0850 222 09 00 Kim

(57) Изобретение относится к конъюгатам биомолекул формулы

ЕD формула I, где А, Е и D являются такими, как определено в описании изобретения, которые содержат биомолекулу, где по меньшей мере одна аминокислота неприродного происхождения (NNAA) является встроенной в структуру биомолекулы и в которой NNAA представляет собой точку присоединения линкера, к которой присоединяется полезная нагрузка, в частности цитотоксическое средство. В частности, изобретение относится к конъюгатам клеточно связывающих средств и продуктам активного высвобождения, состоящих из цитотоксических средств, где конъюгаты получены посредством реакции циклоприсоединения. Предусматриваются способы получения, фармацевтические композиции и способы применения.

Перекрестная ссылка на родственные заявки

Заявляется преимущество предварительной заявки на патент США с серийным номером 62/, поданной 4 декабря года.

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к конъюгатам биомолекул, которые содержат биомолекулу, в которой по меньшей мере одна аминокислота неприродного происхождения (NNAA) является встроенной в структуру биомолекулы и в которой NNAA представляет собой точку присоединения линкера, к которой присоединяется полезная нагрузка, в частности цитотоксическое средство. Данное изобретение дополнительно относится к конъюгатам клеточно-связывающих средств и цитотоксических средств, где конъюгаты получены посредством реакции циклоприсоединения. Предусматриваются способы получения, фармацевтические композиции и способы применения.

Уровень техники изобретения

Терапевтические средства на основе антител нового поколения (NGA) с модификациями архитектуры антител представляют собой ключевую сферу научных исследований и разработок в области моноклональных антител (mAb). Основным направлением является онкология, где приблизительно 50% всего ассортимента разрабатываемых онкологических препаратов на основе mAb составляют NGA. Syed, В.А., et al., Next-Generation Antibodies, Nature Reviews Drug Discovery, ().

Конъюгаты лекарственных средств на основе антител (ADC), наиболее показательные среди новых технологических платформ для антител, обычно содержат цитотоксическое средство, присоединенное к mAb посредством химических линкеров. Обладая способностью нацеленно доставлять химиотерапевтические средства напрямую в раковую ткань, ADC могут увеличивать клиническую эффективность mAb и позволяют использовать цитотоксины, которые являются слишком высокоактивными для системного применения. Первый продукт на основе ADC, гемтузумаб озогамицин (MYLOTARG®; Wyeth), калихеамицин-связанное CDспецифичное mAb для лечения острого миелоидного лейкоза (AML), одобрили в году, однако, отозвали в году по соображениям безопасности. Появились новые платформы для разработки ADC, такие как платформа с использованием нацеленных антител в качестве полезной нагрузки (ТАР; Seattle Genetics and ImmunoGen). В конце года брентуксимаб ведотин (ADCETRIS®; Seattle Genetics), CDспецифичное mAb, присоединенное к антимитотическому средству монометил ауристатину Е (ММАЕ) для лечения неходжкинских лимфом (NHL), стал первым среди новых ADC, которые были одобрены Управлением по контролю за качеством пищевых продуктов и лекарственных средств США (FDA). Вторым был одобрен адо-трастузумаб-эмтанзин (KADCYLA®; Genentech/Roche) в начале года. Адо-трастузумаб-эмтанзин и mAb пертузумаб (PERJETA®; Roche (одобренный в году)) разрабатывали как расширение ассортимента для трастузумаба (HERCEPTIN®; Roche), нацеленного на HER2 (также известный как ERBB2), с разными механизмами действия; PERJETA® ингибирует HER2-HER3 димеризацию, при этом адо-трастузумаб-эмтанзин доставляет цитотоксическую полезную нагрузку к клеткам.

Цитооксические молекулы, радионуклиды и определенные химиотерапевтические лекарственные средства были химически присоединены к моноклональным антителам, которые связывают опухолеспецифичные или ассоциированные с опухолью антигены клеточной поверхности. См., например, международную заявку на патент (РСТ) № WO 00/, WO 02/, WO 02/; и патенты США № , , , и

В существующих способах разработки mAb обычно используют такие методики, как конструирование шарнирной части и созревание аффинности. Однако еще остается непростая задача повышения эффективности и сведения к минимуму нежелательных побочных эффектов при терапии с применением иммуноконьюгатов.

Сущность изобретения

Изобретение относится к выделенным конъюгатам биомолекул и выделенным конъюгатам биомолекул, полученным посредством реакции циклоприсоединения, описанной в данном документе.

Настоящее изобретение также относится к способам получения выделенных конъюгатов биомолекул посредством циклоприсоединения, включающим ;0— (E)_m—d формула I, получение соединения формулы I, которое содержит циклический напряженный алкин или алкен, (А) присоединенный к линкеру (спейсерной группе), ((Е)_m), и где полезная нагрузка (D) также присоединена к линкеру; и св)—М-Т

Формула II получение соединения формулы II, биомолекулы (СВ), содержащей по меньшей мере одну амино- 1 кислоту неприродного происхождения (NNAA) (М), встроенную в ее структуру, где NNAA имеет азидную (например, азидо-фенилаланин или азидо-пара-метил-фенилаланин) или тетразиновую группу (Т); и проведение реакции соединения формулы I с соединением формулы II с образованием соединения (конъюгата биомолекулы) формулы III, формулы III' или формулы III

D

Формула 11

Формула III

Настоящее изобретение дополнительно направлено на выделенные конъюгаты биомолекул формулы III, III' или III, полученные посредством реакций циклоприсоединения, описанных в данном документе, где конъюгаты биомолекул включают по меньшей мере одну аминокислоту неприродного происхождения (NNAA) (М), встроенную в биомолекулу (CH₂)_pVW(CH₂)—

R^eHN^COR⁷

Формула IV где каждый из р и q представляет собой целое число от 0 до 10; R⁶ представляет собой Н, аминокислоту в полипептиде или связь; R⁷ представляет собой ОН, аминокислоту в полипептиде или связь;

V представляет собой алкил или арил, карбоцикл, гетероцикл или отсутствует; и W представляет собой О, N, S или отсутствует.

Изобретение соответственно дополнительно направлено на выделенные конъюгаты биомолекул формулы III, III' (или III (III также будет рассматриваться по всему объему данного раскрытия)), полученные посредством реакции циклоприсоединения, описанной в данном документе, где конъюгаты биомолекул содержат по меньшей мере одну аминокислоту неприродного происхождения (NNAA) (М), встроенную в структуру биомолекулы, выбранной из группы, по сути состоящей из формул

В дополнение, настоящее изобретение направлено на выделенные конъюгаты биомолекул формулы III или III', полученные посредством реакций циклоприсоединения, описанных в данном документе, где конъюгаты биомолекул содержат по меньшей мере одну полезную нагрузку (D), которая представляет

- 2 собой цитотоксическое средство.

Настоящее изобретение, соответственно, дополнительно направлено на выделенные конъюгаты биомолекул формулы III или III', полученные посредством реакций циклоприсоединения, описанных в данном документе, где конъюгаты биомолекул содержат по меньшей мере один майтанзиноид в качестве полезной нагрузки (D).

Настоящее изобретение, соответственно, дополнительно направлено на выделенные конъюгаты биомолекул формулы III или III', полученные посредством реакций циклоприсоединения, описанных в данном документе, где конъюгаты биомолекул содержат по меньшей мере одно цитотоксическое средство в качестве полезной нагрузки (D) структуры

Настоящее изобретение дополнительно направлено на фармацевтические композиции, которые содержат терапевтически эффективное количество конъюгата биомолекул, описанного в данном документе, и фармацевтически приемлемый носитель.

Настоящее изобретение дополнительно направлено на способ лечения патологического физиологического состояния у млекопитающего, включающий введение эффективного количества конъюгата био молекул, описанного в данном документе.

Настоящее изобретение, соответственно, дополнительно направлено на способ лечения нарушения пролиферации клеток у млекопитающего, включающий введение эффективного количества конъюгата биомолекул, описанного в данном документе.

Настоящее изобретение соответственно дополнительно направлено на способ лечения гематологического нарушения онкологического характера у млекопитающего, включающий введение эффективного количества конъюгата биомолекул, описанного в данном документе.

Настоящее изобретение также направлено на выделенное соединение (^E)_m — ^D

Формула I где А представляет собой напряженное алкиновое или алкеновое кольцо, где кольцо представляет собой карбоциклил или гетероциклил,

D представляет собой полезную нагрузку;

каждый Е независимо выбран из группы, состоящей из -СО-, -CR R -, -NR -, -S-S-, -S-, -SO-, -SO2-, -О-, -CR³=N-NR³-, -CR³=N-O-, -CR³=N-NR³-CO-, -N=N-CO-, алкила, С3-С8карбоциклила, -O-(CR¹R2)a-, арила, -(CR¹R²)a-арила, гетероарила, -(CR¹R²)a-гетероарила, -(CR¹R²)a-C3-С8карбоциклила, гетероциклила, -(CR¹R²)а-гетероциклила, -(СН₂СН₂О)_а-, -(СН₂СН₂О)_а-(СН₂)_b, -(СН₂)_аС(О)-, аминокислоты и пептида;

каждый из R¹ и R² независимо выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br, I, ОН, -N(R³)2, -N(R³)3⁺, С1-С8алкилгалогенида, карбоксилата, сульфата, сульфамата, сульфоната, -SO2R³, -S(=O)R³, -SR³, -SO2N(R³)2, -C(=O)R³, -CO2R³, -C(=O)N(R³)2, -CN, -N₃, -NO2, С1-С₈алкокси, полиэтиленокси, фосфоната, фосфата, С1-С₈алкила, С₂-С₈алкенила, С₂-С₈алкинила, арила, гетероарила, С₃-С₈карбоциклила и С₁-С₂₀гетероциклила; или, если взятые вместе, R¹ и R² образуют карбонил (=O) или спирокарбоциклическое кольцо, содержащее от 3 до 7 атомов углерода; и

R³ выбран из группы, состоящей из Н, С1-С8алкила, С2-С8алкенила, С2-С8алкинила, С6-С20арила, С5-С20гетероарила, С3-С8карбоциклила и С1-С20гетероциклила; при этом алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, карбоциклил и гетероциклил необязательно независимо замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из F, Cl, Br, I, ОН, -N(R³)2, -N(R³)3⁺, C1-С8алкилгалогенида, карбоксилата, сульфата, сульфамата, сульфоната, С1-С8алкилсульфоната, С1-С8алкиламино, 4-диалкиламинопиридиния, С1-С8алкилгидроксила, С1-С8алкилтиола, -SO2R, -S(=O)R³, -SR³, -SO2N(R³)2, -C(=O)R³, -CO2R³, -C(=O)N(R³)2, -CN, -N3, -NO2, С1-С₈алкокси, С_гС₈трифторалкила, C₁-С₈алкила, С₃-С₁₂карбоцикла, С₆-С₂₀арила, С₆-С₂₀гетероарила, С₃-С₈карбоциклила, С₂-С₂₀гетероциклила, полиэтиленокси, фосфоната и фосфата; m представляет собой целое число от 1 до ; и каждый из а и b представляет собой целое число от 1 до

Настоящее изобретение дополнительно направлено на выделенное соединение формулы I, где каждый Е независимо выбран из группы, состоящей из -(СН₂СН₂О)_а-, -(CH2)_aC(O)NR³-, -(CH2)_aNR³C(O)-, -(CH2)aC(O)NR³(CH2)b-, -(CH2)aC(O)NR³(CH2CH2O)b-, -(CH2)aC(O)NR³(CH2CH2O)b(CH2)c-,

- 3

-(CH₂CH₂O)_aC(O)NR³(CH2CH2O)b-, -(CH2CH2O)aC(O)NR³(CH2CH₂O)b, -(CH₂CH₂O)_aC(O)NR³(CH₂)b-,

-(СН2СН2О)_а-(СН2)ь, -(CH2)aC(O)-, -CR³=N-NR³-, -CR³=N-O-, -CR³=N-NR³-CO-, -N=N-CO-, -S-, -SO-,

-SO2-, аминокислоты, дипептида, трипептида

R³ R³

El и

О

О

Е2, где G выбран из группы, состоящей из алкила, арила, карбоциклила и гетероциклила; и

G1, где каждый из H1, H2 и Н₃ независимо выбран из N или CR1.

Настоящее изобретение дополнительно направлено на выделенное соединение формулы I, где каждый Е независимо выбран из группы, состоящей из

OR³ О

- 4

где J представляет собой аминокислоту или пептид;

каждый из d, e, g, i, j и k независимо представляет собой целое число от 1 до 30;

h представляет собой целое число от 0 до 30;

R³ определен, как указано выше;

каждый R⁴ независимо выбран из группы, состоящей из Н, алкила, -N(R³)2, -SR³ и С1-С8алкокси, арила; и

R⁵ выбран из группы, состоящей из Н, -N(R³)2, -SR³, С1-С8алкокси, арила и NO2.

Настоящее изобретение дополнительно направлено на каждое из следующих иллюстративных выделенных соединений формулы I, а также на их аналоги и производные

П,

- 5

- 6

- 7

R представляет собой Н или СН3 (метил); и

- 8

Краткое описание фигур

На фиг. 1 изображен пример получения соединения формулы I сначала путем образования группы амидных связей с последующим удлинением линкера;

на фиг. 2 - пример получения соединения формулы I и соответствующих промежуточных соединений;

на фиг. 3 показано получение промежуточного соединения, где напряженный алкин присоединен к фрагменту линкера;

на фиг. 4 описано получение соединения формулы I сначала путем образования группы амидных связей с последующим удлинением линкера;

на фиг. 5 - получение промежуточного соединения, где напряженный алкин присоединен к линкеру;

на фиг. 6А изображена реакция 1,3-диполярного циклоприсоединения;

на фиг. 6В - реакция 4+2-циклоприсоединения напряженного алкена и тетразина;

на фиг. 7 схематично изображены амидные связи, применяемые для присоединения цитотоксиче ских средств;

на фиг. 8 показан пример NNAA для применения в настоящем изобретении;

на фиг. 9А-С изображены некоторые примеры соединений по настоящему изобретению;

на фиг. 10 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 11 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 12 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 13 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 14 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 15 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 16 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 17 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 18 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 19 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 20 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 21 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 22 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 23 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 24 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению;

на фиг. 25 - пример схемы синтеза соединения по настоящему изобретению.

Подробное описание изобретения

Если не определено иное, все технические и научные термины, использованные в данном документе, имеют то же значение, которое принято среди специалистов в данной области техники, к которой относится настоящее изобретение. Все публикации и патенты, упомянутые в данном документе, включены посредством ссылки.

Нацеленные противораковые терапевтические средства, описанные в данном документе, разработаны для снижения неспецифической токсичности и увеличения эффективности в отношении традиционной химиотерапии при раке. Такой подход осуществили благодаря мощной способности к нацеливанию моноклональных антител для специфической доставки высокоактивных конъюгированных терапевтических средств к клетке, которая содержит рак-специфические или рак-ассоциированные антигены. Полезные нагрузки, в частности цитотоксические средства, связаны с нацеливающимися молекулами, такими как антитела или лиганды, которые связываются с высоким уровнем специфичности к раковым клеткам, с образованием соединений, называемых в данном документе конъюгаты биомолекул (конъюгаты), или конъюгаты антитело-лекарственное средство (ADC), или иммуноконъюгаты. Конъюгаты, описанные в данном документе, должны быть менее токсичными, поскольку они направляют цитотоксическое средство к клеткам, например, клеткам рака крови, которые проявляют или иным образом сверхэкпрессируют конкретный клеточный поверхностный антиген или рецептор.

Сейчас будет приведена подробная ссылка на некоторые варианты осуществления настоящего изобретения, примеры которых проиллюстрированы в сопроводительных структурах и формулах. Хотя изо

- 9 бретение будет описано в связи с раскрытыми в данном документе вариантами осуществления, следует понимать, что они не предназначены для ограничения настоящего изобретения этими вариантами осуществления. Напротив, изобретение предназначено для охвата всех альтернатив, модификаций и эквивалентов, которые могут быть включены в объем настоящего изобретения, а также определяются прилагаемой формулой изобретения. Специалист в данной области техники будет знаком с многими способами и материалами, подобными или эквивалентными описанным в данном документе, которые могут применяться в практическом осуществлении настоящего изобретения. Настоящее изобретение каким-либо образом не ограничено описанными способами и материалами. Следует понимать, что в следующем подробном описании и прилагаемой формуле изобретения используются аббревиатуры и номенклатура, которые по сути являются стандартными в химии.

Если не указано иное, следующие термины и фразы, применяемые в данном документе, имеют следующие определения.

Алкил представляет собой С1-С₁₈углеводородный фрагмент, содержащий нормальные, вторичные, третичные атомы углерода или атомы углерода, замкнутые в цикл. Примеры алкильных радикалов включают С1-С₈углеводородные фрагменты, такие как метил (Me, -СН₃), этил (Et, -СН2СН₃), 1-пропил (nPr, н-пропил, -СН2СН2СН₃), 2-пропил (i-Pr, изопропил, -СН(СН₃)₂), 1-бутил (n-Bu, н-бутил, -СН₂СН₂СН₂СН₃), 2-метилпропил (i-Bu, изо-бутил, -СН₂СН(СН₃)₂), 2-бутил (s-Bu, втор-бутил, -СН(СН₃)СН₂СН₃), 2-метилпропил (t-Bu, трет-бутил, -С(СН₃)₃), 1-пентил (н-пентил, -СН₂СН₂СН₂СН₂СН₃), 2-пентил (-СН(СН₃)СН₂СН₂СН₃), 3-пентил (-СН(СН₂СН₃)₂), 2-метилбутил (-С(СН₃)₂СН₂СН₃), 3-метилбутил (-СН(СН₃)СН(СН₃)₂), 3-метилбутил (-СН₂СН₂Сн(СН₃)₂), 2-метил1-бутил (-СН2СН(СНз)СН2СНз), 1-гексил (-СН2СН2СН2СН2СН2СН3), 2-гексил (-СН(СНз)СН2СН2СН2СНз), 3-гексил (-СН(СН2СН3)(СН2СН2СН3)), 2-метилпентил (-С(СН3)2СН2СН2СН3), 3-метилпентил (-СН(СН₃)СН(СН₃)СН₂СН₃), 4-метилпентил (-СН(СН₃)СН₂СН(СН₃)₂), 3-метилпентил (-С(СН3)(СН2СН3)2), 2-метилпентил (-СН(СН2СН3)СН(СН3)2), 2,3-диметилбутил (-С(СН3)2СН(СН3)2), 3,3-диметилбутил (-СН(СН3)С(СН3)3, 1-гептил, 1-октил, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил. Алкильная группа может быть замещенной или незамещенной.

Алкенил представляет собой С₂-С₁₈углеводородный фрагмент, содержащий нормальные, вторичные, третичные атомы углерода или атомы углерода, замкнутые в цикл, по меньшей мере с одним центром ненасыщенности, т.е. углерод-углеродной двойной sp2-связью. Примеры алкенильных радикалов включают С₂-С₈углеводородные фрагменты, такие как, без ограничений, этилен или винил (-СН=СН₂), аллил (-СН₂СН=СН₂), 1-циклопентенил, 1-циклопентенил, 1-циклопентенил, 5-гексенил (-СН₂СН₂СН₂СН₂СН=СН₂), 1-циклогексенил, 1-циклогексенил и 1-циклогексенил. Алкенильная группа может быть замещенной или незамещенной.

Алкинил представляет собой С₂-С₁₈углеводородный фрагмент, содержащий нормальные, вторичные, третичные атомы углерода атомы углерода, замкнутые в цикл, по меньшей мере с одним центром ненасыщенности, т.е. углерод-углеродной тройной sp-связью. Примеры алкинильных радикалов включают С₂-С₈углеводородные фрагменты, такие как, без ограничений, ацетиленовый (-С^СН) и пропаргиловый (-СН₂С^СН). Алкинильная группа может быть замещенной или незамещенной.

Амино является замещенным или незамещенным, если не указано иное. Аминогруппа может быть замещена одним или двумя заместителями, выбранными из водорода, алкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, циклоалкилалкила, арилалкила, гидроксиалкила, алкоксиалкила, галогеналкила, незамещенного или замещенного арила, аминоалкила, ацила, например формила, алкилкарбонила, арилкарбонила, алкилсульфонила или арилсульфонила и является преимущественно амино, метиламино, диметиламино, пропиламино, бензиламино, гидроксиэтилметиламино, ди(гидроксиэтил)амино, диметиламиноэтиламино, ацетиламино, ацетилметиламино, бензоиламино, метилсульфониламино или фенилсульфониламино, в частности, амино или диметиламино.

Арил обозначает любую ароматическую группу на основе углерода, включающую без ограничений бензол, нафталин, фенил, бифенил, феноксибензол и подобные. Арильная группа может быть замещенной или незамещенной. Термин гетероарил определяется как группа, содержащая ароматическую группу, имеющую по меньшей мере один гетероатом, встроенный в кольцо ароматической группы. Примеры гетероатомов включают без ограничений азот, кислород, серу, 10 и фосфор. Термин не относящийся к гетероарилу, который включен в термин арил, определяет группу, содержащую ароматическую группу, которая не содержит гетероатом. Арильная или гетероарильная группа может быть замещенной или незамещенной. Арильная или гетероарильная группа может быть замещена одной или несколькими группами, включающими без ограничений алкил, галогенированный алкил, алкокси, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, альдегид, амино, карбоновую кислоту, сложный эфир, простой эфир, 15 галогенид, гидрокси, кетон, нитро, силил, сульфо-оксо, сульфонил, сульфон, сульфоксид или тиол, как описано в данном документе. Термин биарил представляет собой конкретный тип арильной группы и включен в определение арила. Биарил относится к двум арильным группам, которые связаны вместе посредством конденсированной кольцевой структуры, как в нафталине, или присоединены посредством одной или нескольких углерод-углеродных связей, как в бифениле.

- 10

Гетероциклическое соединение или гетероциклил представляет собой насыщенное, частично насыщенное или ненасыщенное моно- или бициклическое кольцо, содержащее атомов, из которых по меньшей мере один атом выбран из азота, серы или кислорода, который может, если не определено иное, представлять собой связанный атом углерода или азота, где группа -СН₂- может необязательно быть заменена -С(О)-, а атом серы в кольце может быть необязательно окислен с образованием 3-оксида(ов). Примеры гетероциклилов включают без ограничений пирролидинил, морфолино, пиперидил, пиридил, пиранил, пирролил, изотиазолил, индолил, хинолил, тиенил, фурил, 1,3-бензодиоксолил, тиазолил, пиперазинил, изоксазолил, тиазолил, тиазолидин, пирролидинил, тиоморфолино, пиразолил, пирролинил, гомопиперазинил, тетрагидропиранил, имидазолил, пиримидил, пиразинил, пиридазинил, изоксазолил, 4-пиридон, 1-изохинолон, 2-пирролидон, 4-тиазолидон, имидазо[1,2-а]пиридин или 3-азаоксабицикло[3,2,1]гексан. Гетероциклы описаны в Paquette, Leo A., Principles of Modern Heterocyclic Chemistry (W.A. Benjamin, New York, ), в частности, главы 1, 3, 4, 6, 7 и 9; The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs (John Wiley & Sons, New York, с по настоящее время), в частности, тома 13, 14, 16, 19 и 28; и J. Am. Chem. Soc. () Гетероциклическая группа может быть замещенной или незамещенной.

Карбамоил может быть замещенным или незамещенным, если не указано иное. Карбамоильная группа может быть замещена одним или двумя заместителями, выбранными из водорода, алкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, циклоалкилалкила, арилалкила, гидроксиалкила, алкоксиалкила, галогеналкила, незамещенного или замещенного арила, или аминоалкила, или карбамоила, где заместители и атом азота карбамоильной группы представлены 5- или 6-членным гетероциклилом, дополнительно содержащим 0, 1 или 2 гетероатома, выбранных из N, О и S, и при этом предпочтительно представляет собой карбамоил, метилкарбамоил, диметилкарбамоил, пропилкарбамоил, гидроксиэтилметилкарбамоил, ди(гидроксиэтил)карбамоил, диметиламиноэтилкарбамоил или пирролидинокарбонил, пиперидинокарбонил, N-метилпиперазинокарбонил или морфолинокарбонил, в частности карбамоил или диметилкарбамоил.

Карбоцикл и карбоциклил являются синонимичными, обозначают насыщенное или ненасыщенное кольцо, содержащее от 3 до 7 атомов углерода в виде моноцикла, или от 7 до 12 атомов углерода в виде бицикла. Моноциклические карбоциклы содержат от 3 до 6 атомов кольца, однако, более типично 5 или 6 атомов кольца. Бициклические карбоциклы содержат от 7 до 12 атомов кольца, расположенных, например, в виде бицикло-систем [4,5], [5,5], [5,6] или [6,6], или 9, или 10 атомов кольца, расположенных в виде бицикло-систем [5,6] или [6,6]. Примеры моноциклических карбоциклов включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, 1-циклопентенил, 1-циклопентенил, 1-циклопентенил, циклогексил, 1циклогексенил, 1-циклогексенил, 1-циклогексенил, циклогептил и циклооктил. Карбоциклическая группа может быть замещенной или незамещенной.

Аминокислота неприродного происхождения (NNAA), в сущности, относится к аминокислоте, которая не относится к одной из 20 аминокислот, встречающихся в природе. Примеры такой NNAA включают без ограничений аминокислоты, содержащие азидную группу или тетразиновую группу. Пример NNAA включает без ограничений азидо-фенилаланин или азидо-пара-метил-фенилаланин.

Связующая группа, как определено в данном документе, например, относится к функциональной группе между линкером (Е) и полезной нагрузкой (D). Примеры связующей группы включают, без ограничений, амидную, сложноэфирную, карбаматную, эфирную, тиоэфирную, дисульфидную, гидразиновую, оксимовую, семикарбазидную, мочевиннную, карбонатную, кислотолабильную группу, фотолабильную группу, пептидазолабильную группу и эстеразолабильную группу. См., US ; ; ; ; ; ; ; ; и

Линкер (спейсерная группа) (Е) относится к химическому фрагменту между двумя связующими группами. CB-E-D. Линкер (Е) представляет собой химический фрагмент между связующей группой клеточносвязывающего средства (СВ) и связующей группой полезной нагрузки (D). Линкер (Е) может быть расщепляемым или нерасщепляемым. Линкер соединяет цитотоксическое средство с клеточносвязывающим средством или химическим фрагментом, который может быть дополнительно присоединен к клеточносвязывающему средству. Например, линкер (Е) соединяет майтанзиноид с химическим фрагментом, таким как напряженный алкин, способный соединятся, как описано в данном документе, с антителом, содержащим азид-замещенную аминокислоту неприродного происхождения, посредством циклоприсоединений Хьюсгена (также называемых клик-реакциями Шарплесса).

Получение и применение линкеров легко доступно специалистам в данной области техники. Goldmacher et al., Antibody-drug Conjugates and Immunotoxins: From Pre-clinical Development to Therapeutic Applications, глава 7, в Linker Technology and Impact of Linker Design on ADC Properties, под редакцией Phillips GL; Ed. Springer Science and Business Media, New York (). Структуры линкеров для применения в настоящем изобретении также раскрыты, например, в US ; ; ; ; и ; все раскрытия которых включены в данный документ посредством ссылки.

Расщепляемые линкеры (Е) представляют собой линкеры, которые могут расщепляться в мягких условиях. Дисульфидсодержащие линкеры представляют собой линкеры, расщепляемые посредством дисульфидного обмена, происходящего при физиологических условиях. Кислотолабильные линкеры

- 11 представляют собой линкеры, расщепляемые при кислом значении рН. Например, некоторые внутриклеточные компартменты, такие как эндосомы и лизосомы, имеют кислое значение рН (рН ) и обеспечивают подходящие условия для расщепления кислотолабильных линкеров. Линкеры, которые являются фототолабильными, применимы на поверхности тела и во многих полостях тела, которые доступны для света. Кроме того, инфракрасный свет может проникать в ткань. Некоторые линкеры могут расщепляться естественными пептидазами. См., например, Trouet et al. 79 Proc. Natl. Acad. Sci. USA, () и Umemoto, et al, 43 Int. J. Cancer, (). Пептиды состоят из α-аминокислот и пептидных связей, которые представляют собой амидные связи между карбоксилатом одной аминокислоты и α-аминогруппой другой аминокислоты и так далее. Другие амидные связи, такие как связь между карбоксилатом и ε-аминогруппой лизина, не принято относить к пептидным связям, и они считаются нерасщепляемыми. Многие линкеры, известные из уровня техники, могут расщепляться эстеразами. Только некоторые сложные эфиры, известные из уровня техники, могут расщепляться эстеразами, присутствующими внутри или на поверхности клеток. Сложные эфиры образуются посредством конденсации карбоновой кислоты и спирта. Простые сложные эфиры представляют собой сложные эфиры, полученные из простых спиртов, таких как алифатические спирты, а также циклические и ароматические спирты с небольшой молекулярной массой.

Нерасщепляемый линкер (Е) представляет собой любой химический фрагмент, способный связывать полезную нагрузку, например, цитотоксическое средство с клеточносвязывающим средством устойчиво, ковалентно и не попадает под категории, перечисленные выше, как расщепляемые линкеры. Таким образом, нерасщепляемые линкеры, как правило, устойчивы к кислотно-индуцированному расщеплению, расщеплению, индуцированному светом, пептидазоиндуцированному расщеплению, эстеразоиндуцированному расщеплению и расщеплению дисульфидной связи. Термин фармацевтически приемлемая соль, применяемый в данном документе, относится к фармацевтически приемлемым органическим или неорганическим солям соединения по настоящему изобретению, в том числе конъюгатам биомолекул. Иллюстративные соли включают без ограничений сульфат, цитрат, ацетат, оксалат, хлорид, бромид, йодид, нитрат, бисульфат, фосфат, кислый фосфат, изоникотинат, лактат, салицилат, кислый цитрат, тартрат, олеат, таннат, пантотенат, битартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентизинат, фумарат, глюконат, глюкуронат, сахарат, формиат, бензоат, глутамат, метансульфонат мезилат, этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат, памоатовые (т.е. 1,1'-метилен-бис-(2-гидроксинафтоат)) соли, соли щелочных металлов (например, натрия и калия), соли щелочно-земельных металлов (например, магния) и аммонийные соли. Фармацевтически приемлемая соль может содержать включение другой молекулы, такое как ацетатный ион, сукцинат-ион или другой противоположно заряженный ион. Противоположно заряженный ион может быть любым органическим или неорганическим фрагментом, стабилизирующим заряд на исходном соединении. Кроме того, фармацевтически приемлемая соль может иметь более одного заряженного атома в своей структуре. Существуют случаи, когда несколько заряженных атомов являются частью фармацевтически приемлемой соли, могут иметь несколько противоположно заряженных ионов. Таким образом, фармацевтически приемлемая соль может иметь один или несколько заряженных атомов и/или один или несколько противоположно заряженных ионов.

Термин терапевтически эффективное количество или эффективное количество означает количество активного соединения или конъюгата, которое вызывает желаемый биологический ответ или терапевтический эффект у субъекта. Такой ответ включает облегчение симптомов подлежащего лечению заболевания или расстройства, предотвращение, ингибирование или задержку повторения симптома заболевания или самого заболевания, увеличение продолжительности жизни субъекта по сравнению с отсутствием лечения или профилактики, ингибирования или задержки прогрессирования симптома заболевания или самого заболевания. Определение эффективного количества вполне соответствует возможностям специалистов в данной области техники, особенно в свете подробного раскрытия, представленного в данном документе. Токсичность и терапевтическую эффективность определяют с помощью стандартных фармацевтических процедур в культуре клеток и при испытаниях на животных. Эффективное количество соединения или конъюгата по настоящему изобретению или другого терапевтического средства, вводимого субъекту, будет зависеть от стадии, категории и статуса состояния, например, множественной миеломы или лейкоза, и характеристик субъекта, таких как общее состояние здоровья, возраст, пол, масса тела и переносимость препарата. Эффективное количество соединения или конъюгата по настоящему изобретению или другого вводимого терапевтического средства также будет зависеть от пути введения и лекарственной формы. Предпочтительными являются внутривенный (IV) и подкожный (SC) пути введения. Чтобы обеспечить достаточный для поддержания желаемых терапевтических эффектов уровень активного соединения в плазме, количество и интервал дозирования можно регулировать индивидуально.

Стереохимические определения и условные обозначения, применяемые в данном документе, обычно следуют S.P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms () McGraw-Hill Book Company, New York; и Eliel, E. и Wilen S., Stereochemistry of Organic Compounds, John Wiley & Sons, Inc., New York, Если не указано иное, предусматривается, что соединения по настоящему изобретению включают все стереоизомеры, существующие как отдельный изомер или в смеси с другими изомерами.

- 12

В формуле I соединения по настоящему изобретению (А) представляют собой напряженное кольцо,

т.е. напряженное алкиновое кольцо или напряженное алкеновое кольцо. Напряженный алкин (А) или напряженный алкен (А) и, например, цитотоксическое средство (D) соединены посредством линкера (E)m. Различные связующие группы, использующиеся в точке присоединения (Е)_m (к (А) или (D), или к обоим), включают, например, без ограничений,сложный эфир, амид, карбамат, амин и тиоэфир.

Формула I.

Соединение формулы I :0—(E)_m—d формула I,

А представляет собой кольцо, при этом А представляет собой кольцо с напряженным алкином, когда пунктирная линия представляет собой связь, или А представляет собой кольцо с напряженным алкеном, когда пунктирная линия отсутствует;

формула I, другими словами, содержит обе следующие структуры:

10— О—о формула 1а

19675 19676 19677 19678 19679

çamaşır makinesi ses çıkarması topuz modelleri kapalı huawei hoparlör cızırtı hususi otomobil fiat doblo kurbağalıdere parkı ecele sitem melih gokcek jelibon 9 sınıf 2 dönem 2 yazılı almanca 150 rakı fiyatı 2020 parkour 2d en iyi uçlu kalem markası hangisi doğduğun gün ayın görüntüsü hey ram vasundhara das istanbul anadolu 20 icra dairesi iletişim silifke anamur otobüs grinin 50 tonu türkçe altyazılı bir peri masalı 6. bölüm izle sarayönü imsakiye hamile birinin ruyada bebek emzirdigini gormek eşkiya dünyaya hükümdar olmaz 29 bölüm atv emirgan sahili bordo bereli vs sat akbulut inşaat pendik satılık daire atlas park avm mağazalar bursa erenler hava durumu galleria avm kuaför bandırma edirne arası kaç km prof dr ali akyüz kimdir venom zehirli öfke türkçe dublaj izle 2018 indir a101 cafex kahve beyazlatıcı rize 3 asliye hukuk mahkemesi münazara hakkında bilgi 120 milyon doz diyanet mahrem açıklaması honda cr v modifiye aksesuarları ören örtur evleri iyi akşamlar elle abiye ayakkabı ekmek paparası nasıl yapılır tekirdağ çerkezköy 3 zırhlı tugay dört elle sarılmak anlamı sarayhan çiftehan otel bolu ocakbaşı iletişim kumaş ne ile yapışır başak kar maydonoz destesiyem mp3 indir eklips 3 in 1 fırça seti prof cüneyt özek istanbul kütahya yol güzergahı aski memnu soundtrack selçuk psikoloji taban puanları senfonilerle ilahiler adana mut otobüs gülben ergen hürrem rüyada sakız görmek diyanet pupui petek dinçöz mat ruj tenvin harfleri istanbul kocaeli haritası kolay starbucks kurabiyesi 10 sınıf polinom test pdf arçelik tezgah üstü su arıtma cihazı fiyatları şafi mezhebi cuma namazı nasıl kılınır ruhsal bozukluk için dua pvc iç kapı fiyatları işcep kartsız para çekme vga scart çevirici duyarsızlık sözleri samsung whatsapp konuşarak yazma palio şanzıman arızası