Poly-l-lysine | Sigma | P | Coating dish |
Collagenase IA | Sigma | Enzyme digestion | |
Hank's balanced salt solution | Invitrogen | Culture Medium | |
Trypsin EDTA | Biological Industries | Enzyme digestion | |
Pasteur pipette | Hilgenberg | Cell trituration | |
Cytarabine (Ara-C) | Sigma | C | Culture Medium |
NGF | Millipore | NC | Culture Medium |
NPFFR2 siRNA | Dharmacon | L | Transfection |
Non-targeting siRNA | Dharmacon | L | Transfection |
NeuroPORTER Reagent | Genlantis | T | Transfection reagent |
dNPA | Genemed Synthesis | N/A | NPFFR2 agonist |
CGRP ELISA | Cayman | EIA | |
SP ELISA | Cayman | EIA | |
CGRP antibody | Calbiochem | PCL | IHC |
DAPI | Roche | IHC |
DOWNLOAD MATERIALS LIST
DRG (Diagnosis Related Groups) yani teşhisle ilişkili gruplar, sağlıkta geri ödeme sisteminde kullanılan DRG/TİG hastaların klinik ve maliyet verilerinin kullanılarak gruplandırılmasını ve benzer hastalıkların benzer gruplara atanmasını içeren gruplandırma yöntemidir.
DRG/TİG sistemi dünyada yatan hastalara yönelik bir geri ödeme modeli olarak uygulanmakta olup, sağlık hizmet sunucularına yönelik bir ödeme veya bütçeleme aracı olarak uluslararası alanda kullanılmaktadır.
DRG (Diagnosis Related Groups), ’li yıllarda, Amerika Birleşik Devletlerinde Yale Üniversitesi’nde sağlık hizmetlerinin kalite denetimi amacıyla geliştirilmiş bir araç olup yılından itibaren geri ödemelerde de kullanılmaya başlanan bir vaka sınıflama sistemidir.
Yatan hastalar, belirli verilere göre, belirli bir algoritma kullanılarak sınıflanmaktadır. Teşhis ilişkili grupların oluşturulmasındaki temel amaç, benzer çıktılar veya hizmetler alması beklenen vaka tiplerinin bir tanımının yapılması ve böylece kıyaslanabilir bilgi üretilmesidir.
Yaklaşım basitçe ifade edilmeye çalışılırsa; eğer hastaları benzer sağlık gereksinimlerine sahip hasta gruplarına kategorize edebilirsek, herhangi bir hastaya sağlanan bakımı, gruptaki diğer bütün hastalara sağlanan bakımla (yani ortalamayla) karşılaştırabiliriz.
Her hasta benzersizdir; her hastanın bir dizi farklı klinik tanısı, risk faktörü, aile durumu ve çevresi vardır. Hasta düzeyindeki çeşitlilik, neredeyse sonsuzdur. Bu çeşitliliği anlamlandırmak için, bunları benzer koşullar isteyen gruplara ayırmamız gereklidir.
Asıl başlangıç noktası, bunların hastalıklarıdır. Hastayı ana hastalığa (birincil tanıya) göre gruplandırmak ve daha sonra ikincil durumun varlığına ya da yokluğuna göre alt gruplara ayırmak TİG’lerde kullanılan gruplara ayırma yaklaşımlarından ilki ve en önemlisidir.
Tanı temelinde bu şekilde ayırım yapılıyor olsa da, tanı detay düzeyinde olmasa da, yapılan işlemlerin ve hatta hastaların demografik verilerinin de grupların belirlenmesinde katkıları göz önünde bulundurulmaktadır.
Belirlenen bu grupların içerisine düşen hastaların ortalama maliyetlerinden çıkarak her grup için birer bağıl değer atanması işlemleri de bu sistemin geri ödeme metodolojisi olarak kullanılmasının basit açıklamasıdır. Her hastane yatan hastaları için ürettikleri TİG’leri ve bunlara karşılık gelen bağıl değer miktarları oranında bütçeden pay alacaklardır.
Yatan hastalara yönelik bir ödeme yöntemi olan TİG konusunda yılında başlayan bir proje ile Ülkemizde ilk çalışmaları başlamıştır. Bu proje Kasım ayı itibarı ile sonuçlanmıştır.
TİG çalışması, Hacettepe Üniversitesi Araştırma Projesi (HUAP) olarak da adlandırılan bu projenin alt çalışma başlıklarından sadece biridir. Bu süreçte oluşan birikimler, Sağlık Bakanlığımız bünyesinde Teşhis İlişkili Gruplar Şubesi’nin oluşturulması ile değerlendirilmeye başlanmıştır.
yılı başlarından itibaren olgunlaştırılmaya çalışılan çalışmalarda TİG’e temel olacak yapı için Avustralya örneği ele alınmıştır. Çalışmanın başlarından itibaren ICDAM (International Classification of Diseases, Australian Modification) 4. Güncellemesi ve TİG algoritması olarak da AR DRG (Australian Refined Diagnosis Related Groups: Grupları tayin eden algoritma) versiyonu kullanılmaya başlanmıştır.
Çalışmalarda klinik kodlama konusunda ciddi tecrübe edilmiş olsa da AR DRG yani TİG’lerin oluşmasında arada çalışan algoritma konusunda pek fazla birikimi oluşturulmamıştır. Projenin bitmesi ile lisans konusunda da Ulusal bir lisans alınması gereği ortaya çıkmıştır.
Bu konu ile ilgili olarak da bahsi geçen şube girişimleri başlatmış, karşı taraf ile temaslar kurulmuştur. Lisansların alınması ile ICD10 AM 6. güncellemesi ve AR DRG 6. Versiyonu kullanmaya geçilmesi planlanmaktadır. Yapılacak ödemelerde yatan hastalar için TİG sistemi, ayaktan hastalar için de BBaG (Branş Bazlı ayaktan Gruplar) sistemi temelinde ödemeler yapılandırılacak ve gerçekleştirilecektir.
BBaG konusunda da final şekillendirme çalışmalarının gerçekleştirilmesini takiben donanım ve yazılım olarak aynı alt yapının kullanımı ile tüm klinik verilerin Bakanlık sunucularında toplanması ve ödemeye temel oluşturacak verilere dönüştürülmeleri sağlanacaktır.
Birçok yönetimsel raporun da bir takım internet arayüzleri ile hem Bakanlığımız hem de sahada her bir hastanemiz için yapılandırılması ve değişik erişim yetkilendirmeleri ile sunulması planlanmaktadır. Çalışmalarımız 1 Ocak tarihi itibarı ile tüm hastane ödeme sistemini bu alana kaydırma işlemlerinin tamamlanması şeklinde planlanmakta ve yapılandırılmaktadır.
Çalışmaların bir yıl içerisinde de içerisine eklenecek en önemli unsur, kendimize ait TİG yapısının oluşturulması ve bu yapı için de her bir TİG için kendi maliyetlerimizi temsil eden bağıl değerlerin oluşturulması çalışmasıdır.
Bu çalışmanın başlaması için de en azından hastanelerimizde bir yıla yakın bir kodlama tecrübesi birikimi maliyetlendirme çalışmalarının daha sağlıklı şekillendirmesini sağlayacaktır. Bu sürecin sonlanmasına değin Avustralya bağıl değerlerinin kullanılması öngörülmektedir.
Maliyetlendirme çalışmaları için ayrı ve donanımlı bir birim kurulması ve hastane örneklem grupları ile hastane tiplerine göre bağıl değer dağılımı hesaplamalarının yapılması gereklidir.
çamaşır makinesi ses çıkarması topuz modelleri kapalı huawei hoparlör cızırtı hususi otomobil fiat doblo kurbağalıdere parkı ecele sitem melih gokcek jelibon 9 sınıf 2 dönem 2 yazılı almanca 150 rakı fiyatı 2020 parkour 2d en iyi uçlu kalem markası hangisi doğduğun gün ayın görüntüsü hey ram vasundhara das istanbul anadolu 20 icra dairesi iletişim silifke anamur otobüs grinin 50 tonu türkçe altyazılı bir peri masalı 6. bölüm izle sarayönü imsakiye hamile birinin ruyada bebek emzirdigini gormek eşkiya dünyaya hükümdar olmaz 29 bölüm atv emirgan sahili bordo bereli vs sat akbulut inşaat pendik satılık daire atlas park avm mağazalar bursa erenler hava durumu galleria avm kuaför bandırma edirne arası kaç km prof dr ali akyüz kimdir venom zehirli öfke türkçe dublaj izle 2018 indir a101 cafex kahve beyazlatıcı rize 3 asliye hukuk mahkemesi münazara hakkında bilgi 120 milyon doz diyanet mahrem açıklaması honda cr v modifiye aksesuarları ören örtur evleri iyi akşamlar elle abiye ayakkabı ekmek paparası nasıl yapılır tekirdağ çerkezköy 3 zırhlı tugay dört elle sarılmak anlamı sarayhan çiftehan otel bolu ocakbaşı iletişim kumaş ne ile yapışır başak kar maydonoz destesiyem mp3 indir eklips 3 in 1 fırça seti prof cüneyt özek istanbul kütahya yol güzergahı aski memnu soundtrack selçuk psikoloji taban puanları senfonilerle ilahiler adana mut otobüs gülben ergen hürrem rüyada sakız görmek diyanet pupui petek dinçöz mat ruj tenvin harfleri istanbul kocaeli haritası kolay starbucks kurabiyesi 10 sınıf polinom test pdf arçelik tezgah üstü su arıtma cihazı fiyatları şafi mezhebi cuma namazı nasıl kılınır ruhsal bozukluk için dua pvc iç kapı fiyatları işcep kartsız para çekme vga scart çevirici duyarsızlık sözleri samsung whatsapp konuşarak yazma palio şanzıman arızası