Protein Elektroforezi Yorumlama

protein elektroforezi yorumlama

Protein Elektroforezi (Kan)

Protein Elektroforezi Testi Nedir? (Serum Protein Elektroforezi, SPEP)

Protein elektroforezi, kandaki belirli proteinleri ölçen bir testtir. Test, elektrik yüklerine göre kandaki proteinleri ayırır. Protein Elektroforezİ testi genellikle M proteinleri adı verilen anormal maddeleri bulmak için kullanılır. M proteinlerinin varlığı, miyelom(omurilik tümörü) veya çoklu miyelom adı verilen bir kanser türünün işareti olabilir. Miyeloma kemik iliğindeki plazma hücreleri adı verilen beyaz kan hücrelerini etkiler. Protein elektroforezi, diğer proteinleri ve bağışıklık sistemini koruyucu proteinleri de test eder.

Protein Elektroforezi testi, plazma hücrelerini etkileyen diğer koşulları teşhis etmek için de kullanılır. Bunlar arasında Waldenström makroglobulinemisi, belirsiz öneme sahip monoklonal gamopati (MGUS) ve primer amiloidoz yer alır.

Protein elektroforezi teşhise yardımcı olmak için de kullanılabilir:

Tiroid problemleri
Diyabet
Anemi
Karaciğer hastalıkları
Yetersiz beslenme veya besin maddelerini sindirememe
Bazı otoimmün hastalıklar

Protein Elektroforezi Testi Neden Yapılır?

Sağlık uzmanınız plazma hücrelerinizi etkileyen bir durum olduğundan şüpheleniyorsa, bu teste ihtiyacınız olabilir. Bu koşullar aşağıdaki belirtilere neden olabilir:

Açıklanamayan kilo kaybı
Kemik ağrısı
Yorgunluk
Zayıflık
Mide bulantısı
Kabızlık
Aşırı derecede susamak
Sık idrara çıkma
Sık sık hastalanmak veya ateşlenmek
Kolayca kırılan kemikler
Sırt ağrısı
Kandaki yüksek kalsiyum seviyeleri

Bu testle birlikte başka hangi testleri yaptırabilirim?

Sağlık uzmanınız sizden şunları isteyebilir:

İdrar proteini elektroforezi
Serum immünofiksasyon
Kemik iliği biyopsisi
İmmünotipleme, M proteinlerin ne tür olduğunu bulmak için
Tam kan sayımı
Kalsiyum ve elektrolit testi
Böbrek ve karaciğer kan testleri
X-ışınları

Protein Elektroforezi Testi sonuçlarım ne anlama geliyor?

Test sonuçları yaşınıza, cinsiyetinize, sağlık geçmişinize, test için kullanılan yönteme ve diğer şeylere bağlı olarak değişebilir. Test sonuçlarınız bir sorununuz olduğu anlamına gelmez. Sağlık uzmanınıza test sonuçlarınızın ne anlama geldiğini sorun.

Serum proteinleri albümin veya globulinler olabilir. Globulinler alfa-1, alfa-2, beta ve gama globulinlerine ayrılır.

Normal seviyeler şunlardır:

Albümin	%60 ila %75 veya onda bir litre başına ila gram (g/dL) (litre başına gram-g /L)
Alfa - 1 (α-1)	% ila %5 veya ila g/dL (1 ila 4 g / L)
Alfa - 2 (α-2)	% ila % veya ila 1 g / dL (4 ila 10 g / L)
Beta (β)	% ila % veya ila g/dL (5 ila 12 g / L)
Gama (γ)	% ila %20 veya ila g / dL (6 ila 16 g / L)

Bu test nasıl yapılır?

Test bir kan örneği ile yapılır. Kolunuzda veya elinizde bulunan bir damardan kan almak için bir iğne kullanılır.

Bu test herhangi bir risk oluşturuyor mu?

İğne ile kan testi yaptırmak bazı riskleri taşır. Bunlar kanama, enfeksiyon, morarma ve baş dönmesi gibi risklerdir. İğne kolunuza veya elinize batırıldığında hafif bir sızlama veya ağrı hissedebilirsiniz. Daha sonra da ağrınız olabilir.

Test sonuçlarımı ne etkileyebilir?

Yeme alışkanlıklarınızın veya yaşam tarzınızın bu testin sonuçlarını etkilemesi mümkün değildir.

Bu test için nasıl hazır olabilirim?

Muhtemelen bu testi yaptırmadan önce özel önlemler almanız gerekmez. Sağlık uzmanınız testten önce bir süre yemeyi veya içmeyi bırakmanız gerekiyorsa size söyleyecektir. Test gününde düzenli ilaçlarınızdan herhangi birini atlamanız gerekiyorsa sağlık uzmanınız size söyleyecektir. Sağlık uzmanınıza, aldığınız tüm ilaçlar, otlar, vitaminler ve takviyeler hakkında bilgi verdiğinizden emin olun. Buna reçeteye ihtiyaç duymadan alınan ilaçlar ve kullanabileceğiniz yasadışı uyuşturucular da dahildir.

Bu konuya dair bir sorunuz varsa siz de uzmanlarımıza 7/24 Soru sorabilirsiniz.Soru sormak için tıklayın.

Yorumlar

Yorum yapabilmek için giriş yapmış olmanız gerekmektedir.

Popüler Blog Yazıları

Brucella Aglütinasyon Testi Nasıl Yorumlanır?İdrarda Delta (5) – Aminolevulinic Asit (ALA) Testi Nedir?Soruların cevaplanma süreci ile ilgili önemli duyuru:CEA Nedir? Hangi Durumlarda Yükselir?Protrombin Zamanı Testi Nedir?Metobolik Sendrom Şüphesinde Yapılan Tahliller Nelerdir?Direkt Bilirübin Yüksekliği Nedir? Direkt Bilirübin Yüksekliği Nedenleri:Dehidroepiandrosteron Sülfat (DHEA-S, DHEA-SO4) Testi Tek başına Fikir VermezNIFTY Test Nedir? 7 Soru ve Cevapla NIFTY Prenatal TestiRDW Nedir? RDW Testi Yüksekliği Ne Anlama Gelmektedir?Pinner Testi Nedir? Pinner Test Özellikleri ve Pinner Test ÇeşitleriYork Testi TL İndirimli Nasıl Yaptırabilirim?

Plazma protein elektroforezi: tanı ve yorumlama

Serum protein elektroforezi, monoklonal immünoglobulin, hipergamaglobulinemi ve daha nadir olarak hipogamaglobulinemi gibi birçok hastalığın teşhisine ve izlenmesine olanak sağlayan kan testinden yapılan bir incelemedir.

Serum protein elektroforezi nedir?

Serum protein elektroforezi (EPS) bir tıbbi biyoloji muayenesidir. Amacı, kanın sıvı kısmında (serum) bulunan proteinlerin ayrıştırılmasıdır. "Bu proteinler özellikle çok sayıda molekülün (hormonlar, lipidler, ilaçlar vb.) taşınmasında rol oynar ve ayrıca pıhtılaşma, bağışıklık ve kan basıncının korunmasında rol oynar. Tıbbi biyolog Dr Sophie Lyon, bu ayrım onları tanımlamayı ve ölçmeyi mümkün kılacaktır ”diyor.

Protein analizi

Bir kan testinden sonra, proteinler bir elektrik alanında migrasyon yoluyla analiz edilir. "Daha sonra elektrik yüklerine ve moleküler ağırlıklarına göre ayrılıyorlar, bu da onları tanımlamayı ve anormallikleri tespit etmeyi mümkün kılıyor." EPS, göç hızlarının azalan sırasına göre altı protein fraksiyonunun ayrılmasına izin verecektir: albümin (yaklaşık %60'lık bir mevcudiyette ana serum proteinidir), alfa 1-globulinler, alfa 2-globulinler, Beta 1 globulin, Beta 2 globulin ve gamaglobulinler. "Elektroforez, karaciğer veya böbreklerin zayıf işleyişine, bağışıklık savunmasının değişmesine, enflamatuar semptomlara veya belirli kanserlere bağlı belirli patolojilerin teşhis edilmesini mümkün kılar".

EPS reçete etmek için endikasyonlar

EPS reçete etme koşulları, Ocak 'de Haute Autorité de Santé (HAS) tarafından belirlendi. EPS'nin yapılmasının ana nedeni, bir monoklonal immünoglobulin (monoklonal gamopati veya disglobulinemi) arayışıdır. Bu, çoğu zaman gama globulinler alanında ve bazen de beta-globulinler ve hatta alfa2-globulinler alanında göç edecektir.

PSE ne zaman yapılmalı?

Şunların önündeyken bir EPS gerçekleştirmelisiniz:

Yüksek düzeyde dolaşan proteinler;
Sedimantasyon hızında (VS) açıklanamayan artış;
Tekrarlayan enfeksiyonlar, özellikle bakteriyel (hipogamaglobulinemiden sorumlu bir bağışıklık eksikliğinin araştırılması);
Miyelom veya kan hastalığının ortaya çıktığını düşündüren klinik veya biyolojik belirtiler (örneğin hiperkalsemi);
Enflamatuar sendrom şüphesi;
Muhtemelen siroz;
Herhangi bir osteoporoz araştırması.

EPS'nin referans değerleri

Proteine bağlı olarak referans değerler aşağıdakiler arasında olmalıdır:

Albümin: %55 ve %65 veya 36 ve 50 g/L.
Alfa1 – globulinler: 1 ve %4 yani 1 ve 5 g/L
.Alfa 2 – globulinler: %6 ve %10 veya 4 ve 8 g/l
.Beta – globulinler: %8 ve %14 veya 5 ve 12 g/L.
Gama – globulinler: %12 ve %20 veya 8 ve 16 g/L.

Elektroforezin yorumlanması

Elektroforez daha sonra serumdaki artmış veya azalmış protein gruplarını tanımlayacaktır. "Her kan proteini, miktarına bağlı olarak farklı genişlik ve yoğunlukta bantlar oluşturacaktır. Her bir karakteristik “profil” doktor tarafından yorumlanabilir”. Gerekirse ek tetkikler yazabilir.

EPS tarafından tanımlanan anormallikler

Bulunan anomaliler arasında:

Yetersiz beslenme, karaciğer yetmezliği, kronik enfeksiyon, miyelom ve hatta aşırı su yüklenmesinden (hemodilüsyon) kaynaklanabilen albümin düzeyinde (hipoalbüminemi) azalma.
Hiper-alfa2-globulinemi ve albüminde azalma, inflamatuar bir durumla eş anlamlıdır. Beta ve gama fraksiyonlarının birleşimi sirozu gösterir.
İmmün sistemin işlev bozukluğu durumunda gama globulinlerde azalma (hipogammaglobulinemi) gözlenir. Öte yandan, miyelom, monoklonal gamopatiler ve otoimmün hastalıklar (lupus, romatoid artrit) durumunda oran artar (hipergamaglobulinemi).
Beta globulinlerdeki artış, demir eksikliği, hipotiroidizm veya biliyer obstrüksiyon varlığı anlamına gelebilir.

HAS'a göre, hastayı daha fazla tavsiye için göndermeniz önerilir:

Hastanın klinik tablosu hematolojik maligniteyi (kemik ağrısı, genel durumunda bozulma, lenfadenopati, tümör sendromu) düşündürüyorsa;
organ hasarını düşündüren biyolojik bir anormallik (anemi, hiperkalsemi, böbrek yetmezliği) veya görüntüleme (kemik lezyonları) durumunda;
Bu tür semptomların yokluğunda, birinci basamak tetkiklerinden en az birinin anormal olduğu veya serum monoklonal immünoglobulini IgG olan hasta? 15 g / L, IgA veya IgM? 10 gr / L;
hasta 60 yaşın altındaysa.

Elektroforez anomalisinin tedavisi, ortaya çıkardığı patolojinin tedavisidir.

“Örneğin dehidratasyona bağlı total hiperprotidemi durumunda tedavi rehidrasyon olacaktır. İnflamatuar sendrom nedeniyle alfa globulinlerde bir artış varsa, tedavi inflamasyonun nedenine yönelik olacaktır. Her durumda, bu muayeneyi ve diğer ek muayeneleri (kan testi, radyolojik test vb.) kullanarak, konsültasyon sırasında tanıyı koyacak ve patolojiye uygun tedaviyi reçete edecek olan doktordur. bulundu ".

Protein elektroforez nedir?

Protein elektroforezi, yüklü protein moleküllerinin bir elektrik alanı ile bir çözücü aracılığıyla taşındığı standart bir laboratuvar tekniğidir. Hem proteinler hem de nükleik asitler, basit, hızlı ve hassas bir analitik araç olan elektroforez ile ayrılabilir.
Biyolojik moleküllerin çoğu, izoelektrik noktaları dışında herhangi bir pH değerinde net yük taşır ve yük yoğunluklarıyla orantılı bir oranda göç eder. Bir molekülün bir elektrik alanı boyunca hareketliliği, alan kuvveti, molekül üzerindeki net yük, molekülün boyutu ve şekli, iyonik kuvvet ve molekülün içinden geçtiği matrisin özellikleri (örn., viskozite, gözenek büyüklüğü) gibi faktörlere bağlıdır.

Poliakrilamid ve agaroz, elektroforezde yaygın olarak kullanılan iki destek matrisidir. Bu matrisler gözenekli ortam görevi görür ve moleküler elek gibi davranır. Agaroz büyük bir gözenek boyutuna sahiptir ve nükleik asitleri ve büyük protein komplekslerini ayırmak için uygundur. Poliakrilamid daha küçük bir gözenek boyutuna sahiptir ve proteinlerin çoğunu ve daha küçük nükleik asitleri ayırmak için idealdir.

Poliakrilamid jeller nelerdir?

Poliakrilamid, proteinleri boyutlarına göre ayırmak için elektroforetik jeller hazırlamak için tercih edilen malzemedir. Poliakrilamid jeller, polimerleştirici madde, amonyum persülfat (APS) eklendiğinde çapraz bağlı bir polimer ağı oluşturmak için akrilamid ile bisakrilamid karıştırılarak hazırlanır. TEMED (N,N,N’,N'-tetrametilendiamin), APS tarafından serbest radikallerin üretimini teşvik ederek polimerizasyon reaksiyonunu katalize eder. Bu aşamada poliakrilamid olur.

SDS-PAGE (denatüre edici) ile Native-PAGE

SDS-PAGE

SDS-PAGE'de jel, anyonik bir deterjan olan sodyum dodesil sülfat (SDS) içeren bir tampon içine dökülür. SDS, polipeptit omurgasını sararak proteinleri denatüre eder. Protein numunesinin fazla SDS ve tiyol reaktifi varlığında °C arasında ısıtılmasıyla disülfid bağları parçalanır ve protein tamamen alt birimlerine ayrılır. Bu koşullar altında çoğu polipeptit, SDS'yi sabit bir ağırlık oranında ( g SDS: 1 g polipeptit) bağlar. Polipeptidin içsel yükleri, bağlı deterjan tarafından sağlanan negatif yüklere kıyasla önemsizdir, böylece SDS-polipeptid kompleksleri esasen aynı negatif yüke ve şekle sahiptir. Sonuç olarak, proteinler, kompozisyon farklılıklarından çok az etki ile kesinlikle polipeptit boyutuna göre jelden geçer. Bu yöntemin basitliği ve hızı ve ayrıca yalnızca mikrogram miktarlarda protein gerekliliği gerçeği, SDS-PAGE'i bir polipeptit numunesindeki moleküler kütlenin belirlenmesi için en yaygın kullanılan yöntem haline getirmiştir. Hemen hemen her kaynaktan gelen proteinler, SDS tarafından kolaylıkla çözündürülür, bu nedenle yöntem genel olarak uygulanabilirdir.

Bilinen kütleye sahip bir dizi protein, aynı jel içinde numunelerin yanında çalıştırıldığında, numune proteinlerinin kütlesinin belirlenebileceği bir referans sağlarlar. Bu referans protein setleri, kütle işaretleri veya moleküler ağırlık işaretleri (MW işaretleri), protein merdivenleri veya boyut standartları olarak adlandırılır ve bunlar ticari olarak çeşitli şekillerde mevcuttur.

Native-PAGE

Native-PAGE'de proteinler, doğal yapılarının net yüküne, boyutuna ve şekline göre ayrılır. Elektroforetik göç, çoğu proteinin alkali çalışan tamponlarda net bir negatif yük taşıması nedeniyle oluşur. Negatif yük yoğunluğu ne kadar yüksek olursa (molekül kütlesi başına daha fazla yük), bir protein o kadar hızlı göç eder. Aynı zamanda jel matrisinin sürtünme kuvveti, proteinlerin hareketlerini boyutlarına ve üç boyutlu şekillerine göre düzenleyerek bir eleme etkisi yaratır. Küçük proteinler yalnızca küçük bir sürtünme kuvvetiyle karşı karşıya kalırken, daha büyük proteinler daha büyük bir sürtünme kuvvetiyle karşı karşıyadır. Böylece doğal-PAGE, proteinleri hem yüklerine hem de kütlelerine göre ayırır.

Native-PAGE'de hiçbir denaturant kullanılmadığından, bir multimerik protein içindeki alt birim etkileşimleri genellikle korunur ve kuaterner yapı hakkında bilgi elde edilebilir. Ek olarak, bazı proteinler, Native-PAGE ile ayırmanın ardından enzimatik aktivitelerini (işlevlerini) korurlar. Dolayısıyla bu teknik, saflaştırılmış, aktif proteinlerin hazırlanması için kullanılabilir.

Elektroforezi takiben, proteinler, pasif difüzyon veya elektro-elüsyon yoluyla doğal bir jelden geri kazanılabilir. Elektroforez sırasında proteinlerin bütünlüğünü korumak için aparatı serin tutmak ve denatürasyon ve proteolizi en aza indirmek önemlidir. Doğal-PAGE'de aşırı pH değerlerinden genellikle kaçınılmalıdır, çünkü bunlar ilgili proteinlerde denatürasyon veya agregasyon gibi geri dönüşü olmayan hasara yol açabilir. Bir jeldeki proteinlerin moleküler kütlelerini (boyutlarını) değerlendirmek için, moleküler kütleleri bilinen birkaç proteini içeren hazırlanmış bir karışım, jelin bir veya daha fazla şeridinde test numunesi ile birlikte çalıştırılır. Bu tür bilinen protein kümelerine, protein moleküler ağırlık (veya kütle) belirteçleri veya protein merdivenleri denir. Her işaretleyici protein tarafından taşınan mesafelerden standart bir eğri oluşturulabilir. Bilinmeyen protein tarafından taşınan mesafe daha sonra çizilir ve moleküler ağırlık standart eğriden tahmin edilir.

Farklı algılama modları için etiketlenmemiş veya önceden boyanmış birkaç çeşit kullanıma hazır protein moleküler ağırlık (MW) belirteci mevcuttur. Bunlar önceden indirgenmiştir ve bu nedenle, yerel PAGE yerine öncelikle SDS-PAGE için uygundur. MW belirteçleri, flüoresan etiket gibi özel etiketler ve diğer yöntemlerle de saptanabilir hale getirilebilir.

nest...

40935 40936 40937 40938 40939