100 Alkolsüz Kokteyl Pdf

sayılı Kişisel Verilerin Korunması Kanunu uyarınca hazırlanmış aydınlatma metnimizi okumak ve sitemizde ilgili mevzuata uygun olarak kullanılan çerezlerle ilgili bilgi almak için lütfen tıklayınız.

for BOND - 50 Test

Instructions for Use Instrukcja obsługi

Summary and Explanation

Reagents Provided
The reagents provided are sufficient for 25 individual BOND staining runs, or a maximum of 50 slides.
To achieve a maximum of 50 slides from this detection system, slides must be batched in quantities of 2 or greater, per Slide Staining
Assembly. Batching in quantities of less than 2 will result in fewer stained slides.
1. Peroxide Block (7.5 mL) 3-4% Hydrogen peroxide.
2. Polymer mHRP (7.5 mL) Poly-HRP anti-mouse containing 10% (v/v) animal serum in Tris-buffered saline and 0.1% ProClin™ 950.
3. Polymer rAP (7.5 mL) Poly-AP anti-rabbit containing 10% (v/v) animal serum in Tris-buffered saline and 0.09% ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (1 mL) 66 mM 3,3’-Diaminobenzidine tetrahydrochloride hydrate in a stabilizer solution.
5. DAB Part B (20 mL) ≤0.1% (v/v) Hydrogen peroxide in a stabilizer solution.
6. Red Part A (5.5 mL) Activator containing 0.5% ProClin™ 950.
7. Red Part B (1.0 mL) Substrate.
8. Red Part C (1.0 mL) Substrate.
9. Red Part D (35 mL) Buffer solution containing 0.5% ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9665 (7.5 mL) <0.1% Hematoxylin.

Dilution and Mixing

Materials Required But Not Provided

Storage and Stability

DS9665
Page 2
If unexpected staining is observed that cannot be explained by variations in laboratory procedures, and a problem with the detection
system is suspected, contact your local distributor or the regional office of Leica Biosystems immediately.
Storage conditions other than those specified above must be verified by the user1.

Precautions
• WARNING - some mounting media may cause the red chromogen to crystallize or fade.
• DO NOT USE DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® quick-hardening mounting medium, Surgipath MM 24®, Surgipath Sub-X® and
Pertex mounting media as they are not suitable for use with this product.
• Fading or crystallization has not been observed with: Leica CV Ultra Mounting Media (Cat 14070937891), Poly-Mount® (Polysciences
Inc. Cat 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories Cat H-5000) and Limonene Mount (Electron Microscopy Sciences Cat 17987-01).
• The compatibility of other mounting media should be fully validated by the user prior to use. Failure to do so may result in a reduction
of staining due to fading or crystallization.
• The activator and substrate solutions may cause irritation to the skin, eyes, mucous membranes and upper respiratory tract. Wear
disposable nitrile gloves when handling reagents. Dispose of according to local regulations.
• To obtain a copy of the Material Safety Data Sheet contact your local distributor or regional office of Leica Biosystems. Alternatively,
visit the Leica Biosystems’ Web site, www.LeicaBiosystems.com
• Specimens, before and after fixation, and all materials exposed to them, should be handled as if capable of transmitting infection and
disposed of with proper precautions3. Never pipette reagents by mouth and avoid contacting the skin and mucous membranes with
reagents or specimens. If reagents or specimens come in contact with sensitive areas, wash with copious amounts of water. Seek
medical advice.
• Consult Federal, State or local regulations for disposal of any potentially toxic components.
• Minimize microbial contamination of reagents or an increase in non-specific staining may occur.
• Incubation times or temperatures other than those specified may give erroneous results. Any such change must be validated by the
user1.
• Do not mix reagents from different detection systems.

Instructions for Use

Product Specific Limitations

Troubleshooting
Refer to reference 4 for remedial action.
Contact your local distributor or the regional office of Leica Biosystems to report unusual staining.

Further Information
Further information on immunostaining with BOND reagents, under the headings Principle of the Procedure, Materials Required,
Specimen Preparation, Quality Control, Assay Verification, Interpretation of Staining, Key to Symbols on Labels and General Limitations
can be found in “Using BOND Reagents” in your BOND user documentation.

Bibliography
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950 is a trademark of Supelco, a part of Sigma-Aldrich Corporation.

Date of Issue
01 April 2020

DS9665
Page 3
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Référence: DS9665
Utilisation prévue
Le présent système de détection est destiné à une utilisation diagnostique in vitro.
ChromoPlex 1 Dual Detection est un système sans biotine de conjugués d’anticorps et de polymères marqués à la peroxydase du raifort
(HRP) et à la phosphatase alcaline (AP) pour la détection d’anticorps IgG primaires de souris et de lapin liés à des tissus. Il est prévu
pour la coloration sur le système automatisé BOND (qui comprend les systèmes Leica BOND-MAX et Leica BOND-III). de coupes de
tissus fixés au formol et inclus dans de la paraffine.
L’interprétation clinique de toute coloration, ou de son absence, doit être complétée par des études morphologiques. Des contrôles
adéquats doivent être évalués par un pathologiste qualifié dans le contexte de l’anamnèse clinique du patient et d’autres tests
diagnostiques.
Le ChromoPlex 1 Dual Detection doit être utilisé selon les meilleures pratiques de laboratoire dans les contrôles de tissus. À des fins
d’assurance, les laboratoires doivent colorer chaque échantillon de patient conjointement à des contrôles positifs, négatifs et à d’autres
contrôles spécifiques de tissus le cas échéant.

Résumé et explication
Les techniques immunohistochimiques peuvent être utilisées pour démontrer la présence d’antigènes dans des tissus et des cellules (cf.
Utilisation des réactifs du BOND » dans la documentation de l’utilisateur du BOND).
Le ChromoPlex 1 Dual Detection utilise une nouvelle technologie de polymérisation contrôlée pour préparer des conjugués d’anticorps
et de polymères marqués à la HRP et à la AP. Le système de détection évite l’utilisation de streptavidine et de biotine, et par conséquent
élimine une coloration non spécifique provenant de biotine endogène.
Le ChromoPlex 1 Dual Detection fonctionne comme suit :
• L’échantillon est incubé avec du peroxyde d’hydrogène pour bloquer l’activité de la peroxydase endogène.
• Un cocktail d’anticorps primaires spécifiques de souris et de lapin fournis par l’utilisateur est appliqué.
• Le réactif IgG poly-HRP localise les anticorps de souris.
• Le réactif IgG poly-AP localise des anticorps de lapin.
• Le premier substrat chromogène, tétrahydrochlorure hydrate de 3,3’-diaminobenzidine (DAB), permet de visualiser les anticorps de
souris sous forme d’un précipité marron.
• Le deuxième substrat chromogène, le rouge nucléaire rapide (Fast Red), permet de visualiser les anticorps de lapin sous forme d’un
précipité rouge.
• Une contre-coloration à l’hématoxyline (bleu) permet la visualisation des noyaux cellulaires.
L’utilisation du ChromoPlex 1 Dual Detection combiné au système automatisé BOND (qui comprend les systèmes Leica BOND-MAX et
Leica BOND-III), réduit la possibilité d’erreur humaine et de variabilité inhérente à la dilution des réactifs individuels, au pipetage manuel
et à l’application du réactif.

Réactifs fournis
Les réactifs fournis sont suffisants pour 25 colorations individuelles BOND, soit un maximum de 50 lames.
Pour réaliser un maximum de 50 lames avec ce système de détection, celles-ci doivent être groupées par 2 ou plus, par ensemble de
coloration de lames. Si la mise en lot se fait avec des quantités inférieures à 2, moins de lames seront colorées.
1. Peroxide Block (7.5 mL) 3 à 4 % de peroxyde d’hydrogène.
2. Polymer mHRP (7.5 mL) Poly-HRP anti-souris contenant (v/v) 10 % de sérum animal dans du sérum physiologique TBS et 0,1 %
ProClin™ 950.
3. Polymer rAP (7.5 mL) Poly-AP anti-lapin contenant (v/v) 10 % de sérum animal dans du sérum physiologique TBS et 0,09 %
ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (1 mL) 66 mM tétrahydrochlorure hydrate de 3,3’-diaminobenzidine dans une solution de stabilisateur.
5. DAB Part B (20 mL) ≤ 0,1 % (v/v) peroxyde d’hydrogène dans une solution de stabilisateur.
6. Red Part A (5.5 mL) Activateur contenant 0,5 % ProClin™ 950.
7. Red Part B (1.0 mL) Substrat.
8. Red Part C (1.0 mL) Substrat.
9. Red Part D (35 mL) Solution tampon contenant 0,5 % ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9665 (7.5 mL) < 0,1 % Hématoxyline.

Dilution et mélange
Le ChromoPlex 1 Dual Detection est optimisé pour l’utilisation avec le système BOND. (qui comprend les systèmes Leica BOND-MAX et
Leica BOND-III).
La reconstitution, le mélange, la dilution ou le titrage de ces réactifs n’est pas nécessaire.

Matériel nécessaire non fourni

DS9665
Page 4
Conservation et stabilité
Entreposer à 2–8 °C. Ne pas congeler. Ne pas utiliser après la date de péremption indiquée sur l’étiquette du manche du plateau.
Retourner immédiatement à 2–8 °C après utilisation.
Il n’y a pas de signe évident indicatif de l’instabilité de ce produit ; par conséquent des contrôles positifs et négatifs doivent être effectués
simultanément avec les échantillons inconnus (cf. « Contrôle de la qualité » dans la section « Utilisation des réactifs du BOND » de la
documentation de l’utilisateur du BOND).
Si on observe une coloration inattendue qui ne peut être expliquée par des variations de procédures de laboratoire, et si un problème
avec le système de détection est suspecté, contactez immédiatement votre distributeur local ou le bureau régional de Leica Biosystems.
Les conditions de stockage autres que celles spécifiées ci-dessus doivent être validées par l’utilisateur1.

Précautions
• MISE EN GARDE - certains supports de montage peuvent causer une cristallisation ou décoloration du chromogène rouge.
• NE PAS UTILISER les supports de montage DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® quick-hardening mounting medium, Surgipath
MM 24®, Surgipath Sub-X® et Pertex car leur utilisation n’est pas adéquate avec ce produit.
• Une décoloration ou cristallisation n’a pas été observée avec : Leica CV Ultra Mounting Media (Réf. 14070937891), Poly-Mount®
(Polysciences Inc. Réf. 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories Réf. H-5000) et Limonene Mount (Electron Microscopy Sciences
Réf. 17987-01).
• La compatibilité d’autres supports de montage doit être complètement validée par l’utilisateur avant utilisation. À défaut de le faire,
une réduction de la coloration due à une décoloration ou à une cristallisation peut avoir lieu.
• Les solutions d’activateur et de substrat peuvent causer l’irritation de la peau, des yeux, des muqueuses et des voies respiratoires
supérieures. Mettre des gants jetables en nitrile lors de la manipulation des réactifs. Éliminer conformément aux règlements locaux.
• Pour obtenir une copie de la fiche technique sur la sécurité du matériel, contacter votre distributeur local ou le bureau régional de
Leica Biosystems. Sinon, visiter le site Web de Leica Biosystems, www.LeicaBiosystems.com
• Les échantillons, avant et après fixation, et tous les matériels qui leur sont exposés, doivent être manipulés comme s’ils étaient
capables de transmettre une infection et éliminés en prenant les précautions adéquates3. Ne jamais pipeter de réactif à la bouche et
éviter tout contact des réactifs ou des échantillons avec la peau et les muqueuses. Si les réactifs ou échantillons entrent en contact
avec des régions sensibles, laver abondamment à l’eau. Demander un avis médical.
• Consulter les règlements fédéraux, d’État ou locaux pour éliminer les composants potentiellement toxiques.
• Minimiser la contamination microbienne des réactifs sinon une augmentation de coloration non-spécifique peut se produire.
• Les durées ou températures d’incubation autres que celles spécifiées peuvent donner lieu à des résultats erronés. Tout changement
de la sorte doit être validé par l’utilisateur1.
• Ne pas mélanger les réactifs de différents systèmes de détection.

Mode d’emploi
Le ChromoPlex 1 Dual Detection a été développé pour l’utilisation avec le système automatisé BOND (qui comprend les systèmes Leica
BOND-MAX et Leica BOND-III), qui exploite le *IHC Protocol K - 50 Test. Les paramètres d’utilisation pour l’application des réactifs du
système de détection sur le Module de Traitement BOND ont été optimisés par Leica Biosystems. Ceux-ci peuvent être affichés en
suivant les instructions contenues dans la documentation de l’utilisateur du BOND.
Utiliser une déshydratation rapide à l’alcool/xylène.
Après avoir terminé ou avorté *IHC Protocol K - 50 Test, il y a un délai d’environ 15 minutes avant que le système BOND ne
recommence un nouveau cycle sur le même ensemble de coloration de lames.

Limites spécifiques du produit

Résolution des problèmes

Informations complémentaires
Pour plus de renseignements sur l’immunocoloration avec les réactifs du BOND, sous les entêtes Principe de la procédure, Matériels
requis, Préparation des échantillons, Contrôle de la qualité, Vérification des dosages, Interprétation de la coloration, Clé des symboles
sur les étiquettes et Limitations générales, consulter « Utilisation des Réactifs BOND » dans la documentation de l’utilisateur du BOND.

DS9665
Page 5
Bibliographie
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950 est une marque commerciale de Supelco, membre du groupe Sigma-Aldrich Corporation.

Date de publication
01 avril 2020

DS9665
Page 6
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
N. catalogo: DS9665
Uso previsto
Questo sistema di rilevazione è inteso per un uso diagnostico in vitro.
ChromoPlex 1 Dual Detection è un sistema di anticorpi coniugati alla perossidasi di rafano polimerica (HRP)-linker ed alla fosfatasi
lcalina polimerica (AP)-linker, senza biotina, per la rilevazione di anticorpi primari IgG di topo e di coniglio legati a tessuto. È previsto per
la colorazione di sezioni fissate in formalina, o di tessuto incluso in paraffina con il sistema automatizzato BOND (include il sistema Leica
BOND-MAX e il sistema Leica BOND-III).
L’interpretazione clinica di qualsiasi colorazione o della sua assenza devono essere integrate da studi morfologici. Controlli appropriati
devono essere valutati da un patologo qualificato nel contesto della storia clinica del paziente e di altri test diagnostici.
Il sistema ChromoPlex 1 Dual Detection deve essere usato con le metodiche della buona pratica di laboratorio relative all’uso di controlli
di tessuto. Per sicurezza, i laboratori devono colorare i campioni di ciascun paziente insieme a controlli positivi e negativi ed altri controlli
specifici del tessuto, come ritenuto necessario.

Sommario e spiegazione
Le tecniche immunoistochimiche possono essere usate per dimostrare la presenza di antigeni in tessuti e cellule (vedere “Utilizzo dei
reagenti BOND” nella documentazione di BOND per l’utilizzatore).
ChromoPlex 1 Dual Detection utilizza una nuova tecnologia di polimerizzazione controllata per preparare gli anticorpi coniugati polimerici
HRP-linker e AP-linker. Il sistema di rilevazione evita l’uso di streptavidina e biotina, eliminando quindi colorazioni non specifiche che
risultano dalla biotina endogena.
ChromoPlex 1 Dual Detection funziona nel modo seguente:
• Il campione viene incubato con perossido di idrogeno per attenuare l’attività della perossidasi endogena.
• Viene applicato un cocktail di anticorpi primari anti-topo e anti-coniglio fornito dall’utilizzatore.
• Il reagente Poly-HRP IgG localizza gli anticorpi anti-topo.
• Il reagente Poly-AP IgG localizza gli anticorpi anti-coniglio.
• Il primo substrato cromogeno, il 3,3’-Diaminobenzidina tetraidrocloruro idrato (DAB), visualizza gli anticorpi anti-topo per mezzo di un
precipitato marrone.
• Il secondo substrato cromogeno (Fast Red), visualizza gli anticorpi anti-coniglio mediante un precipitato rosso.
• La colorazione di contrasto con ematossilina (blu) permette di visualizzare il nucleo delle cellule.
L’utilizzo di ChromoPlex 1 Dual Detection in combinazione con il sistema automatizzato BOND (include il sistema Leica BOND-MAX e il
sistema Leica BOND-III). riduce la possibilità di errore umano e la variabilità intrinseca risultante dalla diluizione individuale del reagente,
dalla pipettatura manuale e dall’applicazione del reagente.

Reagenti forniti
I reagenti forniti sono sufficienti per 25 corse individuali di colorazione con BOND o per un massimo di 50 vetrini.
Per ottenere un massimo di 50 vetrini da questo sistema di rilevazione, i vetrini devono essere raggruppati in gruppi di 2 o superiori,
nell’assemblaggio di colorazione dei vetrini. Il raggruppamento in quantità inferiori a 2 porterà alla colorazione di un numero inferiore di
vetrini.
1. Peroxide Block (7.5 mL) 3-4% perossido di idrogeno.
2. Polymer mHRP (7.5 mL) anti-topo Poly-HRP contenente il 10% (v/v) di siero animale in soluzione salina tamponata con Tris e 0,1%
ProClin™ 950.
3. Polymer rAP (7.5 mL) anti-coniglio Poly-AP contenente il 10% (v/v) di siero animale in soluzione salina tamponata con Tris e 0,09%
ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (1 mL) 66 mM 3,3’-Diaminobenzidina tetraidrocloruro idrato in una soluzione stabilizzante.
5. DAB Part B (20 mL) ≤0,1% (v/v) perossido di idrogeno in una soluzione stabilizzante.
6. Red Part A (5,5 mL) Catalizzatore contenente 0,5% ProClin™ 950.
7. Red Part B (1,0 mL) Substrato.
8. Red Part C (1,0 mL) Substrato.
9. Red Part D (35 mL) Soluzione tampone contenente 0,5% ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9665 (7.5 mL) <0,1% Ematossilina.

Diluizione e miscelazione
ChromoPlex 1 Dual Detection è ottimizzato per l’utilizzo con il sistema BOND (include il sistema Leica BOND-MAX e il sistema Leica
BOND-III).
La ricostituzione, la miscelazione, la diluizione o la titolazione di questi reagenti non è richiesta.

Materiali richiesti ma non forniti

DS9665
Page 7
Conservazione e stabilità
Conservare a 2-8 °C. Non congelare. Non usare dopo la data di scadenza indicata nell’etichetta dell’impugnatura del vassoio. Riporre a
2–8 °C immediatamente dopo l’uso.
Non vi sono ovvi segni che indicano l’instabilità di questo prodotto; pertanto, contemporaneamente ai campioni non noti, devono
essere corsi i controlli positivi e negativi (fare riferimento al “Controllo di qualità” nel paragrafo “Utilizzo dei reagenti BOND”della
documentazione di BOND per l’utilizzatore).
Qualora si osservi una colorazione inaspettata che non possa essere spiegata da variazioni delle procedure di laboratorio, e si sospetta
un problema con il sistema di rilevazione, contattare immediatamente il distributore locale o l’ufficio regionale di Leica Biosystems.
Le condizioni di conservazione, oltre a quelle sopra specificate, devono essere verificate dall’utilizzatore1.

Precauzioni
• AVVERTENZE - alcuni mezzi di supporto possono provocare la cristallizzazione o lo scolorimento del cromogeno rosso.
• NON USARE mezzi di supporto quali DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® quick-hardening mounting medium, Surgipath MM 24®,
Surgipath Sub-X® e Pertex poiché non sono adatti ad essere utilizzati con questo prodotto.
• Lo scolorimento e la cristallizzazione non sono stati osservati con: Leica CV Ultra Mounting Media (Cat 14070937891), Poly-Mount®
(Polysciences Inc. Cat 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories Cat H-5000) e Limonene Mount (Electron Microscopy Sciences Cat
17987-01).
• La compatibilità di altri mezzi di supporto deve essere convalidata in modo completo dall’utilizzatore prima dell’uso. Non fare questo
può portare ad una riduzione della colorazione a causa di scolorimento o cristallizzazione.
• L’attivatore e le soluzioni substrato possono provocare irritazione cutanea, agli occhi, alle membrane mucose ed alle vie respiratorie
superiori. Indossare guanti usa e getta di nitrile durante la manipolazione dei reagenti. Smaltire in accordo con le direttive locali.
• Per ottenere una copia delle schede sulla sicurezza dei materiali contattare il distributore locale o l’ufficio regionale di Leica
Biosystems. Alternativamente, visitare il web site di Leica Biosystems, www.LeicaBiosystems.com
• I campioni, prima e dopo il fissaggio, e tutti i materiali esposti ad essi, devono essere maneggiati come se fossero infettivi e smaltiti
con le precauzioni appropriate3. Non pipettare mai i reagenti con la bocca ed evitare il contatto della pelle e delle membrane mucose
con i reagenti o i campioni. Se i reagenti o i campioni vengono in contatto con aree sensibili, lavare con abbondante quantità di
acqua. Chiedere assistenza medica.
• Consultare i regolamenti Statali, Regionali o locali per lo smaltimento dei componenti potenzialmente tossici.
• Minimizzare la contaminazione microbica dei reagenti per evitare un potenziale aumento della colorazione non specifica.
• Tempi o temperature di incubazione diversi da quelli specificati possono portare a risultati errati. Ciascuno di tali cambiamenti deve
essere convalidato dall’utilizzatore1.
• Non miscelare i reagenti di altri sistemi di rilevazione.

Istruzioni per l’uso

Limitazioni specifiche del prodotto

Soluzione problemi
Fare riferimento alla voce bibliografica 4 per procedure riparatrici.
Contattare il rivenditore locale o l’ufficio regionale di Leica Biosystems per riportare colorazioni anomale.

Altre informazioni
Altre informazioni sull’immuno-colorazione con i reagenti BOND, nei paragrafi Principio della procedura, Materiali richiesti, Preparazione
dei campioni, Controllo di qualità, Verifica del dosaggio, Interpretazione della colorazione, Chiave ai simboli sulle etichette e Limitazioni
generali possono essere trovate in “Utilizzo dei reagenti BOND” nella documentazione di BOND per l’utilizzatore.

DS9665
Page 8
Bibliografia
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950 è un marchio di fabbrica di Supelco, società del gruppo Sigma-Aldrich.

Data di pubblicazione
01 aprile 2020

DS9665
Page 9
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Bestellnr.: DS9665
Verwendungszweck
Dieses Nachweissystem ist für die In-vitro-Diagnostik bestimmt.
ChromoPlex 1 Dual Detection ist ein biotinfreies, Polymer-Meerrettichperoxidase-(HRP)-Linker sowie Polymer-Alkaliphosphatase-(AP)-
Linker enthaltendes Antikörperkonjugatsystem zum Nachweis der gewebegebundenen Primärantikörper Maus-IgG und Kaninchen-IgG.
Es dient der Färbung von Bereichen von formalinfixiertem, in Paraffin eingebetteten Gewebe auf dem automatisierten BOND-System
(bestehend aus dem Leica BOND-MAX-System und dem Leica BOND-III-System)
Die klinische Auswertung einer Fäbung bzw. das Nichtvorhandensein einer Färbung sollte von morphologischen Untersuchungen
begleitet werden. Geeignete Kontrollen sollten unter Berücksichtigung der Krankengeschichte des Patienten und anderer diagnostischer
Tests durch einen qualifizierten Pathologen durchgeführt werden.
Beim Umgang mit Gewebeproben muss ChromoPlex 1 Dual Detection gemäß den Grundsätzen der Guten Laborpraxis eingesetzt
werden. Zur Sicherheit sollten Laboratorien jede Patientenprobe je nach Bedarf in Verbindung mit positiven, negativen und anderen
gewebespezifischen Kontrollen färben.

Zusammenfassung und Erläuterung

Mitgelieferte Reagenzien
Die mitgelieferten Reagenzien reichen für 25 einzelne BOND-Färbungen oder maximal 50 Objektträger.
Um die Höchstzahl von 50 Objektträgern mit diesem Detektionssystem zu erreichen, müssen Objektträger in Mengen von 2 oder höher
gemäß der Objektträgerfärbungsanordnung zusammengefasst werden. Werden weniger als 2 Objektträger zusammengefasst, wird eine
geringere Anzahl gefärbter Objektträger erhalten.
1. Peroxide Block (7.5 mL) 3-4 % Wasserstoffperoxid.
2. Polymer mHRP (7.5 mL) Anti-Maus-Poly-HRP mit 10 % (Vol./Vol.) tierischem Serum in Tris-gepufferter Kochsalzlösung und 0,1 %
ProClin™ 950.
3. Polymer rAP (7.5 mL) Anti-Kaninchen-Poly-AP mit 10 % (Vol./Vol.) tierischem Serum in Tris-gepufferter Kochsalzlösung und 0,09 %
ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (1 mL) 66 mM 3,3’-Diaminobenzidintetrahydrochlorid Hydrat in einer Stabilisatorlösung.
5. DAB Part B (20 mL) ≤0,1 % (Vol./Vol.) Wasserstoffperoxid in einer Stabilisatorlösung.
6. Red Part A (5.5 mL) Aktivator mit 0,5 % ProClin™ 950.
7. Red Part B (1.0 mL) Substrat.
8. Red Part C (1.0 mL) Substrat.
9. Red Part D (35 mL) Pufferlösung mit 0,5 % ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9665 (7.5 mL) <0,1 % Hämatoxylin.

Verdünnung und Mischung

Erforderliche, aber nicht mitgelieferte Materialien

DS9665
Page 10
Lagerung und Stabilität
Bei 2-8 °C aufbewahren. Nicht einfrieren. Nur bis zu dem auf dem Griffetikett angegebenen Verfallsdatum verwenden. Sofort nach
Gebrauch wieder bei 2-8 °C lagern.
Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen, die auf eine Instabilität dieses Produktes hinweisen könnten; daher sollten positive und
negative Kontrollen gleichzeitig mit unbekannten Proben durchgeführt werden (siehe „Qualitätskontrolle“ im Abschnitt „Verwendung der
BOND-Reagenzien“ in Ihrer BOND-Benutzerdokumentation).
Sollte eine unerwartete Färbung auftreten, die sich nicht mit experimentellen Schwankungen erklären lässt, und die Vermutung nahe
liegen, dass es sich um ein Problem mit dem Nachweissystem handelt, kontaktieren Sie bitte sofort Ihren Vertriebshändler vor Ort oder
die regionale Niederlassung von Leica Biosystems.
Aufbewahrungsbedingungen, die nicht den oben angegebenen entsprechen, sind vom Anwender1 zu prüfen.

Vorsichtsmaßnahmen
• WARNHINWEIS: Einige Einbettmittel können bewirken, dass das rote Chromogen kristallisiert oder verblasst.
• VEWENDEN SIE FOLGENDE EINBETTMITTEL NICHT: DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® quick-hardening mounting medium,
Surgipath MM 24®, Surgipath Sub-X® und Pertex. Sie sind für die Verwendung mit diesem Produkt nicht geeignet.
• Verblassen oder Kristallisieren wurde in Verbindung mit folgenden Produkten nicht beobachtet: Leica CV Ultra Mounting Media
(Kat.-Nr. 14070937891), Poly-Mount® (Polysciences Inc. Kat.-Nr. 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories Kat.-Nr. H-5000) und
Limonene Mount (Electron Microscopy Sciences Kat.-Nr. 17987-01).
• Die Kompatibilität anderer Einbettmittel sollte vor dem Gebrauch in vollem Umfang durch den Anwender überprüft werden.
Andernfalls kann eine Reduzierung der Färbung durch Verblassen oder Kristallisieren eintreten.
• Die Aktivator- und Substratlösungen können Reizungen der Haut, Augen, Schleimhäute sowie der oberen Atemwege verursachen.
Tragen Sie beim Umgang mit Reagenzien Einweghandschuhe aus Nitril. Die Entsorgung sollte gemäß den örtlichen Bestimmungen
erfolgen.
• Kopien des Sicherheitsdatenblatts sind von Ihrem Vertriebshändler vor Ort oder der regionalen Niederlassung von Leica Biosystems
erhältlich bzw. über die Website von Leica Biosystems unter www.LeicaBiosystems.com abrufbar.
• Proben vor und nach der Fixierung und alle Materialien, die mit ihnen in Kontakt kommen, sind als potenziell infektiös zu betrachten
und unter Beachtung der entsprechenden Vorsichtsmaßnahmen zu entsorgen3. Sie sollten die Reagenzien niemals mit dem Mund
pipettieren und den Kontakt von Haut und Schleimhäuten mit den Reagenzien oder Proben vermeiden. Bei Kontakt von Reagenzien
oder Proben mit empfindlichen Bereichen sollten Sie sie mit viel Wasser abwaschen und einen Arzt hinzuziehen.
• Bei der Entsorgung potenziell toxischer Komponenten sollten staatliche, bundesstaatliche und örtliche Vorschriften beachtet werden.
• Sie sollten eine mikrobielle Kontamination der Reagenzien vermeiden, da sonst ein Anstieg der nichtspezifischen Färbung auftreten
kann.
• Inkubationszeiten und Temperaturen, die nicht den oben angegebenen entsprechen, können zu fehlerhaften Ergebnissen führen.
Derartige Änderungen sind vom Anwender zu prüfen1.
• Es sollten keine Reagenzien verschiedener Nachweissysteme gemischt werden.

Gebrauchsanleitung
ChromoPlex 1 Dual Detection wurde für den Einsatz im automatisierten BOND-System (bestehend aus dem Leica BOND-MAX-System
und dem Leica BOND-III-System) unter Verwendung des *IHC Protocol K - 50 Test entwickelt. Die Betriebsparameter für den Einsatz
der Reagenzien mit dem BOND-Verarbeitungsmodul wurden von Leica Biosystems optimiert. Diese können durch Befolgen der
Anweisungen in der BOND-Benutzerdokumentation angezeigt werden.
Verwenden Sie eine schnelle Alkohol /Xylol-Dehydratisierung.
Nach Abschluss oder Abbruch des *IHC Protocol K - 50 Test kommt es zu einer Verzögerung von ca. 15 Minuten, bevor das BOND-
System einen weiteren Lauf auf derselben Objektträgerfärbungsanordnung startet.

Produktspezifische Einschränkungen
ChromoPlex 1 Dual Detection wurde von Leica Biosystems für den Einsatz mit BOND-Sekundärreagenzien optimiert. Labore können
ihre eigenen Primärantikörper-Cocktails einsetzen, sofern sie mit BOND Primary Antibody Diluent (Kat.-Nr. AR9352) auf eine geeignete
Konzentration verdünnt wurden. Anwender, die vom empfohlenen Testverfahren abweichen, müssen die Verantwortung für die
Auswertung der Patientendaten unter diesen Bedingungen übernehmen.
Die geeignete Konzentration der Primärantikörper des Anwenders kann je nach Gewebefixierung und Wirksamkeit der
Antigenverstäkung unterschiedlich sein und muss empirisch ermittelt werden. Negative Reagenzkontrollen sollten bei der Optimierung
der Retrieval-Bedingungen und der Konzentrationen der Primärantikörper eingesetzt werden.
Die klinische Auswertung einer Fäbung bzw. das Nichtvorhandensein einer Färbung sollte von morphologischen Untersuchungen
begleitet werden. Geeignete Kontrollen sollten unter Berücksichtigung der Krankengeschichte des Patienten und anderer diagnostischer
Tests durch einen qualifizierten Pathologen durchgeführt werden.
Einige Einbettmittel sind mit ChromoPlex 1 Dual Detection nicht kompatibel (siehe Vorsichtsmaßnahmen).
Weitere Informationen erhalten Sie von Ihrem Vertriebshändler vor Ort oder von der regionalen Niederlassung von Leica Biosystems.

Fehlersuche
Siehe Referenz 4 für Maßnahmen zur Fehlerbehebung.
Wenden Sie sich bitte an Ihren Vertriebshändler vor Ort oder die regionale Niederlassung von Leica Biosystems, wenn Sie ein
ungewöhnliches Färbeverhalten feststellen.

DS9665
Page 11
Weitere Informationen
Weitere Informationen zur Immunfärbung mit BOND-Reagenzien finden Sie im Abschnitt „Verwendung der BOND-Reagenzien“ in
Ihrer BOND- Benutzerdokumentation unter folgenden Überschriften: Verfahrensprinzip, Erforderliche Materialien, Probenvorbereitung,
Qualitätskontrolle, Assayverifizierung, Interpretation der Färbeergebnisse, Schlüssel für die Symbole auf den Etiketten sowie Allgemeine
Einschränkungen.

Bibliografie
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950 ist eine Marke von Supelco, einem Unternehmen der Sigma-Aldrich Corporation.

Ausgabedatum
01 April 2020

DS9665
Page 12
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Catálogo Nº.: DS9665
Uso previsto
Este sistema de detección es para uso diagnóstico in vitro.
ChromoPlex 1 Dual Detection es un sistema sin biotina de anticuerpos conjugados que se fijan a la peroxidasa de rábano picante (HRP)
polimérica y a la fosfatasa alcalina (AP) para la detección de anticuerpos primarios de lgG de conejo y ratón unidos a tejidos. Se utiliza
para la tinción de secciones de tejido incluido en parafina y fijado con formol en el sistema automático BOND (incluye el sistema Leica
BOND-MAX y el sistema Leica BOND-III).
La interpretación clínica de cualquier tinción o de su ausencia deberá complementarse con estudios morfológicos. Se deben realizar
controles adecuados cuyos resultados deberá evaluar un patólogo cualificado en el contexto del historial clínico del paciente y de otras
pruebas diagnósticas.
El ChromoPlex 1 Dual Detection debe utilizarse conforme a unas prácticas de laboratorio adecuadas en relación al uso de controles de
tejidos. Para la verificación, los laboratorios deben teñir cada muestra de paciente junto con los controles positivo y negativo, además
de otros controles de tejidos específicos, según sea necesario.

Resumen y explicación
Las técnicas inmunohistoquímicas pueden utilizarse para detectar la presencia de antígenos en tejidos y células (véase “Uso de
Reactivos BOND” en la documentación del usuario de BOND).
ChromoPlex 1 Dual Detection utiliza una tecnología novedosa de polimerización controlada para preparar anticuerpos conjugados que
se fijan a la AP y HRP polimérica. El sistema de detección evita el uso de estreptavidina y biotina, eliminando de esta forma la tinción no
específica producida por la biotina endógena.
Este es el funcionamiento de ChromoPlex 1 Dual Detection:
• Se incuba la muestra con peróxido de hidrógeno para anular la actividad de la peroxidasa endógena.
• Se aplica un cóctel de anticuerpos primarios específicos de ratón y conejo suministrado por el usuario.
• El reactivo Poli-HRP IgG localiza anticuerpos de ratón.
• El reactivo Poli-AP IgG localiza anticuerpos de conejo.
• Con el primer sustrato cromógeno 3,3’-tetraclorhidrato hidrato de diaminobencidina o (DAB) se visualizan los anticuerpos de ratón a
través de un precipitado marrón.
• Con el segundo sustrato cromógeno (Fast Red), se visualizan los anticuerpos de conejo a través de un precipitado rojo.
• La contratinción con hematoxilina (azul) permite la visualización de los núcleos celulares.
El uso combinado de ChromoPlex 1 Dual Detection con el sistema automático BOND (incluye el sistema Leica BOND-MAX y el sistema
Leica BOND-III). reduce la posibilidad de aparición de errores humanos y la variabilidad inherente derivada de la dilución del reactivo
por separado, el pipeteo manual y la aplicación del reactivo.

Reactivos suministrados
Los reactivos suministrados son suficientes para 25 series de tinción BOND individuales, o un máximo de 50 portaobjetos.
Para conseguir un máximo de 50 portaobjetos a partir de este sistema de detección, estos se deben separar en grupos de 2 como
mínimo, por cada unidad de tinción de portaobjetos.
La separación en grupos inferiores a 2 dará lugar a menos portaobjetos teñidos.
1. Peroxide Block (7.5 mL) peróxido de hidrógeno al 3-4 %.
2. Polymer mHRP (7.5 mL) Poly-HRP antirratón que contiene suero animal al 10 % (v/v) en solución salina amortiguada con tris y
ProClin™ 950 al 0,1 %.
3. Polymer rAP (7.5 mL) Poly-AP anticonejo que contiene suero animal al 10 % (v/v) en solución salina amortiguada con tris y
ProClin™ 950 al 0,09 %.
4. DAB Part 1 (1 mL) 3,3’-tetraclorhidrato hidrato de diaminobendidina 66 mM en solución estabilizante.
5. DAB Part B (20 mL) peróxido de hidrógeno ≤0,1 % (v/v) en solución estabilizante.
6. Red Part A (5.5 mL) activador con ProClin™ 950 al 0,5 %.
7. Red Part B (1.0 mL) sustrato.
8. Red Part C (1.0 mL) substrato.
9. Red Part D (35 mL) solución amortiguada con ProClin™ 950 al 0,5 %.
10. Hematoxylin DS9665 (7.5 mL) hematoxilina <0,1 %.

Dilución y mezcla
ChromoPlex 1 Dual Detection está optimizado para su empleo con el sistema BOND (incluye el sistema Leica BOND-MAX y el sistema
Leica BOND-III).
No es necesaria la reconstitución, mezcla, dilución o titulación de estos reactivos.

Material necesario pero no suministrado

DS9665
Page 13
Conservación y estabilidad
Conservar a 2-8 °C. No congelar. No utilizar después de la fecha de caducidad que aparece en la etiqueta de la bandeja. Volver a
conservar a 2-8 °C inmediatamente después de su uso.
No existen signos claros que indiquen inestabilidad en este producto. Por lo tanto, deberán efectuarse controles positivos y negativos
simultáneamente con muestras desconocidas (véase el apartado “Control de calidad” en la sección “Uso de reactivos BOND” de la
documentación del usuario facilitada por BOND).
Si observa una tinción inesperada, que no puede explicarse por variaciones en los procedimientos del laboratorio, o sospecha de la
existencia de un problema en el sistema de detección, póngase en contacto inmediatamente con su distribuidor local o con la sede
regional de Leica Biosystems.
El usuario1 deberá comprobar cualquier condición de almacenamiento diferente de las especificadas anteriormente.

Precauciones
• ADVERTENCIA: algunos medios de montaje pueden provocar que el cromógeno rojo cristalice o se desvanezca.
• NO UTILICE los medios de montaje DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® quick-hardening mounting medium, Surgipath MM 24®,
Surgipath Sub-X® y Pertex, ya que su empleo con este producto no es adecuado.
• No se ha observado desvanecimiento o cristalización con: Leica CV Ultra Mounting Media (Cat 14070937891), Poly-Mount®
(Polysciences Inc. Cat 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories Cat H-5000) y Limonene Mount (Electron Microscopy Sciences Cat
17987-01).
• El usuario debe comprobar fehacientemente la compatibilidad de otros medios de montaje antes de su utilización. De lo contrario, se
puede producir una reducción en la tinción a causa del desvanecimiento o la cristalización.
• Las soluciones activadoras y de sustrato pueden producir irritación en la piel, ojos, mucosas y vías respiratorias superiores. Utilice
siempre guantes desechables de nitrilo cuando manipule reactivos. Para la eliminación, siga la normativa local.
• Si desea obtener una copia de la Hoja de datos de seguridad de materiales, póngase en contacto con su distribuidor local o sede
regional de Leica Biosystems, o visite la página web de Leica Biosystems en www.LeicaBiosystems.com
• Las muestras, antes y después de ser fijadas, y cualquier material en contacto con ellas, deben tratarse como sustancias capaces
de transmitir infecciones y deben eliminarse tomando las precauciones correspondientes3. No pipetee nunca los reactivos con la
boca y evite el contacto de la piel y las mucosas con reactivos o muestras. Si los reactivos o muestras entran en contacto con zonas
sensibles, lávelas enseguida con agua abundante y consulte a un médico.
• Consulte la normativa nacional, regional o local referente a la eliminación de sustancias potencialmente tóxicas.
• Procure reducir la contaminación microbiana de los reactivos, ya que esta puede producir un aumento de las tinciones no
específicas.
• El uso de tiempos de incubación o temperaturas diferentes de los indicados pueden producir resultados erróneos. El usuario deberá
validar cualquier cambio que realice1.
• No mezcle reactivos de sistemas de detección diferentes.

Instrucciones de uso
El ChromoPlex 1 Dual Detection se ha desarrollado para su uso en el sistema automático BOND (incluye el sistema Leica BOND-MAX
y el sistema Leica BOND-III) utilizando el *IHC Protocol K - 50 Test. Leica Biosystems ha optimizado los parámetros de funcionamiento
para el uso de los reactivos del sistema de detección en el Módulo de procesamiento BOND. Si desea consultar estos parámetros, siga
las instrucciones de la documentación del usuario facilitada por BOND.
Utilice una deshidratación rápida con alcohol/xileno.
Tras finalizar o abandonar el *IHC Protocol K - 50 Test hay un lapso de 15 minutos aproximadamente antes de que el sistema BOND
comience otra serie de la misma unidad de tinción de portaobjetos.

Limitaciones específicas del producto

Resolución de problemas
Consulte la referencia 4 para conocer las acciones correctivas.
Si el resultado de la tinción no es el esperado, póngase en contacto con su distribuidor local o sede regional de Leica Biosystems.

Más información
Para obtener más información sobre inmunotinciones con reactivos BOND, consulte los apartados Principio del procedimiento,
Materiales necesarios, Preparación de las muestras, Control de calidad, Verificación del análisis, Interpretación de la tinción, Leyenda
de símbolos en las etiquetas y Limitaciones generales de la sección “Utilización de reactivos BOND” de su documentación del usuario
facilitada por BOND.

DS9665
Page 14
Bibliografía
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950 es una marca comercial de Supelco, parte de Sigma-Aldrich Corporation.

Fecha de publicación
01 de abril de 2020

DS9665
Page 15
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Nº de catálogo: DS9665
Utilização Prevista
Este sistema de detecção destina-se a utilização diagnóstica in vitro.
ChromoPlex 1 Dual Detection é um sistema conjugado de anticorpos ligante sem biotina, de peroxidase polimérica de rábano (HRP) e
de anticorpos ligantes de fosfatase alcalina polimérica (AP) para a detecção de anticorpos primários lgG de ratinho e coelho ligados a
tecidos. Destina-se à coloração de secções de tecido fixado com formalina, embebido em parafina no sistema automático BOND (inclui
osistema Leica BOND-MAX e o sistema Leica BOND-III).
A interpretação clínica de qualquer coloração ou da sua ausência deverá ser complementada por estudos morfológicos. Devem ser
avaliados os controlos adequados no contexto do histórico clínico do paciente e outros testes de diagnóstico por um patologista
qualificado.
O ChromoPlex 1 Dual Detection deve ser utilizado no âmbito das melhores práticas laboratoriais de utilização de controlos de tecido.
Por segurança, os laboratórios deverão colorir cada amostra de paciente em conjunto com controlos positivos, negativos e outros
específicos do tecido, conforme necessário.

Resumo e Explicação
Podem ser utilizadas técnicas imunohistoquímicas para demonstrar a presença de antigénios em tecidos e células (consulte “Utilização
de reagentes BOND”, na sua documentação de utilizador BOND).
O ChromoPlex 1 Dual Detection utiliza uma nova tecnologia de polimerização controlada para preparar o conjugado ligante HRP
polimérico e ligante de anticorpo AP. O sistema de detecção evita a utilização de estreptavidina e biotina e elimina assim a coloração
não específica resultante de biotina endógena.
O ChromoPlex 1 Dual Detection funciona da seguinte forma:
• A amostra é incubada com peróxido de hidrogénio para eliminar a actividade das peroxidases endógenas.
• É aplicado um cocktail de anticorpos primários específicos de ratinho e coelho.
• O reagente Poli-HRP IgG localiza os anticorpos de ratinho.
• O reagente Poli-AP IgG localiza os anticorpos de coelho.
• O primeiro substrato cromogénico, tetrahidrocloreto hidrato de 3,3’ diaminobenizidina (DAB) visualiza os anticorpos de ratinho
através da formação de um precipitado castanho.
• O segundo substrato cromogénico (Fast Red), visualiza os anticorpos de coelho através da formação de um precipitado vermelho.
• A contracoloração com hematoxilina (azul) permite a visualização dos núcleos celulares.
Utilizando o ChromoPlex 1 Dual Detection em combinação com o sistema automático BOND (inclui o sistema Leica BOND-MAX e
o sistema Leica BOND-III), reduz-se a possibilidade de erro humano e a inerente variabilidade resultante da diluição de reagentes
individuais, pipetagem manual e aplicação de reagentes.

Reagentes Fornecidos
Os reagentes fornecidos são suficientes para 25 testes de coloração individual BOND ou para um máximo de 50 lâminas.
Para conseguir um máximo de 50 lâminas neste sistema de detecção, as lâminas devem ser agrupadas em quantidades de 2 ou mais,
por Conjuntos de Coloração de Lâminas. O agrupamento em quantidades inferiores a 2 resultará em menos lâminas coloridas.
1. Peroxide Block (7.5 mL) 3-4% Peróxido de hidrogénio.
2. Polymer mHRP (7.5 mL) Poly-HRP anti-ratinho contendo 10% (v/v) de soro animal em solução Tris-salina tamponada e 0,1%
ProClin™ 950.
3. Polymer rAP (7.5 mL) Poly-AP anti-coelho contendo 10% (v/v) soro animal em solução Tris-salina tamponada e 0,09% ProClin™
950.
4. DAB Part 1 (1 mL) 66 mM Tetrahidrocloreto hidrato de 3,3’-diaminobenzidina em solução estabilizante.
5. DAB Part B (20 mL) ≤0,1% (v/v) Peróxido de hidrogénio em solução estabilizante.
6. Red Part A (5.5 mL) Activador contendo 0,5% ProClin™ 950.
7. Red Part B (1.0 mL) Substrato.
8. Red Part C (1.0 mL) Substrato.
9. Red Part D (35 mL) Solução tamponada contendo 0,5% ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9665 (7.5 mL) <0,1% Hematoxilina.

Diluição e Mistura
O ChromoPlex 1 Dual Detection está optimizado para utilização no sistema BOND (inclui o sistema Leica BOND-MAX e o sistema Leica
BOND-III).
A reconstituição, mistura, diluição ou titulação destes reagentes não é necessária.

Materiais Necessários Mas Não Fornecidos

DS9665
Page 16
Armazenamento e Estabilidade
Armazenar entre 2 e 8 °C. Não congelar. Não utilizar depois da data de caducidade indicada na etiqueta da pega do tabuleiro. Voltar a
armazenar entre 2 e 8 °C imediatamente após a utilização.
Não existem sinais evidentes que identifiquem a instabilidade deste produto. Desta forma, os controlos positivos e negativos devem
ser realizados simultaneamente com amostras desconhecidas (consulte “Controlo de qualidade”, na secção “Utilização de reagentes
BOND” na sua documentação de utilizador BOND.
Se for observada uma coloração inesperada inexplicável através das variações dos procedimentos laboratoriais e se suspeitar de um
problema no sistema de detecção, contacte imediatamente o seu distribuidor local ou a filial da Leica Biosystems.
As condições de armazenamento que não as acima referidas devem ser verificadas pelo utilizador1.

Precauções
• AVISO - alguns meios de montagem poderão levar a que o cromogéneo vermelho cristalize ou se desvaneça.
• NÃO UTILIZAR os meios de montatem DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® quick-hardening mounting medium, Surgipath MM
24®, Surgipath Sub-X® e Pertex já que estes não são adequados para utilização com este produto.
• O desvanecimento ou cristalização não foi observado com: Leica CV Ultra Mounting Media (Cat 14070937891), Poly-Mount®
(Polysciences Inc. Cat 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories Cat H-5000) e Limonene Mount (Electron Microscopy Sciences Cat
17987-01).
• A compatibilidade de outros meios de montagem deve ser totalmente validada pelo utilizador antes da utilização. A não observância
deste procedimento poderá resultar em redução da coloração por desvanecimento ou cristalização.
• As soluções activadoras e de substrato podem provocar irritação na pele, olhos e membranas mucosas e tracto respiratório superior.
Use luvas de nitrilo descartáveis quando manuseia reagentes. Elimine de acordo com a legislação local.
• Para obter uma cópia da Ficha de Informação de Segurança do Material, contacte o seu distribuidor local ou a filial da Leica
Biosystems. Em alternativa, visite o website da Leica Biosystems, www.LeicaBiosystems.com
• As amostras, antes e depois da sua fixação e todos os materiais a elas expostos, devem ser manuseados com sendo capazes de
transmissão de infecções e eliminados com as devidas precauções. Nunca pipetar reagentes pela boca e evitar o contacto com a
pele e membranas mucosas com reagentes ou amostras. Se os reagentes ou amostras estiverem em contacto com áreas sensíveis,
lavar com bastante quantidade de água. Procurar conselho médico.
• Consultar a legislação federal, estatal ou local para eliminação de quaisquer componentes potencialmente tóxicos.
• Poderá ocorrer uma diminuição da contaminação microbiana de reagentes ou um aumento de coloração não específica.
• Os tempos ou temperaturas de incubação que não aqueles definidos poderão provocar resultados errados. Qualquer alteração
deverá ser validada pelo utilizador1.
• Não misturar reagentes de diferentes sistemas de detecção.

Instruções de Utilização
O ChromoPlex 1 Dual Detection foi desenvolvido para utilização no sistema automático BOND (inclui o sistema Leica BOND-MAX e
o sistema Leica BOND-III). utilizando o *IHC Protocol K - 50 Test. Os parâmetros de funcionamento para aplicação dos reagentes do
sistema de detecção no Módulo de processamento BOND foram optimizados pela Leica Biosystems. Estes podem ser apresentados
seguindo as instruções na sua documentação de utilizador BOND.
Utilizar a desidratação rápida álcool/xileno.
Depois de completar ou abortar o *IHC Protocol K - 50 Test existe um intervalo de, aproximadamente, 15 minutos antes do sistema
BOND iniciar outra verificação no Conjunto de coloração de lâminas.

Limitações Específicas do Produto

Resolução de Problemas
Consulte a referência 4 para soluções.
Contacte o seu distribuidor local ou filial da Leica Biosystems para comunicar uma coloração não usual.

Informações Adicionais
Encontrará mais informação sobre imunocoloração com reagentes BOND, no capítulo Princípios do Procedimentos, Materiais
Necessários, Preparação de Amostras, Controlo de Qualidade, Verificação de Testes, Interpretação de Coloração, Chave de Símbolos
de Etiquetas e Limitações Gerais na secção “Utilização de reagentes BOND” na sua documentação de utilizador BOND.

DS9665
Page 17
Bibliografia
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950 é uma marca comercial de Supelco, parte da Sigma-Aldrich Corporation.

Data de Emissão
01 de Abril de 2020

DS9665
Page 18
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Artikelnummer: DS9665
Avsedd användning
Detta detektionssystem är endast avsett för in vitro diagnostiskt bruk.
ChromoPlex 1 Dual Detection är ett biotinfritt antikroppskonjugat med polymera pepparrotsperoxidas-”linker” (HRP) och polymer alkalisk
fosfatas-”linker” (AP) för detektion av vävnadsbundna primära IgG- antikroppar från mus och kanin. Systemet är avsett för infärgning av
områden med formalinfixerad, paraffininbäddad vävnad på det automatiserade systemet BOND (som innefattar systemen Leica BOND-
MAX och Leica BOND-III).
Klinisk tolkning av infärgning eller avsaknad av infärgning ska kompletteras med morfologiska studier. Lämpliga kontroller ska bedömas
mot bakgrund av patientens anamnes och andra diagnostiska tester av en kvalificerad patolog.
ChromoPlex 1 Dual Detection måste användas med god laboratoriesed vid utförande av vävnadskontroller. För kontroll ska labbet utföra
infärgning av alla patientprover tillsammans med positiva, negativa och andra vävnadsspecifika kontroller enligt behov.

Sammanfattning och förklaring

Reagenser förutsatt
De medföljande reagenserna räcker till 25 separata BOND-infärgningar eller upp till 50 objektglas.
För att uppnå infärgning av det maximala antalet objektglas (100 st) i detta detektionssystem, ska glasen köras i satser på 2 eller fler per
infärgningsenhet. Körningar med satser med färre än 2 objektglas i en sats kommer att ge färre infärgade objektglas.
1. Peroxide Block (7.5 mL) 3-4% väteperoxid.
2. Polymer mHRP (7.5 mL) poly-HRP anti-mus med 10 % viktprocent animaliskt serum i Tris-buffrad saltlösning och 0,1 % ProClin™
950.
3. Polymer rAP (7.5 mL) poly-AP anti-kanin med 10 % viktprocent animaliskt serum i Tris-buffrad saltlösning och 0,09 % ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (1 mL) 66 mM 3,3’-Diaminobenzidin tetrahydroklorid hydrat i en stabiliserande lösning.
5. DAB Part B (20 mL) ≤ 0,1 % viktprocent väteperoxid i en stabiliserande lösning.
6. Red Part A (5.5 mL) aktivator med 0,5 % ProClin™ 950.
7. Red Part B (1.0 mL) substrat.
8. Red Part C (1.0 mL) substrat.
9. Red Part D (35 mL) buffertlösning med 0,5 % ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9665 (7.5 mL) < 0,1 % Hematoxylin.

Spädning och blandning

Nödvändiga material som inte medföljer

Förvaring och stabilitet

DS9665
Page 19
Det finns inga tydliga tecken som påvisar instabilitet hos denna produkt. Därför ska positiva och negativa kontroller köras tillsammans
med okända prover (se “Kvalitetskontroll” i “Använda BOND reagenser” i BOND användarhandbok).
Om oväntad infärgning inträffar som inte kan förklaras av variationer i laboratorierutiner och du misstänker att det är fel på
detektionssystemet ska du kontakta din lokala återförsäljare eller Leica Biosystems-representant så snart som möjligt.
Lagringsförhållanden utöver de som anges ovan ska verifieras av användaren1.

Säkerhetsföreskrifter
• VARNING – vissa monteringsmedier kan göra att det röda kromogenet kristalliserar eller bleks.
• ANVÄND EJ DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® quick-hardening mounting medium, Surgipath MM 24®, Surgipath Sub-X® eller
Pertex monteringsmedier eftersom dessa inte är lämpliga för användning med denna produkt.
• Blekning eller kristallisering har inte kunnat påvisas med: Leica CV Ultra Mounting Media (Cat 14070937891), Poly-Mount®
(Polysciences Inc. Cat 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories Cat H-5000) och Limonene Mount (Electron Microscopy Sciences
Cat 17987-01).
• Kompatibilitet hos andra monteringsmedier ska bekräftas av användaren innan systemet används. Underlåtelse att bekräfta
kompatibiliteten kan leda till sämre infärgning på grund av blekning eller kristallisering.
• Aktivator och substrat kan irritera hud, ögon, slemhinnor och övre luftvägar. Använd engångshandskar av gummi vid hantering av
reagenser. Kassera enligt lokala lagar och bestämmelser.
• För att erhålla ett säkerhetsdatablad, kontakta din lokala återförsäljare eller lokala Leica Biosystems-representant. Du kan även
besöka Leica Biosystems hemsida på www.LeicaBiosystems.com
• Prover, innan och efter fixering, samt alla material som exponeras för proverna ska hanteras som smittsamma och kasseras enligt
lokala bestämmelser3. Pipettera aldrig reagenser med munnen och undvik kontakt med hud och slemhinnor med reagenser och
prover. Om reagenser eller prover kommer i kontakt med känsliga områden ska du tvätta dessa med stora mängder vatten. Kontakta
läkare.
• Följ lokala och nationella lagar och bestämmelser vid kassering av potentiellt giftiga komponenter.
• Minimera mikrobiell kontamination av reagenserna för att minska icke-specifik infärgning.
• Inkubationstider och temperaturer utöver de som anges häri kan ge felaktiga resultat. Alla sådana ändringar ska valideras av
användaren1.
• Blanda inte reagenser från olika detektionssystem.

Bruksanvisning
ChromoPlex 1 Dual Detection är avsett för användning på BOND (som innefattar systemen Leica BOND-MAX och Leica BOND-
III). automatiserade system med *IHC Protocol K - 50 Test. Driftparametrar för tillsats av detektionssystemets reagenser till BOND
processmodul har optimerats av Leica Biosystems. Dessa parametrar finns i BOND användarhandbok.
Snabbtorka med alkohol/xylen.
Efter ett genomfört eller avbrutet *IHC Protocol K - 50 Test uppstår en paus på ca 15 minuter innan BOND-systemet startar ytterligare en
körning med samma infärgningsenhet.

Produktspecifika begränsningar
ChromoPlex 1 Dual Detection är utvecklat av Leica Biosystems för användning med BOND reagenser. Ett labb kan använda sin egen
cocktail med primära antikroppar om dessa späds till lämplig koncentration med BOND Primary Antibody Diluent (Katalognummer
AR9352). Användare som inte följer det rekommenderade testförfarandet är själva ansvariga för tolkning av testresultaten under dessa
förhållanden.
Lämplig koncentration av användarens egna primära antikroppar kan variera på grund av variationer i vävnadsfixering och effektivitet
av antigenförstärkning och ska bedömas empiriskt. Negativa reagenskontroller ska användas vid optimering av testförhållanden och
koncentration av primära antikroppar.
Klinisk tolkning av infärgning eller avsaknad av infärgning ska kompletteras med morfologiska studier och lämpliga kontroller. De ska
utvärderas mot bakgrund av patientens anamnes och andra diagnostiska tester av en kvalificerad patolog.
Vissa monteringsmedier är inte kompatibla med ChromoPlex 1 Dual Detection (se Säkerhetsföreskrifter)
Kontakta din lokala återförsäljare eller Leica Biosystems-representant för mer information.

Felsökning
Se referens 4 för felåtgärder
Kontakta din lokala återförsäljare eller Leica Biosystems-representant om systemet uppvisar onormal infärgning.

Mer information
Mer information om immunfärgning med BOND reagenser finns under avsnitten Procedurens principer, Material som behövs,
Provberedning, Kvalitetskontroll, Verifiering av analys, Tolkning av infärgningsresultat, Förklaring av symboler på etiketter samt Allmänna
begränsningar i “Använda BOND reagenser” i BOND användarhandbok.

Litteraturförteckning
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950 är ett varumärke för Supelco som ingår i Sigma-Aldrich Corporation.

Utgivningsdatum
01 april 2020

DS9665
Page 20
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Αρ. καταλόγου: DS9665
Προβλεπόμενη χρήση
Το παρόν σύστημα ανίχνευσης προορίζεται για διαγνωστική χρήση in vitro.
Το ChromoPlex 1 Dual Detection είναι ένα συζευγμένο σύστημα αντισωμάτων πολυμερικού συνδετικού υπεροξειδάσης αγριοραπανιού
(HRP) και πολυμερικού συνδετικού αλκαλικής φωσφατάσης (AP), χωρίς βιοτίνη, για την ανίχνευση των συνδεδεμένων στον ιστό,
κύριων αντισωμάτων IgG σε ποντίκια και κουνέλια. Προορίζεται για τις περιοχές χρώσης ιστού μονιμοποιημένου με φορμόλη και
ενσωματωμένου με παραφίνη στο αυτοματοποιημένο σύστημα BOND (περιλαμβάνει το σύστημα Leica BOND-MAX και το σύστημα
Leica BOND-III).
Η κλινική ερμηνεία τυχόν χρώσης ή απουσίας της πρέπει να συνδυαστεί με μορφολογικές εξετάσεις. Οι κατάλληλοι οροί ελέγχου πρέπει
να αξιολογηθούν στα πλαίσια του κλινικού ιστορικού του ασθενούς και άλλων διαγνωστικών εξετάσεων από ειδικευμένο παθολόγο.
Το ChromoPlex 1 Dual Detection πρέπει να χρησιμοποιηθεί με τη βέλτιστη εργαστηριακή πρακτική για τη χρήση των ορών ελέγχου
ιστού. Για λόγους διασφάλισης, τα εργαστήρια πρέπει να χρωματίσουν κάθε δείγμα του ασθενούς σε συνδυασμό με θετικούς, αρνητικούς
και άλλους ειδικούς ορούς ελέγχου ιστού, όπως απαιτείται.

Περίληψη και Επεξήγηση

Αντιδραστήρια που Παρέχονται

Αραίωση και Ανάμειξη

Υλικά Που Απαιτούνται Αλλά Δεν Παρέχονται

DS9665
Page 21
Φύλαξη και Σταθερότητα
Φυλάσσεται στους 2–8 °C. Μην καταψύχετε. Μην το χρησιμοποιείτε μετά από την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα της
λαβής του δίσκου. Επαναφέρετε στους 2–8 °C αμέσως μετά από τη χρήση.
Δεν υπάρχουν προφανείς ενδείξεις αστάθειας του προϊόντος. Επομένως, πρέπει να εξετάζονται θετικοί και αρνητικοί οροί ελέγχου
ταυτόχρονα με τα άγνωστα δείγματα (ανατρέξτε στην παράγραφο «Έλεγχος ποιότητας» της ενότητας «Χρήση αντιδραστηρίων BOND»
στην τεκμηρίωση χρήστη για το BOND).
Εάν παρατηρηθεί μη αναμενόμενη χρώση, η οποία δεν μπορεί να ερμηνευθεί με τη διαφοροποίηση των εργαστηριακών διαδικασιών,
και υπάρχει υποψία για πρόβλημα του συστήματος ανίχνευσης, επικοινωνήστε αμέσως με τον πλησιέστερο αντιπρόσωπο ή τα τοπικά
γραφεία της Leica Biosystems.
Συνθήκες αποθήκευσης διαφορετικές από αυτές που καθορίζονται παραπάνω πρέπει να επαληθευτούν από τον χρήστη1.

Προφυλάξεις
• ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ – ορισμένα μέσα στερέωσης ενδέχεται να προκαλέσουν κρυστάλλωση ή εξασθένιση του κόκκινου χρωμογόνου.
• ΜΗ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΕΙΤΕ τα μέσα στερέωσης DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® quick-hardening mounting medium, Surgipath
MM 24®, Surgipath Sub-X® και Pertex διότι δεν είναι κατάλληλα για χρήση με το παρόν προϊόν.
• Δεν έχει παρατηρηθεί εξασθένιση ή κρυστάλλωση με τα εξής: Leica CV Ultra Mounting Media (αρ. κατ. 14070937891), Poly-Mount®
(Polysciences Inc. αρ. κατ. 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories αρ. κατ. H-5000) και Limonene Mount (Electron Microscopy
Sciences αρ. κατ. 17987-01).
• Η συμβατότητα άλλων μέσων στερέωσης πρέπει να επικυρωθεί πλήρως από τον χρήστη πριν από τη χρήση. Διαφορετικά, μπορεί να
προκληθεί μείωση της χρώσης λόγω εξασθένισης ή κρυστάλλωσης.
• Τα διαλύματα ενεργοποιητή και υποστρώματος ενδέχεται να προκαλέσουν ερεθισμό στο δέρμα, στα μάτια, στις βλεννογόνους και
στην άνω αναπνευστική οδό. Να φοράτε γάντια νιτριλίου μίας χρήσης κατά τον χειρισμό των αντιδραστηρίων. Απορρίψτε σύμφωνα
με τους τοπικούς κανονισμούς.
• Για να λάβετε ένα αντίτυπο του δελτίου δεδομένων ασφάλειας υλικού (MSDS), απευθυνθείτε στον πλησιέστερο αντιπρόσωπο ή στα
τοπικά γραφεία της Leica Biosystems. Εναλλακτικά, επισκεφθείτε τον ιστότοπο της Leica Biosystems, στη διεύθυνση
www.LeicaBiosystems.com
• Τα δείγματα, πριν και μετά από τη σταθεροποίηση και όλα τα υλικά που εκτίθενται σε αυτά, πρέπει να θεωρούνται ως ικανά για
μετάδοση λοιμώξεων και να απορρίπτονται με τις κατάλληλες προφυλάξεις3. Ποτέ μη λαμβάνετε τα αντιδραστήρια με πιπέτα με το
στόμα και να αποφεύγετε την επαφή των αντιδραστηρίων ή των δειγμάτων με το δέρμα και τις βλεννογόνους. Εάν τα αντιδραστήρια ή
τα δείγματα έρθουν σε επαφή με ευαίσθητες περιοχές, πλύνετέ τα με άφθονο νερό. Ζητήστε συμβουλή από ιατρό.
• Να ακολουθείτε τους τοπικούς και κρατικούς κανονισμούς για την απόρριψη ενδεχομένως τοξικών συστατικών.
• Ελαχιστοποιήστε τη μικροβιακή ρύπανση των αντιδραστηρίων, διαφορετικά ενδέχεται να προκληθεί αύξηση της μη ειδικής χρώσης.
• Τυχόν χρόνοι ή θερμοκρασίες επώασης που διαφέρουν από τους καθορισμένους, ενδέχεται να οδηγήσουν σε εσφαλμένα
αποτελέσματα. Οποιαδήποτε τέτοια μεταβολή πρέπει να επικυρωθεί από τον χρήστη1.
• Μην αναμειγνύετε αντιδραστήρια από διαφορετικά συστήματα ανίχνευσης.

Οδηγίες Χρήσης
Το ChromoPlex 1 Dual Detection έχει αναπτυχθεί για χρήση στο αυτοματοποιημένο σύστημα BOND (περιλαμβάνει το σύστημα Leica
BOND-MAX και το σύστημα Leica BOND-III). σύμφωνα με το *IHC Protocol K - 50 Test. Οι παράμετροι λειτουργίας για την εφαρμογή
των αντιδραστηρίων του συστήματος ανίχνευσης στη μονάδα επεξεργασίας BOND έχει βελτιστοποιηθεί από τη Leica Biosystems. Αυτές
υποδεικνύονται με την τήρηση των οδηγιών που αναφέρονται στην τεκμηρίωση χρήστη για το BOND.
Να χρησιμοποιείτε ταχεία αφυδάτωση αλκοόλης/ξυλολίου.
Μετά από την ολοκλήρωση ή ματαίωση του *IHC Protocol K - 50 Test, υπάρχει μια υστέρηση 15 λεπτών περίπου, πριν από την εκκίνηση
άλλης εξέτασης από το σύστημα BOND στην ίδια διάταξη χρώσης πλακών.

Ειδικοί Περιορισμοί του Προϊόντος

Αντιμετώπιση Προβλημάτων
Ανατρέξτε στην παραπομπή 4 για τις διορθωτικές ενέργειες.
Επικοινωνήστε με τον πλησιέστερο αντιπρόσωπο ή τα τοπικά γραφεία της Leica Biosystems για να αναφέρετε τυχόν ασυνήθιστη χρώση.

DS9665
Page 22
Πρόσθετες Πληροφορίες
Περαιτέρω πληροφορίες σχετικά με την ανοσοχρώση με αντιδραστήρια BOND για τις ενότητες «Αρχή της διαδικασίας», «Απαιτούμενα
υλικά», «Προετοιμασία δειγμάτων», «Έλεγχος ποιότητας», «Επαλήθευση δοκιμασίας», «Ερμηνεία της χρώσης», «Υπόμνημα συμβόλων
των ετικετών» και «Γενικοί περιορισμοί», δίνονται στην ενότητα «Χρήση αντιδραστηρίων BOND» της τεκμηρίωσης χρήστη για το BOND.

Βιβλιογραφία
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
Το ProClin™ 950 είναι εμπορικό σήμα της Supelco, τμήμα της Sigma-Aldrich Corporation.

Ημερομηνία Έκδοσης
01 Απριλίου 2020

DS9665
Page 23
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Katalognummer.: DS9665

Tilsigtet anvendelse
Dette detektionssystem er beregnet til in vitro-diagnostik.
ChromoPlex 1 Dual Detection er et biotinfrit antistofkonjugatsystem indeholdende polymerisk peberrod-peroxidase (HRP)-linker og
polymerisk basisk fosfatase (AP)-linker til detektion af vævsbundne primære IgG-antistoffer fra mus og kaniner. Det er beregnet til
farvning af sektioner af formalinfikseret paraffinindlejret væv på det automatiserede BOND-system (bestående af Leica BONDMAX-
systemet og Leica BOND-III-systemet).
Klinisk fortolkning af tilstedeværelse eller fravær af farvning skal komplementeres med morfologiske undersøgelser. Passende kontroller
skal evalueres i sammenhæng med patientens kliniske historie og andre diagnostiske test af en uddannet patolog.
ChromoPlex 1 Dual Detection skal anvendes ifølge bedste laboratoriepraksis for brug af vævskontroller. Som en sikkerhed skal
laboratorierne farve alle patientprøver sammen med positive, negative og andre vævspecifikke kontroller efter behov.

Resumé og forklaring
Immunhistokemiske teknikker kan anvendes til at påvise tilstedeværelse af antigener i væv og celler (se “Anvendelse af BOND-
reagenser” i din BOND-brugerdokumentation).
ChromoPlex 1 Dual Detection bruger en helt ny, kontrolleret polymeriseringsteknologi til at fremstille polymeriske antistofkonjugater af
HRP-linker og AP-linker. Detektionssystemet undgår brug af streptavidin og biotin og eliminerer dermed ikke-specifik farvning som følge
af endogent biotin.
ChromoPlex 1 Dual Detection virker på følgende måde:
• Prøven inkuberes med hydrogenperoxid for at undertrykke endogen peroxidaseaktivitet.
• Det tilføres en brugerleveret specifik cocktail af primære antistoffer fra mus og kaniner.
• Poly-HRP IgG-reagens lokaliserer museantistoffer.
• Poly-AP IgG-reagens lokaliserer kaninantistoffer.
• Det første substrat-kromogen, 3,3’-diaminobenizidin-tetrahydrochlorid hydrat (DAB), visualiserer museantistoffer via et brunt bundfald.
• Det andet substrat-kromogen, (Fast Red), visualiserer kaninantistoffer via et rødt bundfald.
• Kontrastfarvning med hæmatoxylin (blå) tillader visualisering af cellekerner.
Anvendelse af ChromoPlex 1 Dual Detection i kombination med det automatiserede BOND-system (bestående af Leica BONDMAX-
systemet og Leica BOND-III-systemet). reducerer muligheden for menneskelige fejl og iboende variabilitet som følge af individuel
reagensfortynding, manuel pipettering og reagenstilsætning.

Leverede reagenser
De medfølgende reagenser rækker til 25 individuelle BOND-farvninger eller et maksimum på 50 præparater.
For at få de maksimale 50 præparater ud af dette detektionssystem skal man samle præparater i batches på 2 eller mere ifølge
præparatfarvningsenheden. Samling i batches på mindre end 2 vil resultere i færre farvede præparater.
1. Peroxide Block (7.5 mL) 3-4 % hydrogenperoxid.
2. Polymer mHRP (7.5 mL) Poly-HRP anti-mus indeholdende 10 % (v/v) dyreserum i Tris-bufret saltvand og 0,1 % ProClin™ 950.
3. Polymer rAP (7.5 mL) Poly-AP anti-kanin indeholdende 10 % (v/v) dyreserum i Tris-bufret saltvand og 0,09 % ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (1 mL) 66 mM 3,3’-diaminobenzidin-tetrahydrochlorid hydrat i en stabilisatoropløsning.
5. DAB Part B (20 mL) ≤0,1 % (v/v) hydrogenperoxid i en stabilisatoropløsning.
6. Red Part A (5.5 mL) Aktivator indeholdende 0,5 % ProClin™ 950.
7. Red Part B (1.0 mL) Substrat.
8. Red Part C (1.0 mL) Substrat.
9. Red Part D (35 mL) Bufferopløsning indeholdende 0,5 % ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9665 (7.5 mL) <0,1 % hæmatoxylin.

Fortynding og blanding
ChromoPlex 1 Dual Detection er optimeret til brug på BOND-systemet (bestående af Leica BONDMAX- systemet og Leica BOND-III-
systemet).
Rekonstitution, blanding, fortynding eller titrering af disse reagenser er ikke nødvendigt.

Nødvendige materialer, der ikke medfølger

Opbevaring og stabilitet
Opbevares ved 2-8 °C Må ikke nedfryses. Må ikke anvendes efter den udløbsdato, der er angivet på etiketten på bakkens håndtag. Skal
sættes på køl igen ved 2-8 °C straks efter brug.
Dette produkt udviser ingen åbenlyse tegn på ustabilitet; der skal derfor køres positive og negative kontroller samtidig med ukendte
prøver (se “Kvalitetskontrol” i afsnittet “Anvendelse af BOND-reagenser” i din BOND-brugerdokumentation).

DS9665
Page 24
Hvis der observeres uventet farvning, der ikke kan forklares ved variationer i laboratorieprocedurer, og der er mistanke om et problem
ved detektionssystemet, skal du straks kontakte din lokale distributør eller Leica Biosystems’ regionskontor.
Andre opbevaringsbetingelser end de ovenfor angivne skal verificeres af brugeren1.

Forholdsregler
• ADVARSEL - visse monteringsmedier kan få det røde kromogen til at krystallisere eller falme.
• MÅ IKKE ANVENDES DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® quick-hardening mounting medium, Surgipath MM 24®, Surgipath
Sub-X® og Pertex monteringsmedierne da de ikke egner sig til brug med dette produkt.
• Der er ikke observeret falmning eller krystallisering med: Leica CV Ultra Mounting Media (Kat 14070937891), Poly-Mount®
(Polysciences Inc. Kat 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories Kat H-5000) og Limonene Mount (Electron Microscopy Sciences
Kat 17987-01).
• Andre monteringsmediers kompatibilitet skal valideres fuldt ud af brugeren, inden de anvendes. Gøres dette ikke, kan det medføre
nedsat farvning på grund af falmning eller krystallisering.
• Aktivatoren og substratopløsningerne kan forårsage irritation af huden, øjnene, slimhinderne og de øvre luftveje. Anvend
engangshandsker af nitril ved håndtering af reagenser. Bortskaffes i henhold til lokale bestemmelser.
• En kopi af sikkerhedsdatabladet kan rekvireres hos den lokale distributør eller Leica Biosystems’ regionskontor. Som alternativ kan
man besøge Leica Biosystems’ hjemmeside, www.LeicaBiosystems.com
• Prøver og alle materialer, der har været i kontakt med dem, skal før og efter fiksering håndteres, som om de er i stand til at overføre
infektioner, og bortskaffes under brug af passende forholdsregler3. Reagenser må aldrig mundpipetteres, og eksponering af hud
og slimhinder for reagenser og prøver skal undgås. Hvis reagenser eller prøver kommer i kontakt med følsomme områder, skal der
vaskes med rigelige mængder vand. Søg lægehjælp.
• Se de statslige eller lokale bestemmelser for bortskaffelse af potentielt giftige komponenter.
• Mikrobiel kontaminering af reagenser skal minimeres, da der ellers kan forekomme ikke-specifik farvning.
• Andre inkubationstider eller temperaturer end de angivne kan give forkerte resultater. Enhver ændring af denne art skal valideres af
brugeren1.
• Reagenser fra forskellige detektionssystemer må ikke blandes.

Brugsanvisning
ChromoPlex 1 Dual Detection er blevet udviklet til brug på det automatiserede BOND-system (bestående af Leica BOND MAX- systemet
og Leica BOND-III-systemet) ved brug af *IHC Protocol K - 50 Test. Leica Biosystems har optimeret betjeningsparametrene for
anvendelse af detektionssystemets reagenser på BOND-procesmodulet. Dem kan man få vist ved at følge anvisningerne i BOND-
brugerdokumentationen.
Anvend hurtig alkohol/xylen-dehydrering.
Efter gennemførelse eller afbrydelse af *IHC Protocol K - 50 Test går der ca. 15 minutter, før BOND-systemet vil påbegynde en ny kørsel
på samme præparatfarvningsenhed.

Produktspecifikke begrænsninger
ChromoPlex 1 Dual Detection er blevet optimeret hos Leica Biosystems til brug med BOND hjælpereagenser. Laboratorierne kan
bruge deres egne primære antistof-cocktails, forudsat at de er blevet fortyndet til en passende koncentration med BOND Primary
Antibody Diluent (Katalognr. AR9352). Brugere, der afviger fra anbefalede testprocedurer, må påtage sig ansvaret for fortolkning af
patientresultaterne under disse omstændigheder.
Hvilken koncentration af brugerens egne primære antistoffer der er passende kan variere på grund af variationer i vævsfiksering
og antigen-øgningens effektivitet og skal bestemmes empirisk. Der skal anvendes negative kontroller ved optimering af
genfindingsbetingelser og koncentrationer af primære antistoffer.
Klinisk fortolkning af tilstedeværelse eller fravær af farvning skal komplementeres med morfologiske undersøgelser og korrekte
kontroller. Disse skal evalueres i sammenhæng med patientens kliniske historie og andre diagnostiske test af en uddannet patolog.
Visse monteringsmedier er ikke kompatible med ChromoPlex 1 Dual Detection (se Forholdsregler).
Yderligere oplysninger kan fås ved henvendelse til den lokale distributør eller Leica Biosystems’ regionskontor.

Fejlfinding
Se reference 4 for afhjælpning.
Usædvanlig farvning skal indberettes til den lokale distributør eller Leica Biosystems’ regionskontor.

Yderligere oplysninger
Yderligere oplysninger om immunfarvning med BOND-reagenser kan findes under overskrifterne Princippet i proceduren, Nødvendige
materialer, Prøveforberedelse, Kvalitetskontrol, Verificering af assays, Fortolkning af farvningen, Symbolforklaring og Generelle
begrænsninger i “Anvendelse af BOND-reagenser” i din BOND-brugerdokumentation.

Bibliografi
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950 er et varemærke tilhørende Supelco, en del af Sigma-Aldrich Corporation.

Datum van uitgifte

Samenvatting en uitleg
Immunohistochemische technieken kunnen gebruikt worden ten behoeve van het aantonen van de aanwezigheid van antigenen in
weefsel en cellen (zie: “BOND reagentia gebruiken” in uw BOND gebruikshandleiding).
ChromoPlex 1 Dual Detection maakt gebruik van een nieuw gecontroleerde polymerisatietechnologie om polymerische HRP-verbinder
en AP-verbinder antilichaam conjugaat te maken. Het detectiesysteem vermijdt het gebruik van streptavidine en biotine, en elimineert
daarom niet specifiek aankleuren als resultaat van endogene biotine.
ChromoPlex 1 Dual Detection werkt als volgt:
• Het monster is geïncubeerd met hydrogene peroxide om de endogene peroxidase activiteit te dempen.
• Een door een gebruiker geleverde specifieke primaire muis en konijn antilichaamcocktail wordt toegepast.
• Poly-HRP IgG reagens lokaliseert muis-antilichamen.
• Poly-rAP IgG reagens lokaliseert konijn-antilichamen.
• Het eerste substraat chromogeen, 3,3’-diaminobenizidine tetrahydrochloride hydrateren (DAB), visualiseert muis-antilichamen via
een bruine neerslag.
• Het tweede substraat chromogeen, (Fast Red), visualiseert konijn-antilichamen via een rode neerslag.
• Hematoxyline (blue) tegenkleuring ondersteunt de visualisatie van celkernen.
Door gebruik te maken van ChromoPlex 1 Dual Detection in combinatie met het BOND (waaronder het Leica BOND-MAX-systeem
en het Leica BOND-III-systeem). geautomatiseerde systeem daalt de mogelijkheid van een menselijke fout en inherente variabiliteit
resulterend uit individuele reagens verdunning, handmatig pipetteren en reagens toepassing.

Geleverde reagentia
De geleverde reagentia zijn afdoende voor 25 individuele BOND aankleuringen, of een maximum aan 50 objectglaasjes.
Voor een maximum van 50 objectglaasjes uit dit detectiesysteem, moeten de objectglaasjes in batches van 2 of groter gemaakt worden,
per set van objectglaasjes met aankleuring. Batches maken van 2 of minder zal resulteren in minder aangekleurde objectglaasjes.
1. Peroxide Block (7.5 mL) 3-4% hydrogene peroxide.
2. Polymer mHRP (7.5 mL) poly-HRP anti-muis bevat 10% (v/v) dierserum in tris gebufferde saline en 0,1% ProClin™ 950.
3. Polymer rAP (7.5 mL) poly-AP anti-konijn bevat 10% (v/v) dierserum in tris gebufferde saline en 0,09% ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (1 mL) 66 mM 3,3’-diaminobenzidine tetrahydrochloride hydrateren in een stabilisator oplossing.
5. DAB Part B (20 mL) ≤0.1% (v/v) hydrogene peroxide in een stabilisator oplossing.
6. Red Part A (5.5 mL) activator bevat 0,5% ProClin™ 950.
7. Red Part B (1.0 mL) Substraat.
8. Red Part C (1.0 mL) Substraat.
9. Red Part D (35 mL) buffer oplossing bevat 0,5% ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9665 (7.5 mL) <0,1% Hematoxyline.

Verdunning en mixen
ChromoPlex 1 Dual Detection is geoptimaliseerd voor gebruik op het BOND systeem (waaronder het Leica BOND-MAX-systeem en het
Leica BOND-III-systeem).
Bereiding, mixen, verdunning of titratie van deze reagentia is niet vereist.

Vereiste maar niet geleverde materialen

Opslag en stabiliteit
Opslaan tussen 2–8 °C. Niet invriezen. Niet gebruiken na de houdbaarheidsdatum aangegeven op de label. Direct weer op temperatuur
2–8 °C brengen na gebruik.

DS9665
Page 26
Er zijn geen duidelijke signalen die de instabiliteit van dit product aangeven; om die reden moeten er positieve en negatieve controles
tegelijkertijd gedaan worden met onbekende monsters (raadpleeg de “kwaliteitscontrole” in de sectie “BOND reagentia gebruiken” van
uw BOND gebruikershandleiding).
Als er onverwachte aankleuring wordt aangetroffen die niet kan worden uitgelegd door variaties in laboratoriumprocedures, en er een
probleem met het detectiesysteem wordt vermoed, neem dan a.u.b. onmiddellijk contact op uw lokale distributeur of het regionale
kantoor van Leica Biosystems.
Andere opslagcondities dan zoals die hierboven zijn gespecificeerd, moeten door de gebruiker1 worden geverifieerd.

Voorschriften
• WAARSCHUWING – sommige insluitmiddelen kunnen ervoor zorgen dat het rode chromogeen gaat kristalliseren of vervagen.
• NIET GEBRUIKEN: DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® quick-hardening mounting medium, Surgipath MM 24®, Surgipath
Sub-X® en Pertex insluitmiddelen omdat ze niet geschikt zijn voor gebruik met dit product.
• Vervagen of kristalliseren is niet waargenomen bij: Leica CV Ultra Mounting Media (Cat 14070937891), Poly-Mount® (Polysciences
Inc. Cat 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories Cat H-5000) en Limonene Mount (Electron Microscopy Sciences Cat 17987-01).
• De compatibiliteit van andere insluitmiddelen moet volledig gevalideerd worden door de gebruiker voorafgaand aan het gebruik
ervan. Bij negeren van deze waarschuwing kan dit resulteren in een vermindering van de kleuring als gevolg van de vervaging of de
kristallisatie.
• De activator en de substraatoplossingen kunnen irritatie aan de huid, ogen, slijmvliezen en de hogere luchtwegen veroorzaken.
Draag nitril wegwerphandschoenen bij het werken met reagentia. Afvoeren volgens de lokale voorschriften.
• Neem a.u.b. contact op met uw lokale distributeur of regionale kantoor van Leica Biosystems voor een exemplaar van het
Veiligheidsinformatieblad (Material Safety Data Sheet). Of u kunt de website van Leica Biosystems, www.LeicaBiosystems.com
raadplegen.
• Monsters, voor en na fixatie, en alle materialen die er aan zijn blootgesteld, dienen te worden behandeld alsof ze de infectie zouden
kunnen overgeven en moeten verwijderd worden met alle mogelijke voorzorgsmaatregelen3. Pipetteer nooit reagentia met de
mond en vermijd contact met de huid en slijmvliezen met reagentia of monsters. Als er reagentia of monsters in contact komen met
gevoeliger gebieden, was dan met veel water. Zoek medische hulp.
• Maak gebruik van federale, provinciale of lokale regelgeving voor de afvoer van mogelijke giftige componenten.
• Minimaliseer bacteriële besmetting van de reagentia of een verhoging van niet-specifieke kleuring kan optreden.
• Incubatietijden of temperaturen anders dan die gespecificeerd kunnen foutieve resultaten genereren. Elke verandering moet
gevalideerd worden door de gebruiker1.
• Meng geen reagentia van andere detectiesystemen.

Instructies voor gebruik

Productspecifieke beperkingen
ChromoPlex 1 Dual Detection is geoptimaliseerd bij Leica Biosystems voor gebruik met BOND hulpreagentia. Laboratoria mogen eigen
primaire antilichaam-cocktails gebruiken, voor zover ze zijn verdund naar de juiste concentratie met BOND Primary Antibody Diluent
(catalogus nr. AR9352). Gebruikers die afwijken van de aanbevolen testprocedures moeten de verantwoordelijkheid accepteren voor
interpretatie van patiëntresultaten in deze situatie.
De juiste concentratie van de eigen primaire antilichamen van de gebruiker kan afwijken volgens een afwijking in weefselfixatie en de
effectiviteit van antigeenversterking, en moet empirisch worden vastgesteld. Negatieve reagens controles moeten gebruikt worden bij het
optimaliseren van terughaalcondities en primaire antilichaamconcentraties.
De klinische interpretatie van elke aankleuring of de afwezigheid daarvan moet aangevuld worden door morfologische studies en de
juiste controles. Ze moeten binnen de context van de klinische achtergrond van de patiënt en andere diagnostische tests door een
gekwalificeerde patholoog geëvalueerd worden.
Sommige insluitmiddelen zijn niet compatibel met ChromoPlex 1 Dual Detection (zie de Voorschriften).
Neem contact met uw lokale distributeur of regionale kantoor van Leica Biosystems voor meer informatie.

Probleemoplossing
Raadpleeg referentie 4 voor een oplossing.
Neem contact met uw lokale distributeur of het regionale kantoor van Leica Biosystems om ongewone kleuring te rapporteren.

Meer informatie
Meer informatie over immunokleuring met BOND reagentia, onder de hoofdstukken “Principe van de procedure”, “Vereiste materialen”,
“Monstervoorbereiding”, “Kwaliteitscontrole”,”Testverificatie”, “Interpretatie van kleuring”, “Sleutel voor symbolen op labels” en “Algemene
beperkingen” vindt u in “BOND reagentia gebruiken” in uw BOND gebruikershandleiding.

DS9665
Page 27
Bibliografie
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950 is een handelsmerk van Supelco, een onderdeel van Sigma-Aldrich Corporation.

Datum van uitgifte

DS9665
Page 28
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Catalog No: DS9665
Tiltenkt bruk
Dette deteksjonssystemet er for bruk i in vitro diagnostikk.
ChromoPlex 1 Dual Detection er et biotinfritt antistoff-konjugat-system som inneholder polymerisk pepperrot-peroksidase (HRP)-
bindinger og polymerisk basisk fosfatase (AP)-bindinger til deteksjon av vevsbundne primære IgG-antistoffer fra mus og kaniner. Det
er beregnet til farging av seksjoner av formalinfiksert parafininnstøpt vev på det automatiserte BOND-systemet (herunder Leica BOND-
MAXsystemet og Leica BOND-III-systemet).
Klinisk tolkning av enhver fargedannelse eller fravær av slik fargedannelse bør suppleres med morfologiske studier. Egnede kontroller
må vurderes i sammenheng med pasientens sykehistorie og andre diagnostiske tester av kvalifisert patolog.
ChromoPlex 1 Dual Detection må brukes i samsvar med korrekt laboratoriepraksis for bruk i vevskontroll. Som en ekstra sikkerhet, bør
laboratoriene farge alle pasientprøver sammen med positive, negative og andre vevspesifikke kontroller etter behov.

Sammendrag og forklaring
Immunohistokjemiske teknikker kan brukes til å demonstrere tilstedeværelse av antigener i vev og celler (se “Bruk av BOND-reagenser”
i din BOND-brukerdokumentasjon).
ChromoPlex 1 Dual Detection bruker en helt ny, kontrollert polymeriseringsteknologi til å produsere polymeriske antistoffkonjugater med
HRP-bindinger og AP-bindinger. Deteksjonssystemet unngår bruk av streptavidin og biotin, og eliminerer dermed uspesifikk farging på
grunn av endogent biotin.
ChromoPlex 1 Dual Detection fungerer på følgende måte:
• Prøven inkuberes med hydrogenperoksid for å dempe endogen peroksidaseaktivitet.
• Det tilføres en brukerlevert spesifikk cocktail av primære mus- og kanin-antistoffer.
• Poly-HRP IgG-reagens lokaliserer muse-antistoffer.
• Poly-AP IgG-reagens lokaliserer kanin-antistoffer.
• Det første substrat-kromogenet, 3,3 ‘-diaminobenizidintetrahydroklorid hydrat (DAB), synliggjør muse-antistoffer gjennom et brunt
bunnfall.
• Det andre substrat-kromogenet, (Fast Red), synliggjør kanin-antistoffer gjennom et rødt bunnfall.
• Kontrastfarging med hematoxylin (blå) muliggjør visualisering av cellekjerner.
Bruk av ChromoPlex 1 Dual Detection i kombinasjon med det automatiserte BOND-systemet (herunder Leica BOND-MAX-systemet og
Leica BOND-III-systemet). reduserer muligheten for menneskelige feil og iboende variabilitet på grunn av individuell reagensfortynning,
manuell pipettering og reagenstilsetning.

Medfølgende reagenser
De medfølgende reagensene er nok til 25 individuelle BOND-farginger eller maksimalt 50 preparater.
For å få maksimalt 50 preparater ut av dette deteksjonssystemet, må preparatene prepareres i grupper på 2 eller mer i et
rekkefølgesystem. Farging av preparat grupper på mindre enn 2 vil resultere i færre fargete preparater totalt.
1. Peroxide Block (7.5 mL) 3 - 4 % hydrogenperoksid.
2. Polymer mHRP (7.5 mL) Poly-HRP anti-mus inneholdende 10 % (v/v) dyreserum i Tris-bufret saltvann og 0,1 % ProClin™ 950.
3. Polymer rAP (7.5 mL) Poly-AP anti-kanin inneholdende 10 % (v/v) dyreserum i Tris-bufret saltvann og 0,09 % ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (1 mL) 66 mM 3,3’-diaminobenzidintetrahydroklorid hydrat i en stabilisatorløsning.
5. DAB Part B (20 mL) ≤0,1% (v/v) hydrogenperoksid i en stabilisatorløsning.
6. Red Part A (5.5 mL) Aktivator inneholdende 0,5 % ProClin™ 950.
7. Red Part B (1.0 mL) Substrat.
8. Red Part C (1.0 mL) Substrat.
9. Red Part D (35 mL) Bufferløsning inneholdende 0,5% ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9665 (7.5 mL) <0,1% hematoksylin.

Fortynning og blanding
ChromoPlex 1 Dual Detection er optimalisert for bruk på BOND -systemet (herunder Leica BOND-MAXsystemet og Leica BOND-III-
systemet).
Rekonstituering, blanding, fortynning eller titrering av disse reagensene er ikke nødvendig.

Nødvendige materialer som ikke medfølger

Oppbevaring og stabilitet
Oppbevares ved 2-8 °C. Må ikke fryses. Må ikke brukes etter utløpsdatoen som er angitt på etiketten på brettets håndtak. Må
umiddelbart nedkjøles til 2 – 8 °C etter hver bruk.
Dette produktet viser ingen tydelige tegn til ustabilitet; det skal derfor utføres positive og negative kontroller samtidig med ukjente prøver
(se “Kvalitetskontroll” i avsnittet “Bruk av BOND-reagenser” i BOND-brukerdokumentasjon).
Hvis det observeres uventet farging som ikke kan forklares med variasjoner i laboratorieprosedyrer, og det er mistanke om et problem
ved deteksjonssystemet, kontakt straks din lokale forhandler eller Leica Biosystems’ regionskontor.
Andre oppbevaringsbetingelser enn de som er nevnt ovenfor må verifiseres av brukeren1.
DS9665
Page 29
Forholdsregler
• ADVARSEL - noen monteringsmedier kan få det røde kromogenet til å krystalliseres eller falme.
• MÅ IKKE ANVENDES DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® quick-hardening mounting medium, Surgipath MM 24®, Surgipath
Sub-X® og Pertex Monteringsmediene da de ikke egner seg til bruk med dette produktet.
• Det er ikke observert falming eller krystallisering med: Leica CV Ultra Mounting Media (Kat 14070937891), Poly-Mount®
(Polysciences Inc. Kat 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories Kat H-5000) og Limonene Mount (Electron Microscopy Sciences
Kat 17987-01).
• Kompatibiliteten for andre monteringsmedier må valideres fullstendig av brukeren før bruk. Unnlatelse av dette kan resultere i
redusert farging på grunn av falming eller krystallisering.
• Aktivator og substratløsninger kan forårsake irritasjon på hud, øyne, slimhinner og øvre luftveier. Bruk engangshansker av nitril ved
håndtering av reagenser. Destrueres i henhold til lokale forskrifter.
• En kopi av sikkerhetsdatabladet er tilgjengelig fra din lokale forhandler eller Leica Biosystems’ regionkontor. Alternativt kan man
besøke Leica Biosystems’ nettside, www.LeicaBiosystems.com
• Prøver og alle materialer som har vært i kontakt med dem, både før og etter fiksering, skal håndteres som smittefarlig materiale og
skal destrueres etter gjeldende forholdsregler3. Reagenser må aldri munnpipetteres, og unngå kontakt mellom reagenser/prøver
og hud/slimhinner. Hvis reagenser eller prøver kommer i kontakt med sensitive områder, skal disse områdene vaskes med rikelige
mengder vann. Søk legehjelp.
• Se offentlige eller lokale forskrifter for destruering av potensielt giftige komponenter.
• Mikrobiell kontaminering av reagenser må minimeres for å unngå økning av ikke-spesifikk farging.
• Andre inkubasjonstider eller temperaturer enn de som er spesifiserte kan gi uriktige resultater. Enhver endring av disse må
godkjennes av brukeren1.
• Reagenser fra ulike deteksjonssystemer må ikke blandes.

Bruksanvisning
ChromoPlex 1 Dual Detection har blitt utviklet for bruk på det automatiserte BOND-systemet (herunder Leica BOND-MAXsystemet og
Leica BOND-III-systemet) vedbruk av *IHC Protocol K - 50 Test. Leica Biosystems har optimalisert driftsparametrene for anvendelse av
deteksjonssystemets reagenser på BOND-prosessmodulet. Disse kan sees ved å følge instruksjonene i BOND-brukerdokumentasjon.
Bruk rask alkohol/xylen-dehydrering.
Etter fullførelse eller avbrytelse av *IHC Protocol K - 50 Test tar det ca. 15 minutter før BOND-systemet vil starte en ny runde på samme
preparatfargingsenhet.

Produktspesifikke begrensninger
ChromoPlex 1 Dual Detection har blitt optimalisert hos Leica Biosystems for bruk med BOND tilleggsreagenser. Laboratoriene kan bruke
sine egne primære antistoff-cocktailer, forutsatt at de blir fortynnet til en passende konsentrasjon med BOND Primary Antibody Diluent
(Katalognr. AR9352). Brukere som avviker fra anbefalte testprosedyrer må ta ansvaret for tolkningen av pasientresultater under disse
omstendighetene.
Den mest egnede konsentrasjonen av brukerens egne primære antistoffer kan variere på grunn av variasjoner i vevsfiksering og
antigen-effektivitet og må bestemmes empirisk. Negative reagenskontroller må benyttes ved optimalisering av gjenfinningsbetingelser og
konsentrasjoner av primære antistoffer.
Klinisk tolkning av enhver fargedannelse eller fravær av slik fargedannelse bør suppleres med morfologiske studier og korrekte
kontroller. Disse bør vurderes i sammenheng med pasientens sykehistorie og andre diagnostiske tester av en kvalifisert patolog.
Visse monteringsmedier er ikke kompatible med ChromoPlex 1 Dual Detection (se Forholdsregler).
Ytterligere informasjon kan fås ved å kontakte din lokale forhandler eller Leica Biosystems’ regionkontor.

Problemløsning
Se referanse 4 for bistand.
Uvanlig farging må meldes fra til din lokale forhandler eller Leica Biosystems’ regionkontor.

For mer informasjon

Litteratur
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950 er et varemerke for Supelco, en del av Sigma-Aldrich Corporation.

Utstedelsesdato
01 april 2020

DS9665
Page 30
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Katalog No: DS9665
Kullanım Amacı
Bu saptama sistemi in vitro diagnostik kullanım içindir.
ChromoPlex 1 Dual Detection, dokuya-bağlı fare ve tavşan IgG primer antikorlarının saptanmasına yönelik biyotin içermeyen, polimerik
horseradish (bayır turpu) peroksidaz (HRP) bağlayıcı ve polimerik alkalen fosfataz (AP) bağlayıcı bir antikor konjugat sistemidir. BOND
otomatik sisteminde (Leica BOND-MAX sistemi ve Leica BOND-III sistemini kapsar) formalinle sabitlenmiş, parafine gömülü doku
kesitlerini boyamak üzere tasarlanmıştır.
Herhangi bir boyanmanın veya boyanma olmamasının klinik yorumu morfolojik çalışmalarla desteklenmelidir. Uygun kontroller, Hastanın
klinik öyküsü ve diğer tanısal testler kapsamında uzman bir patolog tarafından değerlendirilmelidir.
Doku kontrollerinin kullanılmasında, ChromoPlex 1 Dual Detection iyi laboratuvar uygulaması (laboratory best practice) ile birlikte
kullanılmalıdır. Emin olmak için, laboratuvarlar her hasta örneğini pozitif, negatif ve gerektiği gibi diğer dokuya özgü kontrollerle
boyamalıdır.

Özet ve Açıklama
Doku ve hücrelerde antijenlerin varlığını göstermek amacıyla immünhistokimyasal teknikler kullanılabilir (BOND kullanıcı belgelerinizde,
“BOND Reaktiflerinin Kullanılması” bölümüne bakın).
ChromoPlex 1 Dual Detection polimerik HRP-bağlayıcı ve AP-bağlayıcı antikor konjugatlarını hazırlamak için yeni bir kontrollü
polimerizasyon teknolojisi kullanmaktadır. Saptama sistemi streptavidin ve biotin kullanımından kaçınır ve böylelikle, endojen biotin
kaynaklı non-spesifik boyanmayı ortadan kaldırır.
ChromoPlex 1 Dual Detection aşağıdaki şekilde çalışır:
• Numune, endojen peroksidaz aktivitesini gidermek için hidrojen peroksit ile inkübe edilir.
• Kullanıcı tarafından temin edilen spesifik primer fare ve tavşan antikoru kokteyli uygulanır.
• Poli-HRP IgG reaktifi fare antikorlarının yerini belirler.
• Poli-HRP IgG reaktifi tavşan antikorlarının yerini belirler.
• İlk substrat kromojen, 3,3’-Diaminobenizidin tetrahidroklorür hidrat (DAB), fare antikorlarının kahverengi bir presipitat olarak
görülmesini sağlar.
• İkinci substrat kromojen (Fast Red), tavşan antikorlarının kırmızı bir presipitat olarak görülmesini sağlar.
• Hematoksilen (mavi) ile karşıt boyama hücre çekirdeklerinin görülmesine olanak sağlar.
ChromoPlex 1 Dual Detection ile BOND otomatik sisteminin (Leica BOND-MAX sistemi ve Leica BOND-III sistemini kapsar) birlikte
kullanılması, münferit reaktif dilüsyonu, manuel pipetleme ve reaktif uygulamasından kaynaklanan insan hatası olasılığını ve doğal
değişkenliği azaltır.

Verilen Reaktifler
Verilen reaktifler 25 ayrı BOND boyama serisi veya maksimum 50 slayt için yeterlidir.
Bu saptama sisteminde maksimum 50 slayda erişmek için slaytlar, Slayt Boyama Düzeneğine göre, 2’li veya daha fazla miktarlar halinde
gruplanmalıdır. 2’den daha az sayıda slayt gruplamak daha az boyanmış slayt elde etmeye sebep olur.
1. Peroxide Block (7.5 mL) % 3 - 4 Hidrojen peroksit.
2. Tris-tamponlu salin içerisinde %10 (v/v) hayvan serumu içeren Polymer mHRP (7.5 mL) Poli-HRP anti-fare ve %0.1 ProClin™ 950.
3. Tris-tamponlu salin içerisinde %10 (v/v) hayvan serumu içeren Polymer rAP (7.5 mL) Poli-AP anti-tavşan ve %0.09 ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (1 mL) 66 mM 3,3’-Stabilizör bir solüsyon içerisinde diaminobenzidin tetrahidroklorür hidrat.
5. DAB Part B (20 mL) ≤%0,1 (v/v) Stabilizör bir solüsyon içerisinde hidrojen peroksit.
6. Red Part A (5.5 mL) %0.5 ProClin™ 950 içeren aktivatör.
7. Red Part B (1.0 mL) Substrat.
8. Red Part C (1.0 mL) Substrat.
9. Red Part D (35 mL) %0.5 ProClin™ 950 içeren tampon solüsyon.
10. Hematoxylin DS9665 (7.5 mL) < %0.1 Hematoksilen.

Dilüsyon ve Karıştırma
ChromoPlex 1 Dual Detection BOND sisteminde(Leica BOND-MAX sistemi ve Leica BOND-III sistemini kapsar) kullanılmak üzere
optimize edilmiştir.
Bu reaktiflerin yeniden hazırlanması, karıştırılması, dilüsyonu veya titrasyonu gerekmez.

Gereken Fakat Verilmeyen Materyaller

Saklama ve Stabilite
2–8 °C sıcaklıkta saklayın. Dondurmayın. Tepsi tutacağının etiketinde belirtilen son kullanma tarihinden sonra kullanmayın. Kullandıktan
hemen sonra 2–8 °C sıcaklık ortamına geri döndürün.
Bu ürünün instabilitesini gösterecek herhangi bir belirgin işaret yoktur; bu nedenle bilinmeyen numunelerde pozitif ve negatif kontroller eş
zamanlı olarak yürütülmelidir (BOND kullanıcı belgelerinizdeki “BOND Reaktiflerinin Kullanılması”, «Kalite Kontrol» kısmına bakın).

DS9665
Page 31
Laboratuvar prosedürlerindeki varyasyonlarla açıklanamayan beklenmedik bir boyanma gözlenirse ve saptama sisteminde bir sorundan
şüphelenilirse, yerel distribütörünüzle veya Leica Biosystems bölge ofisiyle hemen irtibat kurun.
Yukarıda belirtilenlerin dışındaki saklama koşulları, kullanıcı1 tarafından doğrulanmalıdır.

Önlemler
• UYARI - bazı kapama maddeleri kırmızı kromojenin kristalize olmasına veya solmasına sebep olabilir.
• Bu ürünle birlikte kullanıma uygun olmadıkları için DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® çabuk sertleşen kapama maddesi,
Surgipath MM 24®, Surgipath Sub-X® ve Pertex kapama maddelerini KULLANMAYIN.
• Solma veya kristalizasyon aşağıdakilerle birlikte gözlenmemiştir: Leica CV Ultra Mounting Media (Cat 14070937891), Poly-Mount®
(Polysciences Inc. Cat 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories Cat H-5000) ve Limonene Mount (Electron Microscopy Sciences
Cat 17987-01).
• Diğer kapama maddelerinin uyumluluğu, kullanımdan önce kullanıcı tarafından tamamen doğrulanmalıdır. Bunun yapılmaması, solma
veya kristalizasyona bağlı olarak boyanmada azalma ile sonuçlanabilir.
• Aktivatör ve substrat solüsyonları cilt, gözler, müköz membranlar ve üst solunum yolunda irritasyona sebep olabilir. Reaktifleri
kullanırken tek kullanımlık nitril eldivenler giyin. Yerel düzenlemelere göre bertaraf edin.
• Malzeme Güvenlik Veri Formunun bir kopyasını almak için, yerel distribütörünüz veya Leico Biosystems bölge ofisiyle irtibat kurun.
Alternatif olarak, Leica Biosystems’in Web sitesini ziyaret edin: www.LeicaBiosystems.com
• Fiksasyondan önce ve sonra numunelere ve bunlara maruz kalan tüm materyallere enfeksiyon bulaştırabilirmiş gibi muamele edilmeli
ve uygun önlemlerle3 bertaraf edilmelidir. Reaktifleri asla ağzınıza pipetle çekmeyin ve reaktiflerin veya numunelerin cilt ve müköz
membranla temasından kaçının. Eğer reaktifler veya numuneler hassas alanlarla temas ederse, bol miktarda su ile yıkayın. Tıbbi
yardım arayın.
• Potansiyel olarak toksik herhangi bir bileşenin bertaraf edilmesi için Federal, Devlet veya yerel düzenlemelere başvurun.
• Reaktiflerin mikrobiyal kontaminasyonunu minimuma indirin, aksi takdirde non-spesifik boyanmada bir artış görülebilir.
• Belirtilenden farklı inkübasyon süreleri veya sıcaklıkları hatalı sonuçlar verebilir. Bu gibi herhangi bir değişiklik kullanıcı tarafından
doğrulanmalıdır1.
• Farklı saptama sistemlerinin reaktiflerini karıştırmayın.

Kullanım Talimatları
ChromoPlex 1 Dual Detection, *IHC Protokol K - 50 Test kullanılarak, BOND otomatik sisteminde (Leica BOND-MAX sistemi ve
Leica BOND-III sistemini kapsar) kullanılmak amacıyla geliştirilmiştir. BOND işleme modülü üzerinde saptama sistemi reaktiflerinin
uygulanmasına yönelik çalışma parametreleri, Leica Biosystems tarafından optimize edilmiştir. Bunlar, BOND kullanıcı belgenizdeki
talimatlara uyarak görüntülenebilir.
Hızlı alkol/ksilen dehidrasyonu kullanın.
*IHC Protokol K - 50 Test’nin tamamlanması veya sonlandırılmasının ardından, BOND sistemi aynı Slayt Boyama Düzeneğinde başka
bir işlem başlatmadan önce yaklaşık 15 dakikalık bir gecikme mevcuttur.

Ürüne Özgü Sınırlamalar

Sorun Giderme
Düzeltici işlemler için referans 4’e başvurun.
Olağan dışı boyanmayı bildirmek için yerel distribütörünüz veya Leico Biosystems bölge ofisiyle irtibat kurun.

İlave Bilgiler
BOND reaktifleri ile immün boyama hakkında daha fazla bilgi, BOND kullanıcı belgelerinizde, “BOND Reaktiflerinin Kullanması”
bölümünde Prosedürün Prensibi, Gereken Materyaller, Numune Hazırlama, Kalite Kontrol, Deney Doğrulama, Boyamanın
Yorumlanması, Etiketler Üzerindeki Sembollerin Anahtarı ve Genel Sınırlamalar başlıkları altında bulunabilir.

Kaynakça
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950, Sigma-Aldrich Şirketinin bir parçası olan Supelco’nun bir ticari markasıdır.

Yayım Tarihi
01 Nisan 2020
DS9665
Page 32
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Каталожен №: DS9665
Предназначение
Тази система за откриване е за употреба при in vitro диагностика.
ChromoPlex 1 Dual Detection е конюгираща система за антитела без биотин, с линкер полимерна хрянова пероксидаза (HRP)
и линкер полимерна алкална фосфатаза (AP) за откриване на свързани с тъканите първични IgG миши и заешки антитела. Тя
е предназначена за оцветяване на срези от фиксирани във формалин, вградени в парафин тъкани с автоматизираната система
BOND (включва системата Leica BOND-MAX и системата Leica BOND-III).
Клиничната интерпретация на всяко оцветяване или на неговата липса трябва да бъде допълнена от морфологични
изследвания. Подходящите контроли трябва да бъдат оценени от квалифициран патолог в контекста на клиничната история
на пациента и на други диагностични изследвания.
Системата ChromoPlex 1 Dual Detection трябва да се използва при спазване на най-добрите лабораторни практики в
използването на тъканни контроли. За допълнителни гаранции лабораториите трябва да оцветят всяка проба на пациент,
заедно с позитивни, негативни и други специфични тъканни контроли, според необходимостта.

Описателна и разяснителна
Могат да бъдат използвани имунохистохимични техники за демонстриране на наличието на антигени в тъканта и клетките
(вж. „Употреба на реактиви BOND“ във Вашата документация за потребителя на BOND).
Системата ChromoPlex 1 Dual Detection използва новаторска технология за контролирана полимеризация за подготвяне на
свързваща полимерна HRP система и свързваща AP система за антитела. Системата за откриване избягва използването на
стрептавидин и биотин и така елиминира неспецифичното оцветяване като резултат на ендогенния биотин.
Системата ChromoPlex 1 Dual Detection работи както следва:
• Спесименът се инкубира с водороден пероксид, за да се потисне активността на ендогенната пероксидаза.
• Прилага се осигурен от потребителя коктейл от специфични първични миши и заешки антитела.
• IgG реактивът Poly-HRP локализира мишите антитела.
• IgG реактив Poly-AP локализира заешките антитела.
• Първият субстратен хромоген, 3,3’-диаминобензидин тетрахидрохлорид хидрат (DAB), визуализира мишите антитела чрез
кафява утайка.
• Вторият субстратен хромоген (Fast Red) визуализира заешките антитела чрез червена утайка.
• Hematoxylin (синьо) контраоцветяване позволява визуализация на клетъчните ядра.
Употребата на ChromoPlex 1 Dual Detection заедно с автоматизираната система BOND (включва системата Leica BOND-MAX
и системата Leica BOND-III) намалява възможността от човешка грешка и присъщата изменчивост в резултат на отделно
разреждане на реактиви, ръчно пипетиране и прилагане на реактиви.

Предоставени реактиви
Предоставените реактиви са достатъчни за 25 отделни оцветявания с BOND или за максимум от 50 предметни стъкла.
За да достигнете максимум 50 предметни стъкла с тази система за откриване, предметните стъкла трябва да бъдат
обработвани в количества от по 2 или повече стъкла, за група оцветени предметни стъкла. Обработката в количества по-малки
от 2 ще доведе до по-малко оцветени предметни стъкла.
1. Peroxide Block (7,5 mL) водороден пероксид 3 – 4%.
2. Polymer mHRP (7,5 mL) поли-HRP анти-миши, съдържащ 10% (v/v) животински серум в трометамин-буфериран физиологичен
разтвор и 0,1% ProClin™ 950.
3. Polymer rAP (7,5 mL) Poly-AP анти-заешки, съдържащ 10% (v/v) животински серум в трометамин-буфериран физиологичен
разтвор и 0,09% ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (1 mL) 66 mM 3,3’-диамонобензидин тетрахидрохлорид хидрат в стабилизиращ разтвор.
5. DAB Part B (20 mL) ≤0,1% (v/v) водороден пероксид в стабилизиращ разтвор.
6. Активатор Red Part A (5,5 mL), съдържащ 0,5% ProClin™ 950.
7. Субстрат Red Part B (1,0 mL).
8. Субстрат Red Part C (1,0 mL).
9. Буферен разтвор Red Part D (35 mL), съдържащ 0,5% ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9665 (7,5 mL) <0.1% Hematoxylin.

Разреждане и смесване
ChromoPlex 1 Dual Detection е оптимизирана за употреба със системата BOND (включва системите Leica BOND-MAX и Leica
BOND-III).
Не се изисква възстановяване, смесване, разреждане или титриране на тези реактиви.

Необходими, но непредоставени материали

DS9665
Page 33
Съхранение и стабилност
Да се съхранява при температура 2 – 8 °C. Да не се замразява. Да не се използва след срока на годност, отбелязан върху
етикета на дръжката на таблата. Да се върне на температура 2 – 8 °C веднага след употреба.
Не са налице очевидни признаци, указващи нестабилност на този продукт, ето защо позитивните и негативните контроли трябва
да бъдат обработвани едновременно с неизвестните спесимени (вижте „Контрол на качеството“ в раздел „Употреба на реактиви
BOND“ от Вашата документация за потребителя за BOND).
Ако се наблюдава неочаквано оцветяване, което не може да бъде обяснено с промяна в лабораторните процедури, и ако
е налице подозрение за проблем със системата за откриване, свържете се незабавно с Вашия местен дистрибутор или с
регионалния офис на Leica Biosystems.
Другите условия на съхранение, освен посочените по-горе, трябва да бъдат проверени от потребителя1.

Предпазни мерки
• ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ – някои микроскопски препарати могат да причинят кристализиране или избледняване на червения
хромоген.
• НЕ ИЗПОЛЗВАЙТЕ DPX, Entellan®, Leica CV Mount, бързо втвърдяващ се микроскопски препарат Eukitt®, Surgipath MM 24®,
Surgipath Sub-X® и микроскопски препарати Pertex, тъй като те не са подходящи за употреба с този продукт.
• Избледняване или кристализация не са наблюдавани с: Leica CV Ultra Mounting Media (каталожен № 14070937891), Poly-
Mount® (Polysciences Inc., каталожен № 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories, каталожен № H-5000) и Limonene Mount
(Electron Microscopy Sciences, каталожен № 17987-01).
• Съвместимостта на други микроскопски препарати трябва да бъде цялостно проверена от потребителя преди употреба.
Неспазването на това може да доведе до намаляване на оцветяването поради избледняване или кристализация.
• Активиращият и субстратният разтвори могат да причинят раздразнение на кожата, очите, лигавиците и горните дихателни
пътища. При работа с реактивите носете нитрилови ръкавици за еднократна употреба. Изхвърлете в съответствие с
местните регламенти.
• За да получите копие на информационния лист за безопасност на материалите, свържете се с Вашия местен дистрибутор
или регионален офис на Leica Biosystems. Алтернативно можете посетите уебсайта на Leica Biosystems, www.
LeicaBiosystems.com
• Спесимените преди и след фиксация, както и всички материали, изложени на тяхното влияние, трябва да бъдат третирани
като способни да предадат инфекция и да бъдат изхвърлени, прилагайки съответните предпазни мерки3. Никога не
пипетирайте реактиви с уста и избягвайте контакт на кожата и лигавиците с реактиви или спесимени. В случай че реактиви
или спесимени влязат в контакт с чувствителни участъци, промийте с обилно количество вода. Потърсете медицинска помощ.
• Консултирайте се с федералните, държавните или местните регламенти относно изхвърлянето на потенциално токсични
компоненти.
• Свеждайте до минимум микробната контаминация на реактивите, иначе може да се появи увеличаване на неспецифичното
оцветяване.
• Инкубационни времена или температури, различни от посочените, могат да доведат до грешни резултати. Такива промени
трябва да бъдат валидирани от потребителя1.
• Не смесвайте реактиви от различни системи за откриване.

Инструкции за употреба
ChromoPlex 1 Dual Detection е разработена за употреба с автоматизираната система BOND (включва системите Leica BOND‑MAX
и Leica BOND-III), като се използва *IHC Protocol K - 50 Test. Работните параметри за прилагане с реактивите на системата за
откриване на BOND Processing Module са оптимизирани от Leica Biosystems. Те могат да бъдат показани, следвайки указанията
във Вашата документация на потребителя на BOND.
Използвайте бърза алкохолна/ксиленова дехидрация.
След завършване или отмяна на *IHC Protocol K - 50 Test. трябва да изминат прибл. 15 минути, преди системата BOND да
започне нов цикъл по същия комплект за оцветяване на предметни стъкла.

Специфични ограничения на продукта

Отстраняване на неизправности
Разгледайте референция 4 за коригиращи действия.
Свържете се с Вашия местен дистрибутор или регионалния офис на Leica Biosystems, за да съобщите за необичайно оцветяване.

DS9665
Page 34
Допълнителна информация
Допълнителна информация за имунооцветяване с реактиви BOND можете да намерите в „Употреба на реактиви BOND“
във Вашата документация за потребителя на BOND под заглавията „Принцип на процедурата“, „Необходими материали“,
„Приготвяне на спесимен“, „Контрол на качеството“, „Потвърждаване на анализа“, „Интерпретация на оцветяването“,
„Легенда на символите на етикетите“ и „Общи ограничения“.

Библиография
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950 е търговска марка на Supelco, част от Sigma-Aldrich Corporation.

Дата на издаване
01 Април 2020

DS9665
Page 35
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Katalógusszám: DS9665
Alkalmazási terület
Ez a detektáló rendszer in vitro diagnosztikai használatra szolgál.
A ChromoPlex 1 Dual Detection biotinmentes, polimer tormaperoxidázhoz (horseradish peroxidase, HRP) és polimer alkalikus
foszfatázhoz (alkaline phosphatase, AP) kötődő antitest-konjugáló rendszer a szövethez kötött egér és nyúl IgG elsődleges antitestek
kimutatására. Formalinban fixált, paraffinba ágyazott szövet metszeteinek festésére szolgál BOND automata rendszer (így a Leica
BOND-MAX rendszer és a Leica BOND-III rendszer) használatával.
Minden festődés meglétének vagy hiányának klinikai értelmezését morfológiai vizsgálatokkal kell kiegészíteni. A megfelelő kontrollok
kiértékelését a beteg klinikai kórtörténete és egyéb diagnosztikai vizsgálatok figyelembevételével, képzett patológusnak kell elvégeznie.
A ChromoPlex 1 Dual Detection kitet a helyes laboratóriumi gyakorlatnak megfelelően, szövetkontrollokkal kell alkalmazni. A biztonság
kedvéért a laboratóriumok minden betegminta festését pozitív, negatív, illetve szükség szerint más szövetspecikus kontrollokkal
párhuzamosan végezzék el.

Összefoglalás és magyarázat
Az immunhisztokémiai módszerek antigének jelenlétének kimutatására szolgálnak szövetekben és sejtekben (lásd a „BOND reagensek
használata” című részt a BOND felhasználói dokumentációban).
A ChromoPlex 1 Dual Detection új kontrollált polimerizáló technológiát alkalmaz a polimer HRP-kötő és AP-kötő antitest-konjugátumok
előállításához. A detektáló rendszer nem alkalmaz sztreptavidint és biotint, ezáltal kiiktatja az endogén biotin eredményeképp létrejövő
nem specifikus festődést.
A ChromoPlex 1 Dual Detection az alábbi módon működik:
• A rendszer inkubálja a mintát hidrogén-peroxidban az endogén peroxidázaktivitás megszüntetése céljából.
• A felhasználó által biztosított specifikus elsődleges egér és nyúl antitestkoktélt kell alkalmazni a metszeten.
• A Poly-HRP IgG reagens lokalizálja az egér antitesteket.
• A Poly-AP IgG reagens lokalizálja a nyúl antitesteket.
• Az első kromogén szubsztrát, a 3,3’-diaminobenzidin-tetrahidroklorid-hidrát (DAB) barna csapadékként megjeleníti az egér
antitesteket.
• A második kromogén szubsztrát (Fast Red) vörös csapadékként megjeleníti a nyúl antitesteket.
• A hematoxilin (kék) kontrasztfesték lehetővé teszi a sejtmagok megjelenítését.
Ha a ChromoPlex 1 Dual Detection kitet BOND automata rendszerrel együtt használják (így a Leica BOND-MAX rendszerrel vagy
a Leica BOND-III rendszerrel), csökken az emberi hibák lehetősége, és mérsékelhetők az egyes reagensek hígításából, a manuális
pipettázásból és a reagensek alkalmazásából származó eredendő eltérések.

Biztosított reagensek
A biztosított reagensmennyiség 25 önálló BOND megfestési sorozathoz vagy legfeljebb 50 tárgylemezhez elég.
Ahhoz, hogy a detektáló rendszerrel a maximális 50 tárgylemez legyen vizsgálható, a tárgylemezeket tárgylemezfestő készletenként
legalább 2-esével kell csoportosítani. 2-nél kevesebb tárgylemezt tartalmazó sorozatok alkalmazásával kevesebb tárgylemez
megfestése lehetséges.
1. Peroxide Block (7,5 ml) 3–4%-os hidrogén-peroxid.
2. Polymer mHRP (7,5 ml) Poly-HRP egér ellenes, tris-pufferelt sóoldatban 10 térfogatszázalék állati szérumot és 0,1% ProClin™
950‑et tartalmaz.
3. Polymer rAP (7,5 ml) Poly-AP nyúl ellenes, tris-pufferelt sóoldatban 10 térfogatszázalék állati szérumot és 0,09% ProClin
950-et tartalmaz.
4. DAB Part 1 (1 ml) 66 mM 3,3’-diaminobenzidin-tetrahidroklorid-hidrát stabilizáló oldatban.
5. DAB Part B (20 ml) ≤0,1 térfogatszázalékos hidrogén-peroxid stabilizáló oldatban.
6. Red Part A (5,5 ml) aktivátor, 0,5% ProClin™ 950-et tartalmaz.
7. Red Part B (1,0 ml) szubsztrát.
8. Red Part C (1,0 ml) szubsztrát.
9. Red Part D (35 ml) pufferoldat, 0,5% ProClin™ 950-et tartalmaz.
10. Hematoxylin DS9665 (7,5 ml) <0,1% hematoxilin.

Hígítás és elegyítés
A ChromoPlex 1 Dual Detection BOND rendszerrel (így a Leica BOND-MAX rendszerrel és a Leica BOND-III rendszerrel) való
használathoz optimalizált.
Nem szükséges a reagensek feloldása, elegyítése, hígítása vagy titrálása.

Szükséges, de nem biztosított anyagok

DS9665
Page 36
Tárolás és stabilitás
2–8 °C-on tárolandó. Tilos lefagyasztani. Ne használja a terméket a tálca markolatán feltüntetett lejárati dátum után. Felhasználás után
azonnal tegye vissza 2–8 °C közötti hőmérsékletre.
Nincsenek a termék instabilitására utaló egyértelmű jelek, ezért javasolt pozitív és negatív kontrollok ismeretlen mintákkal való
párhuzamos futtatása (lásd a BOND felhasználói dokumentáció „BOND reagensek használata” című részében a „Minőség-ellenőrzés”
című szakaszt).
Amennyiben váratlan és a laboratóriumi eljárások eltéréseivel nem magyarázható festődést észlel, és azt gyanítja, hogy a detektáló
rendszer okozza a problémát, haladéktalanul forduljon a helyi forgalmazóhoz vagy a Leica Biosystems regionális irodájához.
A fentiekben előírtaktól eltérő tárolási feltételeket a felhasználónak ellenőriznie kell1.

Óvintézkedések
• FIGYELEM – egyes fedőanyagok a vörös kromogén kristályosodását vagy halványulását idézhetik elő.
• NE HASZNÁLJON DPX, Entellan® vagy Leica CV Mount fedőanyagot, Eukitt® gyorsan keményedő fedőanyagot, valamint Surgipath
MM 24®, Surgipath Sub-X® és Pertex fedőanyagot, mert ezek nem megfelelőek a termékkel való használatra.
• Nem figyeltek meg halványulást és kristályosodást a következőkkel: Leica CV Ultra Mounting Media (kat.: 14070937891),
Poly‑Mount® (Polysciences Inc., kat.: 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories, kat.: H-5000) és Limonene Mount (Electron
Microscopy Sciences, kat.: 17987-01).
• A többi fedőanyag kompatibilitását a felhasználónak használat előtt maradéktalanul validálnia kell. Ennek elmulasztása a festés
csökkenéséhez vezethet a halványulás vagy kristályosodás következtében.
• Az aktivátor és a szubsztrátoldatok a bőr, a szem, a nyálkahártyák és a felső légutak irritációját okozhatják. A reagensek kezeléséhez
viseljen egyszer használatos nitrilkesztyűt. Az ártalmatlanítást a helyi előírásoknak megfelelően végezze.
• Az anyagbiztonsági adatlap igényléséhez forduljon a Leica Biosystems helyi forgalmazójához vagy regionális irodájához. Másik
lehetőségként keresse fel a Leica Biosystems weboldalát a www.LeicaBiosystems.com címen.
• A mintákat fixálás előtt és után, valamint a velük érintkező összes anyagot fertőzések terjesztésére képes anyagként kell kezelni, és
megfelelő körültekintéssel kell ártalmatlanítani3. Soha ne pipettázza szájjal a reagenseket, továbbá kerülje a bőr és a nyálkahártyák
érintkezését a reagensekkel és a mintákkal. Ha a reagensek vagy minták érzékeny területtel érintkeznek, bő vízzel mossa le az
érintett területet. Forduljon orvoshoz.
• Minden potenciálisan toxikus összetevő ártalmatlanításával kapcsolatban kövesse a szövetségi, állami és helyi előírásokat.
• Minimálisra kell csökkenteni a reagensek mikrobiális szennyeződését, különben megnövekedhet a nem specifikus festődés.
• A megadottaktól eltérő inkubációs idők és hőmérsékletek hibás eredményekhez vezethetnek. A felhasználónak minden ilyen jellegű
változtatást validálnia kell1.
• Ne keverje össze a különböző detektáló rendszerekből származó reagenseket.

Használati útmutató
A ChromoPlex 1 Dual Detection kit BOND automata rendszerrel (így a Leica BOND-MAX rendszerrel vagy a Leica BOND-III rendszerrel)
és az *IHC Protocol K - 50 Test protokollal való együttes használatra lett kifejlesztve. A detektáló rendszerhez tartozó reagensek BOND
Processing Module feldolgozóegységen történő alkalmazásának működési paramétereit a Leica Biosystems optimalizálta. Ezek a BOND
felhasználói dokumentációban található útmutatások követésével jeleníthetők meg.
Alkalmazzon gyors alkoholos/xilolos dehidrálást.
Az *IHC Protocol K - 50 Test befejezését vagy megszakítását követően hozzávetőleg 15 perc szünet következik, mielőtt a BOND
rendszer újabb kezelési ciklust kezd ugyanazzal a tárgylemezfestő készlettel.

Termékspecifikus korlátozások
A ChromoPlex 1 Dual Detection terméket a Leica Biosystems a BOND segédreagensekkel való használatra optimalizálta.
A laboratóriumok használhatják saját elsődleges antitestkoktéljaikat, ha BOND Primary Antibody Diluent (katalógusszám: AR9352)
alkalmazásával megfelelő koncentrációra hígítják őket. A tesztelési eljárásoktól való eltérés esetén a felhasználó felelőssége
a betegeredmények értelmezése az adott körülmények között.
A felhasználó saját elsődleges antitestjeinek megfelelő koncentrációja a szövet fixálásának és az antigén-erősítés hatékonyságának
eltérései miatt változó lehet, ezért tapasztalati alapon történő meghatározást igényel. Negatív reagenskontrollokat kell használni
a feltárási körülmények és az elsődlegesantitest-koncentrációk optimalizálásakor.
Minden festődés meglétének vagy hiányának klinikai értelmezését morfológiai vizsgálatokkal és megfelelő kontrollokkal kell kiegészíteni.
Az értékelést a beteg klinikai kórtörténete és egyéb diagnosztikai vizsgálatok figyelembevételével, képzett patológusnak kell elvégeznie.
Egyes fedőanyagok nem kompatibilisek a ChromoPlex 1 Dual Detection reagensekkel (lásd Óvintézkedések).
További információkért forduljon a Leica Biosystems helyi forgalmazójához vagy regionális irodájához.

Hibaelhárítás
A javító intézkedéseket lásd a 4. hivatkozásban.
Szokatlan festődés bejelentéséhez forduljon a Leica Biosystems helyi forgalmazójához vagy regionális irodájához.

További információk
A BOND reagensekkel végzett immunfestésre vonatkozó további információkat a BOND felhasználói dokumentáció „BOND
reagensek használata” című részében talál a következő szakaszokban: Az eljárás elve, Szükséges anyagok, A minták előkészítése,
Minőség‑ellenőrzés, A teszt ellenőrzése, A festődés értelmezése, A címkéken szereplő szimbólumok magyarázata és Általános
korlátozások.

DS9665
Page 37
Szakirodalom
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
A ProClin™ 950 a Sigma-Aldrich Corporation részét képező Supelco védjegye.

Kiadás dátuma
01 április 2020

DS9665
Page 38
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Nr. catalog: DS9665
Utilizare prevăzută
Acest sistem de detecție este destinat utilizării pentru diagnosticare in vitro.
ChromoPlex1 Dual Detection este un sistem conjugat de anticorpi fără biotină cu legătură de peroxidază din hrean (HRP) polimerică
și legătură de fosfatază alcalină polimerică (AP) pentru detectarea anticorpilor primari IgG de șoarece și iepure legați la țesuturi. Este
destinat colorării secțiunilor de țesut fixat cu formalină și încorporat în parafină cu sistemul automat BOND (include sistemul Leica
BOND-MAX și sistemul Leica BOND-III).
Interpretarea clinică a oricărei colorații sau a absenței acesteia trebuie completată cu studii morfologice. Controalele adecvate trebuie
evaluate în contextul istoricului clinic al pacientului și al altor teste de diagnosticare de către un patolog calificat.
ChromoPlex 1 Dual Detection trebuie utilizat cu bune practici de laborator în utilizarea de țesuturi de control. Pentru asigurare,
laboratoarele trebuie să coloreze fiecare eșantion de la pacient în conjuncție cu țesuturi de control pozitive, negative sau alte controale
specifice, după cum este necesar.

Rezumat și explicație
Pot fi utilizate tehnici imunohistochimice pentru a demonstra prezența antigenilor în țesut și celule (a se vedea „Utilizarea reactivilor
BOND” din documentația de utilizare BOND).
ChromoPlex 1 Dual Detection o tehnologie nouă de polimerizare controlată pentru prepararea conjugatelor de anticorp de legătură HRP
și de legătură AP. Sistemul de detecție evită utilizarea streptavidinei și biotinei, eliminând astfel colorația nespecifică din cauza biotinei
endogene.
ChromoPlex 1 Dual Detection funcționează după cum urmează:
• Specimenul este incubat cu apă oxigenată pentru a stinge activitatea peroxidazei endogene.
• Se aplică un cocktail de anticorpi primari de șoarece și iepure furnizat de utilizator.
• Reactivul IgG Poly-HRP localizează anticorpii de șoarece.
• Reactivul Poly-AP IgG localizează anticorpii de iepure.
• Primul substrat cromogen, tetraclorură hidrată de 3,3’-diaminobenizidină (DAB), vizualizează anticorpii de șoarece printr-un precipitat
cafeniu.
• Al doilea substrat cromogen (Fast Red) vizualizează anticorpii de iepure printr-un precipitat roșu.
• Contracolorația cu Hematoxylin (albastru) permite vizualizarea nucleelor celulelor.
Utilizarea Chromoplex 1 Dual Detection, în combinație cu sistemul automat BOND (care include sistemul Leica BOND-MAX și sistemul
Leica BOND-III), reduce posibilitatea producerii erorii umane și variabilitatea inerentă care rezultă din diluția individuală a reactivului,
pipetarea manuală și aplicarea reactivului.

Reactivi furnizați
Reactivii furnizați sunt suficienți pentru 25 de colorări BOND individuale sau maxim 50 de lamele.
Pentru a realiza un maxim de 50 de lamele de la acest sistem de detecție, lamelele trebuie grupate în loturi cu cantități de 2 sau mai
mari, conform Ansamblului de colorație de Lamele. Loturile cu cantități mai mici de 2 vor produce mai puține lamele colorate.
1. Peroxide Block (7,5 ml) 3-4% apă oxigenată.
2. Polymer mHRP (7,5 ml) Poly-HRP anti-șoarece conținând 10% (v/v) ser animal în soluție salină tamponată cu trometamină și
0,1% ProClin™ 950.
3. Polymer rAP (7,5 ml) Poly-AP anti-iepure conținând 10% (v/v) ser animal în soluție salină tamponată cu trometamină și
0,09% ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (1 ml) 66 mM hidrat de tetraclorură de 3,3’-diaminobenzidină în soluție stabilizatoare.
5. DAB Part B (20 ml) ≤0,1% (v/v) Apă oxigenată în soluție stabilizatoare.
6. Red Part A (5,5 ml) Activator conținând 0,5% ProClin™ 950.
7. Substrat Red Part B (1,0 ml).
8. Substrat Red Part C (1,0 ml).
9. Red Part D (35 ml) Soluție tampon conținând 0,5% ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9665 (7,5 ml) <0,1% Hematoxylin.

Diluare și amestecare
ChromoPlex 1 Dual Detection este optimizată pentru utilizare pe sistemul BOND (care include sistemul Leica BOND-MAX și sistemul
Leica BOND-III).
Reconstituirea, amestecarea, diluarea sau titrarea acestor reactivi nu sunt necesare.

Materiale necesare, dar care nu sunt furnizate

Depozitare și stabilitate
A se depozita la 2–8 °C. A nu se congela. A nu se utiliza după data expirării indicată pe eticheta de pe mânerul tăvii. A se returna la
2–8 °C imediat după utilizare.

DS9665
Page 39
Nu există semne evidente care să indice instabilitatea acestui produs; prin urmare trebuie rulate controale pozitive și negative simultan
cu specimenele necunoscute (consultați „Controlul calității” în secțiunea “Utilizarea reactivilor BOND” din documentația dumneavoastră
de utilizare BOND).
Dacă se observă o colorație neașteptată care nu poate fi explicată prin variații în procedurile de laborator și se suspectează că există
o problemă la sistemul de detecție, contactați imediat distribuitorul local sau biroul regional al Leica Biosystems.
Alte condiții de depozitare decât cele specificate mai sus trebuie verificate de către utilizator1.

Precauții
• AVERTIZARE - unele medii de montare pot face cromogenul roșu să se cristalizeze sau să se decoloreze.
• NU UTILIZAȚI DPX, Entellan®, Leica CV Mount, Eukitt® mediu de montare cu întărire rapidă, Surgipath MM 24®, Surgipath Sub-X®
și mediu de montare Pertex, întrucât acestea nu sunt adecvate pentru utilizare cu acest produs.
• Nu s-a observat decolorație sau cristalizare la: Leica CV Ultra Mounting Media (Cat 14070937891), Poly-Mount® (Polysciences Inc.
Cat 08381), VectaMount™ (Vector Laboratories Cat H-5000) și Limonene Mount (Electron Microscopy Sciences Cat 17987-01).
• Compatibilitatea altor medii de montare trebuie validată pe deplin înainte de utilizare. Nerespectarea acestei reguli poate duce la
reducerea colorării din cauza decolorării sau cristalizării.
• Soluțiile activatoare și de substrat pot cauza iritații ale pielii, ochilor, mucoaselor și căilor respiratorii superioare. Purtați mănuși de
unică folosință de nitril atunci când manipulați reactivii. Eliminați conform reglementărilor locale.
• Pentru a obține o copie a fișei tehnice de securitate a materialului, luați legătura cu distribuitorul dvs. local sau cu biroul regional al
Leica Biosystems Ca alternativă, vizitați site-ul web Leica Biosystems’, www.LeicaBiosystems.com
• Specimenele, înainte și după fixare, precum și toate materialele expuse la acestea, trebuie manipulate ca și când ar avea potențialul
de a transmite infecții și trebuie eliminate luând măsurile de precauție adecvate3. Nu pipetați niciodată reactivii cu gura și evitați
contactul reactivilor și specimenelor cu pielea și membranele mucoase. Dacă reactivii sau probele vin în contact cu suprafețele
sensibile, spălați cu apă din abundență. Solicitați asistență medicală.
• Consultați reglementările naționale, județene sau locale pentru informații privind eliminarea la deșeuri a oricăror componente cu
potențial toxic.
• Reduceți la minimum contaminarea microbiană a reactivilor, în caz contrar poate apărea o creștere a colorării nespecifice.
• Timpii sau temperaturile de incubație care diferă de valorile specificate pot genera rezultate eronate. Orice astfel de modificare
trebuie validată de către utilizator1.
• Nu amestecați reactivi din sisteme de detecție diferite.

Instrucțiuni de utilizare
ChromoPlex 1 Dual Detection a fost dezvoltat pentru utilizare cu sistemul automat BOND (care include sistemul Leica BOND-MAX și
sistemul Leica BOND-III) utilizând *IHC Protocol K - 50 Test. Parametrii de funcționare pentru aplicarea reactivilor sistemului de detecție
la BOND Processing Module au fost optimizați de Leica Biosystems. Aceștia pot fi prezentați urmând instrucțiunile din documentația de
utilizare BOND.
Utilizați deshidratare rapidă cu alcool/xilen.
După finalizarea sau întreruperea *IHC Protocol K - 50 Test, există un decalaj de aproximativ 15 minutee înainte ca sistemul BOND să
înceapă o altă rulare la același Ansamblu de colorație Lamelă.

Restricții specifice produsului

Rezolvarea problemelor
Consultați referința 4 pentru acțiuni de remediere.
Contactați distribuitorul dumneavoastră local sau biroul regional al Leica Biosystems pentru raportarea colorării neobișnuite.

Informații suplimentare
Informații suplimentare referitoare la imunocolorația cu reactivii BOND, sub titlurile Principiul procedurii, Materiale necesare, Pregătirea
specimenului, Controlul calității, Verificarea analizei, Interpretarea colorării, Codul simbolurilor de pe etichete și Limitări generale pot fi
găsite în „Utilizarea reactivilor BOND” din documentația dumneavoastră de utilizare a sistemului BOND.

DS9665
Page 40
Bibliografie
1. Clinical laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. List of substances which may be candidates for further scientific review and possible identification, classification and regulation as
potential occupational carcinogens. Fed Reg 1980; 45:157.
3. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
4. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
ProClin™ 950 este o marcă comercială a Supelco, care face parte din Sigma-Aldrich Corporation.

Data publicării
01 aprilie 2020

DS9665
Page 41
ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND - 50 Test
Номер по каталогу: DS9665
Назначение
Данная система обнаружения предназначена для диагностики in vitro.
Система двойного обнаружения ChromoPlex 1 Dual Detection представляет собой не содержащую биотина систему для
формирования конъюгатов антител, в состав которой входят подвергшиеся полимеризации пероксидаза хрена (HRP)
и щелочная фосфатаза (AP). Система предназначена для обнаружения первичных антител IgG мыши и кролика. Она
предназначена для окрашивания фиксированных формалином и залитых в парафин образцов тканей с использованием
автоматизированной системы BOND (включающей системы BOND-MAX и BOND-III компании Leica).
Клиническая интерпретация любого окрашивания или его отсутствия должна дополняться данными морфологических
исследований. Надлежащие контроли должны оцениваться квалифицированным патогистологом с учетом анамнеза пациента
и результатов других диагностических исследований.
Система двойного обнаружения ChromoPlex 1 Dual Detection должна использоваться в сочетании с передовыми методами
работы лабораторий в отношении применения тканей в качестве контроля. В целях гарантии лаборатории должны окрашивать
каждый образец, взятый у пациента, в сочетании с положительными и отрицательными контролями, а также тканями,
использующимися в качестве специфического контроля, насколько это необходимо.

Краткое изложение и пояснение

Реактивы, входящие в комплект поставки

Разведение и смешивание
Система двойного обнаружения ChromoPlex 1 Dual Detection была оптимизирована для использования на автоматизированной
системе BOND (включая системы Leica BOND-MAX и Leica BOND-III).
Этот реактив не требует восстановления, смешивания, разведения или титрования.

DS9665
Page 42
Необходимые материалы, не входящие в комплект поставки
Среды для заливки препаратов, которые совместимы с системой ChromoPlex 1 Dual Detection (смотрите раздел «Меры
предосторожности»).
Полный список материалов, необходимых для обработки и иммуногистохимического окрашивания образцов с использованием
системы BOND (включающей системы BOND-MAX и BOND-III компании Leica), представлен в разделе «Применение реактивов
BOND» документации пользователя системы BOND.

Хранение и стабильность
Хранить при температуре 2–8 °C. Не замораживать. Не используйте по истечении срока годности, который указан на маркировке
ручки лотка. После использования незамедлительно вернуть на хранение при температуре 2–8 °C.
Не имеется очевидных признаков, которые бы указывали на нестабильность данного продукта, поэтому отрицательные

УИХ-ын чуулганы өнөөдрийн хуралдаанаар “Орхоны хөндийд хот байгуулах тухай” УИХ-ын тогтоолын төслийг хэлэлцэв. Хэлэлцүүлгийн шатанд УИХ-ын гишүүн Х.Баделхан, Ц.Туваан нар Орхон голын хөндий нь нүүдэлчдийн анхны төрт улс болох Хүннү гүрний Луут хот, Уйгурын Хар балгас, Тахай балгас хэмээх нийслэл хотууд сүндэрлэж байсан манай улсын түүх, соёл, төрт ёсны голомт нутаг болохыг тодотгоод Хархорум хотыг бүтээн байгуулахад хэдий хэмжээний мөнгө санхүү шаардлагатай болох, хэдэн хүнтэй суурин байх талаар тодрууллаа. Барилга, хот байгуулалтын яамны Төрийн нарийн бичгийн дарга С.Магнайсүрэн “Орхоны хөндийд хот байгуулахтай холбоотой БХБЯ, БШУЯ хэд хэдэн удаагийн судалгаа хийлгэсэн.

Өнгөрсөн онд манай яам 400 орчим сая төгрөг зарцуулж, хотын байршлын ТЭЗҮ-ийг боловсруулах гэрээг хийгээд ажиллаж байна. Өнөөдрийн байдлаар гурван байршлын санал орж ирээд буй. Нэгдүгээр хувилбар бол Тоглохын талд 40.4 мянган га, хоёрдугаар хувилбар Өгий нуур орчимд 168.6 мянган га, гуравдугаар хувилбар нь Онгоцон хөндийд 41.4 мянган га, нийт 250.5 мянган га газрыг судлаад явж байна.

Шинэ хотын байршил тогтоосон судалгааг 2005 онд хийж, 2006 онд "Энэхүү судалгаа нь хэрэгжих боломжгүй" гэсэн дүгнэлт гарсан. УИХ-аас хот байгуулах шийдвэр гарсан тохиолдолд нэгдүгээрт хот байгуулах ТЭЗҮ-г боловсруулна. Түүний дараа дээр дурдсан байршлуудын аль дээр хэчнээн га газарт хотыг байгуулах вэ гэдэг асуудлаа шийднэ. Ингэхийн тулд уг газрыг улсын тусгай хэрэгцээнд авах асуудлыг Засгийн газрын түвшинд шийдэх зэрэг ажлууд хүлээгдэж байна. ТЭЗҮ гарсны дараа хэдий төгрөгийн санхүүжилт шаардагдах, хэдэн хүн амтай байх гэх зэрэг асуудал илүү тодорхой болно” гэсэн тайлбарыг өгч байв.